多孔β-0TCP/BMP复合人工骨引导牙周组织再生的实验研究

目的　将骨形成蛋白 (bonemorphogeneticprotein ,BMP)和多孔 β磷酸三钙 (β tricalciumphosphate ,β TCP)复合人工骨联合应用于引导组织再生 (guidedtissueregeneration ,GTR)技术中 ,评价其对Ⅱ度根分叉病变牙周组织再生修复的影响和意义。方法　用健康成年杂种狗 4只 ,制备下颌后牙区人工骨缺损。实验牙位随机分为 3组 :①骨形成蛋白 /引导组织再生 (BMP/GTR)组 :缺损处植入引导膜材料和复合人工骨 ;②GTR组 :单纯放置引导膜材料 ;③以常规翻瓣术为对照组。术后 12周取材做组织学观察和评价。结果　两实验组均有明显新附着形成 ,其中BMP/GTR组有大量新生牙槽骨、牙骨质、牙周韧带生长。对照组新生组织量很少。结论　β TCP/BMP是一种具有较强骨诱导能力 ,生物相容性较好的复合人工骨 ,在引导牙周组织再生术中有良好的应用前景     

早发性牙周炎的遗传学研究

早发性牙周炎(ECP)的家族聚集性早已引起人们的注意。越来越多的研究表明了其有明显的遗传倾向,近年来,国外对EOP进行了大量的遗传学研究和相关基因染色体定位工作,本文就该领域的最新进展作一综述。     

早发性牙周炎的遗传学研究

早发性牙周炎（EOP）的家族聚集性早已引起人们的注意,越来越多的研究表明了其有明显的遗传倾向,近年来,国外对EOP进行了大量的遗传学研究和相关基因染色体定位工作,本文就该领域的最新进展作一综述。     

LPS刺激牙龈成纤维细胞IL-6、IL-8的产生和膜表面受体CD14的表达

目的：观察牙龈卟啉菌和中间普氏菌LPS刺激人牙龈成纤维细胞合成IL-6、IL-8的能力，并了解LPS是否通过细胞表面膜受体mCD14介导信号传导。方法：4种浓度的LPS在不同时间段。分别作用于体外培养的人牙龈成纤维细胞。采用ELISA检测IL-6、IL-8含量的变化，同时利用逆转录聚合酶链反应，进一步观察IL-6、IL-8，CD14在mRNA水平的表达特征。结果：ELISA和RT-PCR的反应结果证实，受LPS的刺激，细胞合成和分泌细胞因子IL-6、IL-8的能力明显增强，但未检测到细胞表面膜受体mCD14mRNA的表达。结论：LPS用于牙龈成纤维细胞合成和分泌细胞因子没有通过膜受体mCD14的介导。     

牙龈卟啉菌及其胶原酶基因遗传多样性的研究

目的 分析牙龈卟啉单胞菌细菌基因型及其重要毒力因子胶原酶基因PrtC的遗传异质性，了解细菌遗传变异与其致病性的相关性。方法 对从不同牙周炎患者口腔中分离出的牙龈卟啉菌进行DNA指纹分析，参考菌株为PgATCC33277。通过PCR反应，检测临床菌株中是否存在特异性的胶原酶基因片段（548bp）。并通过酶切鉴定和DNA序列分析，了解PrtC基因遗传多样性的变化。结果 80株牙龈卟啉菌共获得7种基因型（Ⅰ-Ⅶ）。所有24株临床菌株和参考菌株PgATCC3327中均扩增出特异性的胶原酶基因片段。对照菌株中没有得到相应的产物。4株细菌的序列分析结果与国外的报道相比较，发现一些基因序列存在差异，出现6个核苷酸碱基缺失。结论 临床分离的牙龄卟啉菌中可检测到多种基因型，且具有个体差异，这些菌株具有合成胶原酶的能力，不同菌株胶原酶基因之间存在遗传异质性的变化。     

多孔β-TCP/BMP复合人工骨引导牙周组织再生的实验研究

目的 将骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)和多孔β磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)复合人工骨联合应用于引导组织再生(guided tissue regeneration,GTR)技术中,评价其对Ⅱ度根分叉病变牙周组织再生修复的影响和意义.方法 用健康成年杂种狗4只,制备下颌后牙区人工骨缺损.实验牙位随机分为3组:①骨形成蛋白/引导组织再生(BMP/GTR)组:缺损处植入引导膜材料和复合人工骨;②GTR组:单纯放置引导膜材料;③以常规翻瓣术为对照组.术后12周取材做组织学观察和评价.结果 两实验组均有明显新附着形成,其中BMP/GTR组有大量新生牙槽骨、牙骨质、牙周韧带生长.对照组新生组织量很少.结论 β-TCP/BMP是一种具有较强骨诱导能力,生物相容性较好的复合人工骨,在引导牙周组织再生术中有良好的应用前景.     

三种高分子支架对骨髓基质细胞生长影响的研究

研究高分子复合支架聚乳酸均聚物(PLA)、聚乳酸/聚乙二醇共聚物(PLA-PEG)和聚乳酸/聚乙醇酸共聚物(PLGA)对骨髓基质细胞(M SC)黏附、增殖和分化的影响。分离、纯化兔骨髓基质细胞,分别和3种支架材料共培养。在不同时间段,应用细胞计数,碱性磷酸酶(ALP)定量分析,四环素荧光染色,扫描电镜,RT-PCR的方法,观察细胞在3种材料上生长,黏附和矿化沉积情况。结果表明细胞在3种支架材料上生长良好,PLGA上细胞生长的数量最多,其次是PLA-PEG、PLA,呈时间依赖性增加。3种材料上的细胞均表达ALP活性,PLA-PEG和PLGA组的ALP活性无差异,但显著高于PLA组,差异有显著性。RT-PCR反应可检测到骨钙素和纤维I型胶原在mRNA水平的表达。扫描电镜见细胞最初呈球形附着于材料上,7 d后细胞数量增加并分泌细胞外基质。两周后可见钙化结节形成,四环素荧光呈黄绿色染色。结果提示M SC细胞能较好的黏附于3种聚合物支架上,生长良好,并表达一定的成骨潜能,但PLA共聚物PLA-PEG和PLGA优于PLA均聚物,有望成为较好的构建组织工程骨的支架。     

LPS刺激牙龈成纤维细胞PGE_2的产生及COX-2基因表达

目的:本实验观察两种重要的牙周致病菌（牙龈卟啉菌、中间普氏菌）细胞表面脂多糖（LPS）刺激人牙龈成纤维细胞后PGE2水平的变化,及PGE2产生过程中COX-1和COX-2的表达。方法:采用热酚-水法抽提牙龈卟啉菌ATCC33277和中间普氏菌ATCC25611细胞表面脂多糖,刺激体外培养的人牙龈成纤维细胞,通过放射性免疫技术检测上清液中PGE2的含量。同时利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组织化学的方法,进一步观察牙龈成纤维细胞内COX-1、COX-2 mRNA和COX-2蛋白水平的表达。结果:在LPS的作用下,PGE2水平明显升高,含量以剂量依赖和时间依赖的方式递增（＊P<0.01,＊＊P<0.01）。对COX-1和COX-2 mRNA和免疫组化的研究表明,未受刺激的牙龈成纤维细胞COX-2 mRNA和蛋白水平表达阴性,受LPS作用后呈阳性表达。COX-1mRNA在正常和受刺激的牙龈成纤维细胞中均呈阳性表达,且表达不受LPS作用的影响。结论:牙龈卟啉菌和中间普氏菌LPS能够刺激牙龈成纤维细胞分泌PGE2,PGE2水平主要受COX-2 mRNA转录水平的影响,与COX-1的表达无明确相关性。     

血小板源性生长因子在牙周组织损伤修复中的作用

牙周组织具有再生修复的潜能,在此修复过程中多肽生长因子的作用日益引起人们的关注。多肽生长因子是一类能促进和调整损伤组织修复再生的重要生物介质。其中血小板源性生长因子与牙周组织多种类型细胞的生长、分化和代谢有关,在牙周组织损伤愈合过程中起重要作用。     

多孔β—TCP／BMP复事人工骨引导牙周组织再生的？…

目的 将骨形成蛋白（ＢＭＰ）和多孔β磷酸三钙（β－ＴＣＰ）复合人工骨联合应用于引导组织再生（ＧＴＲ）技术中,评价其对Ⅱ度根分叉病变牙周组织再生修复的影响和意义。方法 用健康成年杂种狗４只,制备下颌后牙区人工骨缺损。实验牙位随机分为３组：①骨形成蛋白／引导组织再生（ＢＭＰ／ＧＴＲ）组;缺损处植入引导膜材料和复合人工骨;②ＧＴＲ组;单位放置引导膜材料;③以常规翻瓣术为对照组。术后１２周取材做组织学观