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目的 应用逆向斑点杂交技术检测乙型肝炎病毒(HBV)基因型及YMDD变异。方法 合成有生物素标记的引物,PCR扩增两种DNA片段,与尼龙膜上的探针同时杂交,BCIP/NBT显色。结果 检测21例拉米夫啶治疗中的慢性乙型肝炎患者,11例HBV为基因型B,10例为基因型C;YMDD基序有47.6%(10/21)为YMDD,28.6%(6/21)为YVDD,23.8%(5/21)为YIDD。结论 在同一张尼龙膜上检测HBV基因型及YMDD变异,经济实惠、准确快捷,且易于开展。 相似文献
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目的:用PCA(Protein fragmem complementation assay,PCA,蛋白片段互补方法)选择HBV(Hepatitis Bvirus)多聚酶TP(Terminal protein,TP,末端蛋白)区VH(Variable fragments of heavy chain,VH,重链可变区)抗体。方法:用HepG2.2.15细胞分泌的HBV的多聚酶TP区作为抗原,用PCA方法进行VH抗体选择。抗原与抗体基因分别与二氢叶酸还原酶(DHFR)的两部分相连。特异性抗原、抗体相互识别,分别与他们相连的酶基因就会接触而恢复完整的DHFR酶活性,细菌得以存活。结果:对HBV DNA多聚酶TP区进行抗体选择,用PCA方法从抗体库中选择出3个对应抗体。3个TP区抗原特异性抗体有不同的氨基酸序列。结论:对HBV DNA多聚酶TP区进行抗体选择,用PCA方法可以从抗体库中较为简便的选择出对应抗体。PCA可以作为一个从抗体库中选择特异性抗体的强有力方法。 相似文献
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目的了解慢性乙型肝炎(简称乙肝)患者阿德福韦酯治疗过程中血清HBsAg水平变化,并探讨其与HBVDNA水平的相关性及临床意义。方法对阿德福韦酯治疗5年的20例HBeAg阳性慢性乙肝患者进行HBV基因型检测,并于服药0、8、12、24、52、104、156、208、260周时进行HBVDNA、HBsAg定量检测。结果阿德福韦酯治疗5年对总体HBsAg水平影响不大(P=0.658)。0周HBsAg水平与HBVDNA水平呈负相关(r=-0.603,P=2.13×10-4);其余各时间点中,仅52周时可见二者呈负相关(r=-0.434,P=0.008);12例HBV基因B型患者仅在0周时呈负相关(r=-0.657,P=0.003),8例C基因型患者0、52周时呈负相关(r=-0.643,P=0.026;r=-0.857,P=0.003);考虑ALT水平时,二者负相关则仅表现在ALT<2×ULN者(r=-0.648,P=0.016)。结论阿德福韦酯治疗5年对HBsAg总体水平无影响;HBsAg水平和HBVDNA水平的负相关性仅存在于未予抗病毒治疗且ALT低水平者;抗病毒治疗过程中评价二者相关性的意义不大。 相似文献
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醋氨酚对犬的多器官损伤及原因分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的了解醋氨酚对犬的多器官毒性作用及原因.方法选用普通杂种犬,静脉注射醋氨酚,首次剂量100mg/kg,之后每隔1h50mg/kg,持续11h,做血液生理生化和心、肺、肝、肾等组织病理学检测.分为:对照组、空腹12 h组和空腹24h组.结果首次注药后24 h左右空腹24h组全部死亡,72 h左右空腹12 h组有2条死亡.血液生理生化白细胞、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AsT)、乳酸脱氢酶、总胆红素、尿素氮、肌酐升高,AST/ALT>1,红细胞下降.组织病理心、肺、肝、肾、胃、脾均有淤血,左右心室皆见心肌断裂和间质组织水肿.结论醋氨酚对犬可造成多器官损伤,直接原因为氧自由基导致的全心衰竭. 相似文献
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摘要:目的 构建和评估结肠癌预后模型,探索肿瘤免疫微环境的特征,并分析其在结肠癌的免疫治疗中的作用。方法 从 癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中下载结肠癌及其正常组织数据作为训练数据集,从基因表达综合数据库 (Gene Expression Ominibus,GEO)中下载结肠癌及其正常组织数据作为验证数据集,从免疫学数据库和分析平台(Immunology Database and Analysis Portal,Immport)中下载免疫相关基因列表。基于以上数据集,利用生物信息学的方法构建并验证预后 风险模型。另外,基于预后风险模型进行肿瘤样本分组,探讨高风险评分组和低风险评分组的肿瘤浸润水平差异、肿瘤突变 负荷(tumor mutation burden,TMB)和免疫检查点抑制剂相关靶点的表达水平差异。结果 构建的预后模型 ROC 曲线下面积 (AUCROC )在3 年时为0.668,4 年时为0.699,5 年时为0.696。此外,低风险评分与良好的预后显著相关(P<0.000 1),而高风险 评分与较高的肿瘤分期显著相关(P<0.05),并在验证数据集中得到进一步验证。同时,构建的列线图模型的 C index 从0.63 增加至 0.75。基于建立的预后风险模型,高风险组的免疫治疗相关靶基因的表达水平显著升高(P<0.05),有 6 种免疫细胞的 浸润程度在高风险组和低风险组中的差异有统计学意义(P<0.05)。同时,较高的 TMB 与较差的预后显著相关(P<0.05)。结 论 构建的结肠癌预后模型在评估结肠癌患者复发风险分层、肿瘤分期等方面具有潜在的临床意义,有助于结肠癌的肿瘤免 疫微环境的探索及结肠癌患者的免疫治疗。 相似文献
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一些短片段的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异地阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNAi)。小分子干扰RNA(siRNA)就是这种短片段双链RNA分子,能够以序列同源互补的mRNA为靶目标,降解特定的mRNA。本研究针对HBV DNA多聚酶区的siRNA,运用PCR扩增siRNA表达框的方法筛选出对HBV DNA抑制作用最强的siRNA,观察其对HBV DNA复制及HBsAg和HBeAg分泌的抑制作用。 相似文献
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