单核单层检测的研究与应用

目的 探讨单核单层检测(MMA)方法 预判新生儿溶血病发生的可行性.方法 对30例ABO系统产前检查标本进行MMA法实验,以及追踪新生儿溶血病(HDN)的发生.并对结果 进行分析.结果 30例ABO系统产前标本MMA法实验阳性19例,产后17例发生新生儿溶血病,2例未发生新生儿溶血病;阴性11例,2例发生新生儿溶血病,9例未发生新生儿溶血病.该方法 灵敏度为89.4%,特异性为81.8%.阴性预示值为84.6%,阳性预示值为90.4%,总有效率为86.7%.结论 单核单层检测(MMA)方法 可用于预判新生儿溶血病的发生.     

献血人群Mur血型的筛查研究

目的对广州番禺地区的献血人群开展Mur抗原与抗-Mur抗体的筛查,了解该血型的分布频率和特征。方法采用96孔微量板法使用单克隆抗-Mur试剂对献血者样本进行Mur抗原检测;使用已知Mur抗原阳性试剂红细胞对献血者血浆样本进行抗-mur抗体筛查,并对筛查阳性的标本进行抗体特异性鉴定。结果在3 000份无偿献血者标本中,检出Mur抗原阳性215例,发生率约为7.17%;在15 000份献血者标本中筛选并鉴定出抗-Mur 30例,发生率为0.20%。结论本地区献血人群中存在相对较高的Mur抗原分布频率以及抗-Mur发生频率,有必要在配制不规则抗体筛选试剂细胞时增加含有Mur抗原的红细胞,防止抗-Mur抗体漏检,进一步降低临床血浆输注不良反应的风险。     

s、Fy~a、OK~a阴性稀有血型的多重PCR筛选技术应用

目的采用多重PCR筛选技术(PCR-ssp反应体系)同时扩增s、Fya、OKa阴性稀有血型。方法根据s、Fya、OKa血型基因核心序列设计相应引物,采用序列特异引物引导的PCR反应(PCR-SSP)体系对模版DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据扩增出目标片段图谱判断该稀有血型基因的存在与否,以此判断是否阴性稀有血型。结果随机抽取本站2010年6～8月参加献血的650名献血者进行筛选鉴定,未发现s、Fya、OKa阴性的稀有血型。结论该方法能在一个反应体系内同时扩增3个稀有血型,具有准确、高效的优点,可以用来进行献血人群s、Fya、OKa阴性稀有血型的筛选与建库工作。     

不同保存条件对ELISA检测结果影响的观察

严格的血液检测是保证输血安全的重要手段．在日常的检测工作中常会遇到阳性或可疑标本、质控品、试剂开封后放置不同温度和时间时出现测定值明显差异现象．严重影响血液标本检测结果的正确性．导致室内质控图曲线的失控．为此．笔者对ELISA法试剂和质控品开封后分别在不同保存条件下和不同保存时间对检测结果的影响进行观察．报道如下。     

温度与时间对HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体的影响

严格的血液检测是保证输血安全的重要手段，日常的检测工作中常会遇到阳性或可疑标本、质控品放置不同温度和时间时出现测定值明显差异现象，严重影响血液标本检测结果的正确性，导致室内质控图曲线的失控。为此，笔者对12份阳性标本、4份质控品分别在室温、2～6℃冰箱及-20℃冰箱中贮存，在不同时间用ELISA法分别进行HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体检测，结果如下。     

番禺地区RhD阴性献血者部分D频率调查发简

目的 分析番禺地区RhD阴性献血者部分D（partial D）基因分型特征.方法 采用微量板法对献血者进行RhD阴性筛查;采用抗人球蛋白法对初筛RhD阴性的样本进行确认;采用PCR-SSP法（RH基因变异体分型检测试剂盒）对献血者基因组DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据电泳图谱判断部分D基因分型.结果 初筛检出60例RhD阴性,经抗人球蛋白法确认59例为RhD阴性,阴性频率约为0.23％.59例RhD血清学筛选阴性的基因分型检测发现2例部分D,血清学筛选RhD阴性中出现部分D的频率约为3.4％.结论 本地区血清学RhD阴性献血者中,存在RHD-CE （5）-D、RHD-CE（6-9）-D等位基因型,采用PCR-SSP法对RhD阴性表型献血者进行基因分型,可以准确鉴定RHD基因型.     

多重PCR技术筛选Co^a、Lu^b、Yt^a、Kp^b阴性稀有血型方法的建立

目的采用多重PCR筛选技术建立一个PCR反应体系,同时扩增Co^a、Lu^b、Yt^a、Kp^b阴性稀有血型,并应用于无偿献血人群稀有血型的筛选与建库。方法根据Co^a、Lu^b、Yt^a、Kp^b血型基因核心序列设计相应引物,采用多重PCR体系对献血者模版DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据是否扩增出对应片段图谱判断该稀有血型基因的存在。结果随机抽取500名献血者进行筛选鉴定,没有发现Co^a、Lu^b、Yt^a、Kp^b阴性的稀有血型。结论该方法能在一个反应体系内同时扩增4个稀有血型,具有准确、高效的优点,可在无偿献血人群稀有血型的筛选与建库工作中应用。     

采用多重PCR技术筛选k、Js~b及Di~b阴性稀有血型

目的利用多重PCR筛选技术,建立一个PCR-ssp反应体系同时扩增k、Jsb、Dib阴性稀有血型。方法根据k、Jsb、Dib血型基因核心序列设计相应引物,采用序列特异引物引导的PCR反应(PCR-SSP)体系对献血者模板DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据是否扩增出目标片段图谱判断该稀有血型基因的存在。结果随机抽取参加献血的600例进行筛选鉴定,没有发现k、Jsb、Dib阴性的稀有血型。结论该方法能在一个反应体系内同时扩增3个稀有血型,具有准确、高效的优点,可应用于献血人群k、Jsb、Dib阴性稀有血型的筛选与建库工作。     

番禺地区RhD阴性献血者Del表型的基因分型研究

目的 研究分析番禺地区RhD阴性献血者Del表型的基因分型特征.方法 采用120孔微量板法对参加无偿献血的样本进行RhD阴性筛查;采用抗人球蛋白法进行确认,采用吸收放散实验进行Del表型筛选;采用RH基因变异体基因分型检测试剂盒(PCR-SSP法)对确认阴性样本进行RH DEL基因分型.结果 在26 172例献血者中筛选出60例RhD阴性,经确认59例为RhD阴性,阴性频率为0.23％;吸收放散实验检出10例Del表型;基因分型检测出10例RHD 1227A DEL基因型.结论 番禺地区RH DEL发生频率约为16.9％(10/59),以RHD 1227A DEL为主.吸收放散实验联合PCR-SSP法检测,能进一步提高RH DEL鉴定的准确性.     

番禺地区Mur抗原与抗-Mur频率调查

在MNS血型系统众多的变异型及卫星抗原中,Mur抗原及抗-Mur与输血密切相关,而国内也有抗-Mur引起输血反应的相关报道[1].我们对本地区献血人群中Mur抗原与抗-Mur的频率进行了调查,报道如下.