低强度脉冲超声在正畸骨改建中的研究进展

低强度脉冲超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)是强度介于30～100 mW/cm2、频率低于3 MHz的脉冲式超声波,其广泛参与调控成骨细胞、牙周膜细胞及牙骨质细胞的增殖、分化等多项生理功能,最终发挥加快牙移动速度、保护牙根组织的效应.本文就近年来LIPUS对正畸中骨改建调控作用的研究进展进行综述,以进一步加深对LIPUS生物学功能的理解.     

低强度脉冲超声在正畸骨改建中的研究进展

低强度脉冲超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)是强度介于30～100 mW/cm2、频率低于3 MHz的脉冲式超声波,其广泛参与调控成骨细胞、牙周膜细胞及牙骨质细胞的增殖、分化等多项生理功能,最终发挥加快牙移动速度、保护牙根组织的效应.本文就近年来LIPUS对正畸中骨改建调控作用的研究进展进行综述,以进一步加深对LIPUS生物学功能的理解.     

改良迷你临床演练方法在口腔正畸科考核中的初步应用

目的探讨将Tweed分析法与迷你临床演练（Mini-CEX）相结合,建立适用于口腔正畸专科的临床考核方案的效果。 方法通过将Mini-CEX方法与正畸学Tweed分析表进行结合,并补充细化评分表,从而建立了一种新型口腔正畸学教学考核方法,称为改良Mini-CEX考核。于2019年9月,从上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔正畸科随机选取6名在培口腔专科培训医师作为考生,对考生进行改良Mini-CEX考核,由5名正畸专家对其表现进行打分。应用SPSS 21.0软件对打分结果进行统计,计算肯德尔和谐系数（W）并进行显著性检验。 结果不同考官在评价同一考生时,考官间的打分具有显著的一致性（W₁ = 0.742,P₁ = 0.001;W₂ = 0.666,P₂ = 0.003;W₃ = 0.720,P₃ = 0.001;W₄ = 0.628,P₄ = 0.004;W₅ = 0.555,P₅ = 0.011;W₆ = 0.330,P₆ = 0.1293）。在医疗面谈、体格检查、临床判断、卫生教育、组织效能和整体表现6项,打分具有显著的一致性（W₁ = 0.620,P₁ = 0.008;W₂ = 0.588,P₂ = 0.012;W₃ = 0.885,P₃<0.001;W₄ = 0.625,P₄ = 0.008;W₅ = 0.835,P₅ = 0.001;W₆ = 0.930,P₆<0.001）,仅人文关怀一项未通过一致性检验（W = 0.147,P = 0.598）。 结论改良Mini-CEX具有标准程序,建立明确的得分细节,可以考核全面、获得公正客观,在不同考官间具有良好一致性,适用于当前口腔正畸学的考核与评价。     

Nell-1基因修饰骨髓基质细胞复合β-磷酸三钙提升兔上颌窦底的实验研究

目的：评价Nel样I型分子（Nell-1）基因修饰骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,bMSCs）复合β-磷酸三钙提升兔上颌窦底的效果。方法：抽取兔骨髓进行bMSCs培养,体外采用腺病毒载体携带Nell-1基因（AdNell-1）及绿色荧光蛋白EGFP基因（AdEGFP）转染bMSCs,GFP表达检测转染效率、Nell-1免疫细胞化学检测目的基因的表达。碱性磷酸酶（ALP）染色、半定量检测及钙结节茜素红染色检测细胞成骨分化。将基因修饰bMSCs与β-磷酸三钙颗粒复合用于兔上颌窦底提升,分别在术后2周和8周取材,HE染色,测量成骨面积,并采用SPSS11.0软件包对2组间数据进行t检验。结果：AdEGFP基因修饰组GFP表达效率可达60%～80%,Nell-1细胞化学染色显示,AdNell-1基因修饰组呈阳性表达。AdNell-1基因修饰组ALP染色及钙结节茜素红染色均高于AdEGFP基因修饰组,ALP半定量检测具有统计学差异（P〈0.05）。体内实验研究中,AdNell-1基因修饰组新骨形成面积在8周时显著高于AdEGFP基因修饰组（P〈0.05）。结论：采用AdNell-1基因转染兔bMSCs可促进其成骨分化,体内可促进上颌窦底提升的效果。     

槲皮素对血管内皮细胞的作用及其机制研究

目的: 观察不同浓度槲皮素对人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）生物学特性的影响,探讨槲皮素抑制血管生成的机制。方法: 应用不同浓度槲皮素处理细胞,在不同时间点,采用CCK-8法检测槲皮素对HUVECs增殖能力的影响;采用细胞划痕实验、基质胶体外成管实验检测槲皮素对HUVECs迁移及形成管腔能力的影响;采用实时荧光定量PCR检测槲皮素对HUVECs中血管内皮细胞因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）mRNA表达的影响;采用Western免疫印迹法检测HUVECs中AKT信号通路相关蛋白表达的变化。采用 SPSS 17.0 软件包对数据进行单因素方差分析和Tukey post-hoc分析。结果: 槲皮素能抑制HUVECs的增殖;与对照组相比,槲皮素处理后,HUVECs细胞迁移及形成管腔结构的数量明显减少,抑制作用呈剂量依赖性。槲皮素能抑制HUVECs中VEGF、bFGF mRNA的表达,抑制HUVECs中AKT相关信号通路。结论: 槲皮素抑制HUVECs增殖及体外血管形成能力,其机制部分通过AKT相关信号通路介导。     

复合纳米羟基磷灰石材料在骨组织修复领域中的研究进展

由于人体骨组织中主要无机成分为纳米羟基磷灰石, 人工合成纳米羟基磷灰石成为骨组织修复领域中的研究热点。而为弥补纳米羟基磷灰石材料本身的多方面不足, 复合材料应运而生。本文就常见纳米羟基磷灰石复合材料及其在骨组织修复领域中的研究进展做简要综述。     

糖尿病兔骨髓间充质干细胞成骨分化能力探讨

目的 观察糖尿病兔骨髓间充质干细胞（bone arrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）以成骨分化为主的生物学特性。方法 通过静脉注射水合四氧嘧啶,建立糖尿病模型,以注射等量生理盐水作为对照组。在无菌条件下,局麻后抽取兔髂骨骨髓,获取BMSCs。采用全骨髓贴壁培养法对细胞进行纯化及培养,分别对2组细胞行MTT检测、实时定量PCR检测、碱性磷酸酶（ALP）活性检测,以及ERK、AKT信号通路表达检测。采用SPSS 13.0软件包对数据进行单因素方差分析（ANOVA）和SNK post hoc分析。结果 与正常组比较,实验组糖尿病兔BMSCs细胞增殖活性、成骨基因表达、ALP活性及成血管基因表达均显著下降（P<0.05）。结论 糖尿病兔BMSCs的增殖活性、成骨分化能力及成血管基因表达能力均受到损害。     

聚合物介导质粒DNA转运系统在骨组织工程中的应用

基因治疗技术应用于骨组织工程,可以进一步促进成骨。聚合物介导的质粒DNA转运系统通过保护DNA免受降解并维持DNA在效应浓度,延长其内吞的机会,从而提高基因转染效率。目前用于骨组织工程研究的聚合物介导的质粒DNA转运系统主要有质粒DNA与胶原蛋白复合转运系统、质粒DNA与聚乙二醇一透明质酸水凝胶复合转运系统、质粒DNA与脂质体复合转运系统、质粒DNA与阳离子聚合物复合转运系统等。本文对近年来聚合物介导的质粒DNA复合转运系统在骨组织工程中的应用进展做一综述。     

骨髓基质细胞中Von Hippel-Lindau基因的siRNA表达载体构建及其检测

目的:构建骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells BMSCs)中Von Hippel-Lindau(VHL)基因的siRNA表达载体并检测其对BMSCs细胞中VHL基因的干扰作用.方法:根据犬的VHL基因序列设计并合成4对siRNA oligo,然后用载体构建试剂盒进行重组克隆,将4对双链的siRNA oligo分别插人到siRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR中,构建4个siRNA表达质粒(SR144-1,SR144-2,SR144-3,SR144-4).用载体通用引物进行菌落PCR筛选,筛选得到的阳性克隆进行测序,以验证重组克隆中插入片段序列是否与设计的oligo序列一致.干扰载体瞬时转染BMSCs,通过qPCR和Westerm印迹分别检测干扰载体对目的基因的沉默效果.为了提高转染效率及VHL基因的沉默效果,对SR144-4进行慢病毒干扰载体(pLenti-mi-VHL)构建.结果:通过对构建质粒克隆进行测序,证实重组克隆中插入片段序列与设计的oligo序列一致.转染BMSCs细胞24h和48h后分别用qPCR与Western印迹检测,显示SR144-4干扰效果最理想.通过测序结果比对,插入序列完全正确.pLenti-mi-VHL构建成功.结论:成功构建了BMSCS的siRNA-VHL表达载体,为进一步实验研究奠定了基础.