全自动血液分析仪在某些白血病初诊中的应用

目的：评价Bayer公司ADVIA120型全自动血液分析仪(下称ADVIA120)检测外周血液，在某些白血病初诊中的价值。方法：将可疑白血病患者的血液分析检测结果与该病人骨髓穿刺和临床诊断结果进行双盲比较。结果：64例各型白血病患者ADVIA120分析结果与白血病诊断的金标准(骨髓穿刺细胞学分析)比较，在急性早幼粒细胞白血病(M3)、慢性粒细胞白血病(CML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性粒细胞白血病未分化型或部分分化型(M1、2)、急性单核细胞白血病(M5)中两者符合率分别为100％，87．0％，88．9％，71．4％。66．7％。结论：ADVIA120型血液分析仪对M3、CML、ALL初诊有较高的价值。     

巴斯德毕赤酵母真核蛋白表达系统的研究进展

自 1 98 1年 hitzeman等 [1 ] 首次在酿酒酵母中表达了人重组干扰素基因后 ,相继又有多种外源基因表达成功。但是常规的酿酒酵母表达系统由于发酵密度不高 ,蛋白分泌能力较差 ,糖基化修饰过度可能会引起副反应等 ,近年来已被新的酵母宿主细胞所取代 ,如巴斯德毕赤酵母、乳酸克鲁维亚酵母、粟酒裂殖糖酵母、烷烃利用型耶鲁酵母、西方许旺氏酵母和多形汉逊酵母等 ,合称非常规酵母表达系统。它们往往具有营养要求简单、生长旺盛、生物量大、温度适应范围广 (2 5℃～ 4 6℃ )、蛋白质分泌能力强等特点 ,正好补充了酿酒酵母的不足。其中的巴斯德…     

中性粒细胞髓过氧化物酶缺乏症的实验室诊断

目的:了解实验室发现的2例中性粒细胞髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)缺乏症,探讨MPO缺乏症的实验室诊断方法.方法:用Bayer公司的ADVIA 120型血细胞分析仪进行全血细胞计数(CBC)及MPO活性指数(MPXI)的测定;外周血涂片瑞特染色和MPO细胞化学染色.结果:经ADVIA 120血液学分析仪检测,发现2例MPO完全缺乏症的患者白细胞分布散点图异常,血涂片MPO细胞化学染色呈阴性,瑞特染色形态正常.结论:血细胞分析仪CBC检查、外周血涂片瑞特染色和MPO细胞化学染色是检测MPO缺乏症的重要指标.     

Smith抗原的性质特征及临床意义

系统性红斑狼疮（SLE）是一种自身免疫性疾病，患者血清中可检出多种自身抗体，但抗Smith（Sm）抗体是SLE的标记性抗体。作者就Sm抗原的理化特性、生物学作用和抗Sm抗体的检测作一综述。     

适体在病原生物感染诊断和治疗中的应用

适体是通过指数富集配基的系统进化技术获得的,能与靶物特异、高亲和力结合的单链DNA或RNA序列。随着越来越多与毒素、蛋白质、微生物等靶物质特异性结合适体的筛选,适体作为抗体的替代品在疾病的诊断和治疗领域已显示了巨大的潜能。现简要综述国内外应用适体技术诊断和治疗病原生物感染的新进展。     

抗SSA／Ro抗体研究的新进展

1979年Alspaugh等使用培养人淋巴细胞提取物与原发性Sjogren＇s综合征（pSS）患者的血清进行研究。发现该提取物中含有两种新的自身核抗原即SSA和SSB抗原，1979年Alspaugh与Clark又证明SSA抗原与Clark1968年发现的Ro抗原是同一种物质。故命名为SSA／Ro抗原，针对SSA／Ro抗原的自身抗体是已知的核糖核蛋白（fibonudeopro-teincomplex，RNP）抗体中分布最广、最常见的自身抗体之一。     

适体技术的特征与临床应用

1990年,TUERK等[1]分别独立研制了一种新型的体外筛选技术,即指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX),用于研究小分子核酸与靶物质相结合的部位、序列及空间构像.……     

人自身抗原Sm B'基因在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达

目的 通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母中表达人自身抗原Sm B'.方法 PCR扩增Sm B'基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-Sm B'.用电穿孔法转化酵母菌Sm D1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(WB)鉴定,并用免疫酶斑点法和免疫印迹法(immunoblot,IBT)检测与评价分析30例系统性红斑狼疮(SLE)患者、30例混合结缔组织病患者和30名健康体检者血清中抗-Sm B'水平差异.结果 PCR产物约700 bp,与预期657 bp接近,pPIC9k-Sm B'重组阳性克隆测序结果与核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物Sm B'的相对分子质量约32 000,WB法证实表达产物具有天然Sm B'分子的免疫原性,阴性对照菌未见目的 表达条带.免疫酶斑点法检测阳性率为46.7%(42/90),IBT的检测阳性率为51.1%(46/90);2种方法检测结果一致性较佳(Kappa值=0.911 2,P<0.01).结论 Sm B'在巴斯德毕赤酵母中分泌表达成功,这为Sm B'试剂盒研究奠定了基础.     

人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立

目的建立人结肠癌SW480细胞移植瘤模型,研究其形态学及生物学特性。方法将处于对数生长期的人结肠癌SW480细胞接种于10只裸鼠右侧背部皮下,待瘤体生长至直径1～2 cm时处死裸鼠,取出肿瘤组织,将其磨碎并与培养基混合、过滤,滤液与基质胶混合,再将基质胶细胞悬液接种于30只裸鼠右侧背部皮下7,d后处死裸鼠,观察肿瘤大体特征,光镜及电镜下观察肿瘤病理学特征。结果接种SW480细胞的裸鼠于接种后4周有3只成瘤。接种基质胶细胞悬液的裸鼠在接种后7 d有28只成瘤,瘤体形状规则,肿瘤组织呈现典型癌变特征。结论本实验成功建立了人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,该模型成瘤率高,瘤体形状规则,病理学改变与临床非常相似,为研究人结肠癌干预措施提供了较为理想的动物模型。     

舍格伦综合征A抗原（SSA60）在巴斯德毕赤酵母中的高效分泌表达及胶体金快速检测方法的建立

目的 在巴斯德毕赤酵母中表达舍格伦综舍征A抗原(SSA60)并建立肢体金快速检测方法.方法 表达质粒pPIC9k-SSA60用电穿孔法转化酵母菌SMDI168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和斑点免疫金渗滤法(DIGFA)鉴定.结果 表达产物SSA60的分子量约60 000,高拷贝巴斯德毕赤酵母转化菌的表达水平明显高于低拷贝的,表达量占分泌总蛋白60%以上,产物浓度为600～950 mg/L.DIGFA检测85份舍格伦综合征(SS)患者血清和30份正常人血清,抗SSA检测阳性率为95.3%(81/85),特异度为100%(30/30).与德国欧蒙ENA酶斑点法对比检测的符合率为96.5%(111/115),差异无统计学意义(P>0.05).结论 SSA60在巴斯德毕赤酵母中获得高效分泌表达,DIGFA简便、快速、准确,可用于临床自身免疫病的诊断.