血府逐瘀口服液的膜分离澄清研究

“血府逐瘀口服液”是由桃仁、红花、川芎、赤芍、柴胡等11种中药材并添加蜂蜜配制而成。蜂蜜的加入对复方成份起了絮凝和结团作用，使产品出现沉淀。作者采用平均孔径为0．45μm、2μm和5μm的微滤膜以及截留分子量为10000和30000道尔顿的超滤膜进行了终端膜分离试验。结果表明膜分离可以使产品得到澄清，分离除去杂质后的口服液产品经高效液相色谱分析，发现其芍药甙浓度提高了2～6％。在试验条件下，求取了膜分离过程的膜通量与污染速度数据，并推断可能的单程膜分离处理量，为放大试验或生产装置选择设计参数提供了参考。本文系攀登计划支持性课题——“膜组件污染与再生过程的实时监测与分析”的应用研究。     

心房颤动病人血栓形成与一氧化氮、血小板P-选择素表达关系研究

目的研究慢性心房颤动(房颤)病人血栓形成与血浆一氧化氮(NO)水平、血小板活化的关系.方法应用流式细胞仪分析窦性心律及房颤病人血小板P-选择素、糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)表达,同时测定血浆NO、血栓素B2(TXB2)、6-keto-前列腺素F1α(6-keto-PGF1a)含量,计算TXB2/6-keto-PGF1a.应用N-硝基-L-精氨酸甲基酯(N-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)抑制一氧化氮合酶(NOS),流式细胞仪分析其对血小板P-选择素表达的影响及L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)预处理后L-NAME对血小板P-选择素表达的影响.结果房颤组血浆NO水平明显低于窦性心律组[(22.68±9.38)μmol/L对(31.25±14.91)μmol/L,P＜0.05];血小板P-选择素表达明显高于窦性心律组[(6.76±3.36)%对(4.86±2.09)%,P＜0.05];血小板GPⅡb/Ⅲa表达明显增高P＜0.05;血浆TXB2及TXB2/6-keto-PGF1a含量均显著增高(P＜0.001).房颤血栓形成组与房颤无血栓组血小板P-选择素表达差异无显著性[(7.77±2.90)%对(6.53±3.17)%,P＞0.05].应用L-NAME抑制NOS后,血小板P-选择素表达增加,L-Arg预处理可明显阻断这一效应.结论房颤引起的不规则心律能抑制NO合成,使血浆NO水平降低,这可能是房颤病人血小板P-选择素表达增加,血栓形成的原因之一.NO及NO前体可能预防房颤病人的血栓形成.     

周期性张应力对成纤维细胞增殖能力的影响

目的探讨周期性张应力对体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞增殖特性的影响。方法将体外培养的L929细胞分为加力组与对照组,加载周期性张应力的细胞为加力组,不加力的为对照组。应用细胞应力加载系统对L929细胞加载8%形变率、0.1 Hz的周期性张应力,分别在加力1 h、2 h、4 h和8 h后应用流式细胞仪分析细胞周期;四甲基偶氮唑盐比色法分析细胞的增殖活性。结果加力组加力1 h(q=5.532,P<0.01)与2 h(q=6.569,P<0.01),S期细胞比率(S-phase fraction,SPF)较对照组出现了下降,并伴有细胞数量的增加(P>0.05);加力组在加力4 h后,SPF较对照组下降(P>0.05),细胞数量增加(P>0.05);加力组在加力8 h后,SPF较对照组开始出现增高(q=4.287,P<0.05),细胞数量显著增加(q=5.202,P<0.01)。结论 8%形变率、0.1 Hz的周期性张应力引起细胞增殖活性的变化,表现为随应力加载时间的延长,细胞的增殖活性出现先被抑制、后被促进的改变。     

周期性张应力诱导成纤维细胞凋亡中p38MAPK信号通路的作用

背景:当牙齿受异常咬合力时会导致牙体吸收、牙周组织的大量破坏.目的:研究牙周膜成纤维细胞在受到周期性张应力刺激后是否发生凋亡及p38MAPK信号通路是否参与该凋亡过程.方法:取4～7代成纤维细胞,同步化后随机分为对照组、加力组和SB203580组.加力组和SB203580组细胞加载力值为12%表面应变率,加力频率为6个循环/min,即5 s拉伸,5 s松弛.SB203580组细胞在加力前1 h加入终浓度为20 mmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580.分别在加力6,12,24 h,取各组细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测细胞凋亡基因bax mRNA的表达.结果与结论:与对照组比较,加力后成纤维细胞凋亡率及bax mRNA表达增加(P < 0.05),且随着加力时间的延长而增强,12 h达高峰,之后逐渐下降.与加力组比较,SB203580组对应时间点细胞凋亡减少(P < 0.05),bax mRNA表达降低.说明细胞受到力学刺激会发生凋亡,而丝裂原活化蛋白激酶p38MAPK信号通路参与了该凋亡过程.     

p38MAPK信号通路与应力介导成肌细胞的凋亡

背景：在体内条件下,细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果。目的：在成功构建成肌细胞体外培养-力学刺激模型的基础上,研究p38MAPK信号通路在成肌细胞凋亡中的作用及其机制。方法：将体外培养的C2C12细胞分为对照组和SB203580组,SB203580组中加入20mmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580。应用细胞应力加载装置FlecellStrainUnit-5000T给细胞提供15%的力值,分别施加0,6,12,24h的周期性张应力。每分钟10个循环,每循环包括3s牵张,3s松弛。Hoechst33258染色观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测促凋亡基因baxmRNA的表达;Westernblot检测信号通路中p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达。结果与结论：随着加力时间的延长,细胞逐渐出现核固缩及凋亡小体,凋亡率增加（P〈0.05）,baxmRNA表达增多（P〈0.05）;细胞p38MAPK和p-p38MAPK蛋白均在加力6h达到最低,此后逐渐升高。p38MAPK抑制剂SB203580可抑制加力引起的细胞凋亡,减少baxmRNA及p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达（P〈0.05）。说明p38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中起到重要的作用。     

声波牙刷刷牙时间与儿童牙菌斑控制的关系

目的观察声波牙刷刷牙不同时间儿童牙菌斑控制的效果,为临床口腔卫生指导及儿童牙病预防提供理论依据。方法选择年龄4～5岁的儿童32例,在刷牙前进行菌斑染色,采用声波牙刷刷牙0．5、1．0、2．0及3．0min,分别记录菌斑牙面数及菌斑指数,计算菌斑百分率。结果应用声波牙刷刷牙2．0min,菌斑百分率（14．81％）可达基本控制范围内。刷牙0．5、1．0及2．0min时菌斑百分率及菌斑指数与刷牙前比较差异均有统计学意义（x2=91．84～730．80,F=76．692,P〈0．05）;刷牙3．0min与刷牙2．0min相比,菌斑百分率及菌斑指数差异无统计学意义（P〉O．05）。结论声波牙刷对儿童牙菌斑控制有良效;建议儿童在专业口腔卫生指导下用声波牙刷刷牙每次2．0min。     

糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤变化及Cyt C和Caspase-3的表达

目的探索高血糖状态下，急性心肌缺血诱导心肌细胞凋亡的程度变化及其可能机制。方法TUNEL法检测糖尿病大鼠IRI心肌细胞凋亡的程度，应用免疫组化染色技术检测大鼠心肌细胞色素C（Cyt C）和Caspase-3的表达。结果随心肌缺血再灌注时间的延长，糖尿病（DM）组AI呈逐渐上升的趋势，非糖尿病（NDM）组AI呈先上升再下降的趋势；缺血30min后再灌，6h内DM组大鼠Cyt C和Caspase-3的阳性表达率或阳性强度均明显低于NDM组；24h时DM组大鼠Cyt C和Caspase-3的阳性表达率或阳性强度均明显高于NDM组；Cyt C和Caspase-3的表达与AI值呈正相关。结论DM组大鼠心肌IR后24h内，心肌细胞Cyt C和Caspase-3阳性表达增加发生延迟，持续时间长；相同时相，糖尿病大鼠心肌IRI细胞凋亡较非糖尿病大鼠减轻的可能机制为细胞色素C释放和Caspases激活的生物化学途经发生耐受。     

安神补脑液对小鼠学习记忆能力及脑内蛋白质合成的影响

目的观察安神补脑液对小鼠学习记忆能力及脑内蛋白质合成的影响。方法用Y-型水迷宫法、跳台法测定小鼠的学习记忆能力,Lowry法测定小鼠脑内蛋白质,二苯胺试剂显色法测定DNA,Oricinol试剂显色法测定RNA的含量。结果安神补脑液对正常小鼠的记忆能力有增强作用,对乙醇致小鼠记忆再现障碍有改善作用,并能显著增加小鼠脑内蛋白质、DNA的含量。结论安神补脑液能提高正常及记忆再现障碍小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与其促进脑内蛋白质合成有关。     

高效液相色谱法测定安神补脑液中2,3,5,4''-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定安神补脑液中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量的方法.方法:高效液相色谱法(HPLC),Diamonsil C18色谱柱,流动相为乙腈-水(20:80),检测波长为320nm.结果:2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.436～2.180 μg范围内呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.93%,RSD=1.07%.结论:本法简便、准确、重现性好,可用于安神补脑液的质量控制.