富血小板纤维蛋白对牙髓干细胞体外增殖与分化特性的影响

目的:探讨不同浓度富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)对犬牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)体外增殖及成牙本质/成骨分化能力的影响.方法:酶消法分离培养犬DPSCs,经流式细胞术和多向分化鉴定后分别在含自体PRF体积比为1/8、2/8、3/8的3种浓度的培养基中进行培养;采用MTT法检测1、2、3、4、5、6、7d各时间点的细胞增殖活性;实时定量PCR检测培养7、14、21 d时ALP、DSPP、DMPl mRNA的表达水平.结果:成功分离并获得克隆化培养的犬DPSCs,DPSCs具有成骨和成脂分化能力;3种浓度PRF均能促进DPSCs的增殖,1周内促增殖作用有时间依赖性而无PRF浓度依赖性;不同浓度PRF可通过上调成牙本质/成骨早期标志基因ALP、DSPP mRNA及晚期标志基因DMP1mRNA的表达来促进犬DPSCs成牙本质/成骨向分化,该效应既具时间依赖性又具有PRF浓度依赖性.结论:自体PRF可以不同方式同时促进犬DPSCs的增殖及分化.     

牙外伤的诊断及规范化应急处理

牙外伤是口腔急诊常见疾病。目前,国内在牙外伤诊治方面存在理念陈旧、临床处置不规范等问题。本文结合最新国际牙外伤协会指南,对牙外伤概念、临床特征、分类、规范化治疗理念以及各类型牙外伤应急处理原则进行系统阐述,以期规范我国牙外伤治疗,提高国内牙外伤诊治水平。     

自体富血小板纤维蛋白用于延迟牙再植1例

富血小板纤维蛋白(PRF)是一种立体三维网状结构的第二代血小板浓缩物,它能够调节炎症,促进组织愈合。并且能够缓慢持续释放多种生长因子。大量文献报道PRF可以促进口腔软硬组织的愈合,但尚未将其应用于临床牙再植的治疗中。本文联合自体PRF颗粒对1例撕脱2 h且干燥保存的离体牙进行延迟再植、复位固定及后续牙髓治疗。随访1年,脱位牙恢复良好,达到牙周膜性愈合,没有出现牙根吸收,且牙槽骨高度得到恢复。     

心理应激对大鼠实验性口腔溃疡愈合的影响及其干预的研究

目的探讨心理应激对大鼠实验性口腔溃疡模型黏膜组织愈合的影响及其干预的研究。方法雄性SD大鼠80只,正常对照组(Control)随机选取5只。其余75只随机分为口腔溃疡组(U)、口腔溃疡+心理应激组(U+S)、口腔溃疡+心理应激+药物组(U+S+M),每组各25只,每组再按照实验时间点分为0、24、48、72和120 h五个亚组。应激组以及药物组大鼠每日给予6 h束缚应激,连续应激1周。1周后,溃疡组、应激组以及药物组大鼠使用尖端直径为4 mm的单电电极灼烧大鼠舌体部建立实验性口腔溃疡模型,模型建立成功后按照时间点要求继续给予应激,同时药物组每日按1 mg/kg皮下注射地西泮。实验期间进行大鼠体质量测量、行为学检测、血清学检测,采用组织学和免疫组织化学方法分别观察口腔溃疡的组织病理学改变和热休克蛋白70(Hsp70)的表达情况。结果心理应激后大鼠表现出体质量增长减慢、行为异常、血清皮质酮及促肾上腺皮质激素浓度升高等一系列变化(P<0.05),心理应激影响下大鼠口腔溃疡的愈合进程减慢,炎细胞浸润高于对照组,血管及胶原再生均低于对照组以及Hsp70表达高于对照组、溃疡组(P<0.05)。结论心理应激能够延缓口腔溃疡黏膜组织的愈合进程,抗应激药物则可有效对抗心理应激在口腔溃疡愈合中的负性效应。     

NF-κB在压力调控BMSCs/PRF修复兔髁突软骨缺损中的作用研究

目的:探讨NF-κB信号通路在压力调控BMSCs/PRF双膜结构修复兔髁突软骨缺损中的作用。方法:取3~4月龄雄性新西兰兔30只,分离、培养骨髓间充质干细胞并制备成细胞膜片,抽取自体兔动脉血制备PRF,将二者复合制备BMSCs/PRF双膜结构。在所有实验动物双侧髁突作直径3 mm的缺损,制备髁突软骨缺损模型;将实验动物随机分为5组(n=6),A组:即空白对照组,缺损处不充填;B组:双膜结构充填缺损;C组:压力预调双膜结构后充填缺损;D组:NF-κB抑制剂(PDTC)预处理双膜结构后充填缺损;E组:压力预调加抑制剂预处理双膜结构充填缺损。分别于术后2、4、8周取材,HE染色观察缺损修复情况,Real-time PCR方法检测I-κB、P-65和成软骨相关基因Aggrecan、Sox-9的表达水平,并进行统计分析。结果:C组新生髁突软骨组织中NF-κB各信号分子及成软骨相关基因的表达水平均明显高于相同时间取材的其他各组(P<0.05),其缺损修复的效果也最好;D组、E组各时间点的NF-κB信号通路相关信号分子及成软骨相关基因表达水平均明显低于A、B、C组(P<0.05)。结论:BMSCs/PRF双膜结构能明显促进髁突软骨缺损的修复,以压力预调的双膜结构修复效果尤为显著;NF-κB参与了体内压力促双膜结构合成软骨的过程。     

三种排龈方法对龈沟液含量及成分的影响

目的：通过对3种临床常用排龈方法排龈后龈沟液及其成分的研究,筛选对牙周组织损伤最小的排龈方法,为临床工作提供实验依据。方法：对10名受试者随机化分组,每名受试者口内3个第二前磨牙分别采用Ultrapak不含药排龈线、Ultrapak盐酸肾上腺素排龈线、Expasyl排龈膏进行排龈,于排龈前、排龈后30min、1d、3d、7d、14d、28d提取受试牙位龈沟液,称重并检测其中天冬氨酸转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）活性水平。结果：以时间作为整体因素考虑,3种排龈方法没有统计学差异。龈沟液量的变化：不含药排龈线在排龈后1d、3d龈沟液的量明显高于排龈前,含药排龈线在排龈后30min、1d、3d、7d明显高于排龈前,两组差异均有统计学意义（P〈0.05）;排龈膏在排龈后1d、3d、7d龈沟液的量明显高于排龈前,差异具有统计学意义（P〈0.01）。AST含量变化：不含药排龈线和含药排龈线组在排龈后1d、3d、7d明显高于排龈前,差异具有统计学意义（P〈0.05）,排龈膏组仅在3d时与排龈前有统计学差异（P〈0.05）。ALP含量的变化：含药排龈线仅在排龈后3d时与排龈前有统计学差异（P〈0.05）,而不含药排龈线和排龈膏在各个时相均与排龈前无统计学差异。结论：三种排龈方法对牙周组织都存在一定损伤,排龈线对牙周组织造成的急性损伤最重但恢复较快,排龈膏损伤较小但恢复也较慢。     

恒牙撕脱性损伤临床特征的回顾性分析

目的:分析恒牙撕脱性损伤的分布特征。方法:对131名患者共179个撕脱性损伤患牙进行临床特征回顾性研究,包括年龄、性别、病因、牙保存方法、牙离体时间及是否伴有软硬组织伤等,并对观察半年以上且伴有牙槽骨骨折的撕脱性患牙愈后进行统计分析。结果:主要病因为摔伤(59%),好发于上颌中切牙(78%)。仅3%的人能够在30 min内就医;45%伴发软组织损伤;34%伴发牙槽骨骨折,其中10%牙槽骨骨折在初诊中被漏诊;撕脱性损伤伴牙槽骨骨折牙根吸收率略高于无牙槽骨骨折(P>0.05)。结论:多数患者由于就诊延误再植牙属于延迟再植;牙撕脱性损伤多伴发软硬组织的损伤,但撕脱性损伤患牙是否伴有牙槽骨损伤与其远期根吸收无明显关联。     

我国口腔急诊医学现状与发展

口腔急诊医学在我国尚未成为独立的二级学科,其定义、涵盖的病种、学科定位等目前都无统一界定。本文从分析我国口腔急诊现状入手,以符合我国医疗卫生体制为前提,尝试对“口腔急诊”学科内涵进行定义,并提出了我国口腔急诊医学发展的方向和具体措施。     

周期性动态压力对人牙周膜干细胞中力生长因子表达的影响

目的:探讨周期性动态压力对人牙周膜干细胞(h PDLSCs)膜片中力生长因子(MGF)表达的影响。方法:取第3代h PDLSCs及其膜片,并按照不同压力将其随机分为0(对照)、0~90、0~120、0~150 KPa组后,置于细胞压力加载室内以0.1 Hz频率连续加载1 h。分别于加压后0、12、24、36 h各时间点,用CCK-8法检测各组细胞的增殖;RT-PCR法检测各组h PDLSCs膜片中MGF、ALP、Col-ⅠmRNA的表达。结果:0~120 KPa组可显著促进h PDLSCs增殖(P<0.05),其次为0~150 KPa组;各周期性动态压力作用于h PDLSCs膜片后12 h均能明显上调其MGF mRNA表达水平(P<0.05),受力后24 h达到峰值;36 h后表达水平下降,除0~120 KPa组仍明显高于对照组(P<0.05)外,其他两组均回到对照组水平。其中以0~120 KPa组的MGF mRNA表达水平最高(P<0.05),且在该压力条件下还能明显促进h PDLSCs膜片中Col-Ⅰ、ALP mRNA的表达(P<0.05)。结论:0~120 Kpa/1 h周期性动态压力能促进h PDLSCs膜片中MGF mRNA的表达,促进该细胞的增殖与分化潜能。