志贺菌的分子分型方法

细菌性痢疾是由志贺菌引起的一种急性胃肠炎,同时也是旅行性腹泻病的主要病种之一。根据WHO报道,在每年约1500万的发病病例中,99%出现在发展中国家,特别是在那些个人及公共卫生设施缺乏的地区。几乎所有的病死病例都出现在发展中国家[1]。志贺菌分为四群:A群:痢疾志贺菌,B群:福氏志贺菌,C群:鲍氏志贺菌,D群:宋内氏志贺菌。A群致病强烈而迅速,通常见于极度贫穷的地区。B群和D群是痢疾的主要流行菌型,C群主要见于印度,其他国家出现C群的感染通常见于输入病例。各群在发达国家和发展中国家的分布比例差别很大,在发展中国家中各型的分离比…     

薄层紫外扫描法测定五味子醇甲在大鼠体内的代谢及脑内分布

五味子醇甲为五味子乙醇提取物中有效成分之一,具有明显中枢安定作用,本文用薄层紫外扫描方法测定醇甲在大鼠及小鼠体内的吸收、分布、排泄及脑内分布。 大鼠口服醇甲后,胃肠吸收快,静注后血药浓度呈开放二室模型。组织分布以肺浓度最高,其次为肝、心、脑、肾、肠、脾及肠最低。脑内分布以下丘脑、纹体、海马浓度最高,其次为低位脑干及间脑,大脑皮层和小脑浓度较低。静注后由尿排出量很少。醇甲自整体小鼠的消失快。结果表明醇甲自胃肠道吸收快而完全,代谢及排泄较快,组织分布广。各脑区药物浓度的差别可能与其中枢作用有关。     

志贺氏菌中发现一种新的和铁转运有关的基因簇

许多革兰氏阴性致病菌的生长需要铁 ,但宿主体内的游离铁比较缺乏。在低铁条件下 ,多数大肠杆菌和志贺氏菌可以表达多个高度亲和铁的转运系统。这些铁载体是指可螯合铁的可溶性的小分子 ,经特殊的转运系统将铁摄入到细菌体内。Ｋａｏ等报道在尿道致病性大肠杆菌 (ＵＰＥＣ)ＣＦＴ0 73菌株的ＰＡＩＣＦＴ0 73毒力岛中有 4个基因ｐｒｒＡ -ｍｏｄＤｙｃ73-ｆｅｐＣ ,其编码基因的氨基酸序列的同源性比较结果提示可能与铁转运有关〔1 ,3〕。Ｙｅ等发现该基因簇只在产生志贺毒素的大肠杆菌Ｏ1 5 7:Ｈ7中存在 ,在不产生志贺毒素的大肠杆菌Ｏ1 5 7…     

莨菪碱衍生物与M胆碱受体相互作用的构效关系

本文研究了一系列东莨菪碱衍生物对³H-QNB与大鼠脑M受体特异结合的影响。并通过比较它们的IC₅₀(用结合实验),药物—受体相互作用的解离常数K_B(抗乙酰胆碱引起的回肠收缩)以及抗震颤和抗匹罗卡品引起小鼠流涎的ED₅₀,分析了它们的构效关系。结果表明,K_B值与IC₅₀有很好的相关性(r=0.977),其线性回归的斜率为1.047;IC₅₀与抗震颤作用的ED₅₀之间相关性差,而log IC₅₀/ED₅₀值与它们的分配系数(logP)相关好(r=0.971),10号化合物的分配系数最大,中枢作用的选择性也最强。抗流涎ED₅₀与IC₅₀的相关系数为0.827。     

T—2毒素致DNA损伤的单细胞电泳观察

应用单细胞凝胶电泳法（ＳＣＧＥ），测定Ｔ－２毒素引起ｖｅｒｏ细胞的ＤＮＡ损伤。结果显示，Ｔ－２毒素在４００～８００ｎｇ／ｍｌ浓度范围内能够引起ＤＮＡ损伤并有明显的剂量反应关系。对于该项实验在大骨节病研究中的意义做了扼要讨论     

哈尔滨市儿童IDDM发病率研究

对１９８９～１９９４年哈尔滨市儿童ＩＤＤＭ发病率进行调查。结果：平均年发病率为０．５５３７／１０万，其中男、女年龄别标化率分别是０．５４９５／１０万，０．５５９１／１０万。０～４岁组年发病率最低，为０．２２６２／１０万；１０～１４岁组最高达０．９２４４／１０万。年度发病率呈现波动，１９９２年发病率最低（０．３８６３／１０万），１９９４年最高（０．７７２７／１０万）。城市和农村平均年发病率经年龄调整后分别是１．０１０１／１０万，０．１９０１／１０万。仅３例病例有家族糖尿病病史，占总病例数的６．７％。两个来源共同登记总预计值的符合率为９８．２％     

甲型流感病毒H1N1感染致小鼠肠道损伤机制的研究

目的 观察甲型流感病毒H1N1感染小鼠的一般状态、肺组织病理、肠组织病理、结肠转录组、肠内容物代谢组的变化,探究甲型流感病毒H1N1感染致小鼠肠道损伤的机制。方法 用流感病毒PR8感染C57BL/6J小鼠,留取感染后第7天肺组织、结肠组织和盲肠内容物,计算肺指数,测量结肠长度,采用苏木素–伊红染色观察肺、肠组织病理,RNA-seq法进行结肠转录组测序,非靶向代谢组学检测盲肠内容物。结果 感染模型组小鼠较空白对照组小鼠体质量减轻、活动减少,肺指数增加,结肠长度缩短,肺、结肠组织病理出现损伤。空白对照组和感染模型组小鼠共有1 609个差异基因,437个差异代谢物,这些差异基因和差异代谢物共同富集到的通路包括花生四烯酸代谢通路和色氨酸代谢通路。结论 甲型流感病毒感染可能通过改变小鼠结肠内基因表达水平和盲肠内的代谢产物造成小鼠肠道损伤。     

哈尔滨市儿童Ⅰ型糖尿病发病率及分布特征调查分析

目的 调查哈尔滨市儿童1型糖尿病的发病率及其分布特征。方法 采用捕获－再捕获方法,回顾前瞻性地对1989－1997年的0－14岁的1型糖尿病患进行登记。结果 年平均粗发病率0．65／10万（95％CI：0．50－0．80／10万）。确定校正的年发病率为0．66／10万（95％CI：0．63－0．68／10万）。标化的年发病率为0．66／10万（95％CI：0．51－0．81／10万）。发病率在1989年－1997年间是有波动的,但增长的趋势无显意义;0－14岁儿童该病的高发年龄段为10－14岁,发病率随年龄而增长的趋势有显性意义。结论 1989－1997年间,使洋滨市儿童1型糖尿病的发病率高于全国平均水平,且未显示出增长的趋势以及性别间的差异,但市区的发病率高于郊县。     

重组表达的猪溶素及其突变体诱导小鼠巨噬细胞的细胞毒性和IL-1β释放

目的观察猪溶素(Suilysin,SLY)及其无溶血活性的突变体诱导小鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PM)释放IL-1β和细胞毒的差异,为进一步研究SLY诱导炎性体激活通路奠定基础。方法重组表达纯化SLY及第353氨基酸位点突变体rSLY353L,体外和小鼠PM相互作用,用乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒作用,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β的水平。结果不同浓度rSLY(0.1~10μg)诱导小鼠PM细胞毒性呈现明显的剂量效应,rSLY(1μg/ml)诱导产生750 pg/ml的IL-1β同时细胞毒20%;rSLY(5μg/ml)可引起最大量的IL-1β释放但细胞毒高达90%。相同剂量的rSLY353L不能诱导可检测到的IL-1β和细胞毒性。rSLY与PM共孵育20 h IL-1β产量最高,20 h后IL-1β产量下降但细胞毒性随孵育时间延长而增大。结论 1μg/ml SLY和PM作用20 h可诱导较高的IL-1β产生同时细胞毒性较低,该实验条件适用于进一步进行SLY激活PM炎性体信号通路的机制研究。     

TaqMan实时荧光定量PCR检测艰难梭菌

目的 建立特异敏感的实时荧光定量PCR方法,用于艰难梭菌的快速检测;评价基于纯培养艰难梭菌和粪便中艰难梭菌的2种标准曲线;并应用该荧光定量PCR法对急性艰难梭菌感染（CDI）的小鼠进行粪便含菌量检测评价。方法 针对艰难梭菌基因组中16S rRNA序列设计特异性引物和探针,建立一套快速检测艰难梭菌含量的实时荧光定量PCR方法,验证方法的特异性、灵敏性;绘制艰难梭菌纯菌浓度梯度稀释标准曲线和粪便中同浓度梯度艰难梭菌的标准曲线,比较两者的差异;用艰难梭菌高毒株NAP1/027感染用抗生素处理的C57BL/6小鼠,建立CDI小鼠模型,同时应用该荧光定量PCR和活菌培养法定量检测小鼠粪便中的艰难梭菌含量变化。结果 建立的TaqMan实时荧光定量PCR具有较高的灵敏性和特异性,生成标准曲线的相关系数为0.999 8,斜率为-3.400 4;用纯培养艰难梭菌和粪便中艰难梭菌分别制备标准曲线,结果表明2种标准曲线定量检测结果差异无统计学意义。建立CDI小鼠模型,应用该荧光PCR能有效、准确的检测出粪便中艰难梭菌的含量,可替代费时费力的活菌培养计数法。结论 用纯培养艰难梭菌来制备标准曲线不影响对含菌粪便标本的准确定量检测,荧光定量PCR能准确快捷地检测CDI小鼠粪便中的艰难梭菌含量,比活菌计数更快速和方便,可用于艰难梭菌感染小鼠模型中小鼠肠道内艰难梭菌定植的定量检测。