位点特异性PCR鉴别桃仁中掺入苦杏仁的方法分析

目的 由于中药材传统真伪鉴别方法的局限性,本研究拟通过位点特异性聚合酶链式反应（PCR）建立一种能够快速鉴别桃仁中掺有苦杏仁的方法。方法 通过比对苦杏仁与桃仁的核糖体DNA内转录间隔区（ITS）基因序列,寻找单核苷酸多态性（SNP）位点并设计特异性鉴别引物。利用不同的苦杏仁和桃仁样品进行PCR扩增,对影响PCR反应体系的退火温度、引物浓度、循环数等条件进行优化,并对该方法的专属性和检出限进行了考察。另外,利用建立的PCR鉴别方法对不同来源和不同产地桃仁中掺有不同比例苦杏仁的样品进行检测,以验证该方法的稳定性和准确性。结果 建立了桃仁中掺混苦杏仁的特异性PCR鉴别方法,在退火温度63 ℃和引物循环数30个时仅有苦杏仁能扩增得到432 bp的特异性条带,桃仁样品则无此条带。该方法对苦杏仁的最低检出限为0.2 ng,其对桃仁中掺入苦杏仁的检出限为1%,可用于日常桃仁中掺混苦杏仁的检测。结论 建立的位点特异性PCR方法能够准确地检测桃仁中是否掺有苦杏仁,可为桃仁的质量控制提供实验依据,以保障其临床用药安全。     

腹股沟斜疝手术患者应用临床护理路径的护理效果分析

目的探讨腹股沟斜疝手术患者应用临床护理路径的临床效果。方法收集2013年1月～2014年4月来我院进行腹股沟斜疝手术的患者81例,根据护理方法分为研究组41例,对照组40例。比较住院时间、住院总费用、疾病知识掌握程度及护理满意度。结果与对照组比较,研究组住院时间较短,住院总费用较低,疾病知识掌握程度优良率、护理满意度较高（P〈0.05）。结论在腹股沟斜疝手术患者中实施临床护理路径护理效果显著,能使患者的住院时间缩短、住院总费用降低,疾病知识掌握程度优良率及护理满意度提高。     

基于ITS序列PCR-RFLP鉴别大蓟药材及饮片中掺伪飞廉、魁蓟的方法研究

[目的]利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）,建立快速鉴别大蓟混伪品飞廉和魁蓟的方法。[方法]通过比对ITS基因序列,分别筛选飞廉、魁蓟的限制性内切酶位点并设计鉴别引物。考察PCR反应的退火温度、循环数及不同酶的适用性,对酶切反应时间和酶切底物量进行优化。同时对该方法适应性及掺伪比例的专属性、稳定性进行考察。[结果]当退火温度为58～60℃、循环数为30个时,样品均能扩增出一条379 bp的DNA条带。底物为8μL、酶切温度为37℃、酶切反应120 min时,ZraI酶将飞廉切割成120 bp和259 bp两条DNA条带;DNA底物为8μL、酶切温度为37℃、酶切反应60 min时,ApaLI酶将魁蓟切割成126 bp和253 bp两条DNA条带。[结论]试验建立的PCR-RFLP方法能够准确地鉴别大蓟混伪品飞廉、魁蓟,避免此类药材的混用,以保证临床用药安全。     

基于ITS序列位点特异性PCR鉴别北柴胡掺伪藏柴胡

目的 基于ITS序列建立北柴胡掺伪藏柴胡的分子鉴别方法.方法 收集北柴胡、藏柴胡样品,提取基因组DNA,用ITS通用引物进行测序,通过DNAMAN软件进行序列比对,根据藏柴胡特异性位点用Primer Premier 5.0软件设计特异性鉴别引物,并优化特异性PCR反应条件.结果 在位点特异性PCR反应条件考查中,退火温...     

妇女养血丸质量标准研究

目的建立妇女养血丸(丹参,当归,川芎等)的质量标准.方法采用HPLC法对制剂中主要成分丹酚酸B进行定量分析.色谱柱Hypersil ODS2-C18(4.6 mm×250 mm 5μm);流动相甲醇-乙腈-甲酸-水(2511163);检测波长286nm.对处方中当归、川芎、香附、陈皮、甘草进行薄层色谱鉴别.结果丹酚酸B在0.233～1.747μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.54%,RSD为1.87%(n=9).薄层色谱斑点清晰,阴性无干扰.结论方法准确可靠,专属性强,结果稳定,重现性好,可有效控制制剂质量.     

普乐安胶囊质量标准研究

建立普乐安胶囊的质量标准.采用HPLC法对制剂原料油菜花花粉中主要成分槲皮素和山柰素进行定量分析.采用GraceSmart C18色谱柱;以甲醇(A)-0.5%磷酸溶液(B)为流动相,采用梯度洗脱;0min,A-B(50:50);3min,A-B(40:60);15min,A-B(50:50);检测波长:360nm;流速为1.0mL·min-1;柱温:35℃.对油菜花花粉含的芦丁进行薄层色谱鉴别.槲皮素在0.01248～0.3120цg范围内线性关系良好,平均回收率为99.44%,RSD为0.79%(n=9).山柰素在0.03197～0.3996цg范围内线性关系良好,平均回收率为98.58%,RSD为1.37%(n=9).方法准确可靠,专属性强,简便、快捷,可有效控制制剂质量.     

成人单侧后牙反牙合患者下颌及颞颌关节的对称性

目的：研究成人单侧后牙反He患者下颌及颞颌关节的对称性,方法：对20例成人单侧后牙反He患者及23例正常He成人拍摄定位颏顶位片及双侧颞颌关节中位断层片进行描记分析。结果：成人单仙蝗牙反He患者在下颌坐标系中反He侧DMP点更靠远中及颊侧,在颅底坐标系中反He侧CMP,DMP点更靠远中,DMP,MM,DM点更靠侧方。结论：相对下颌坐标系,反He侧第一磨牙位置与对侧相比更靠远中及颊侧,在骨性结构上,未见下颌的不对称,相对颅底平面,下颌骨向反He侧发生了旋转。     

全脑血管造影手术的护理体会

总结35例全脑血管造影术的围手术期护理体会。主要护理措施包括对35例DSA患者造影前的心理护理、常规检查、体位训练及造影术后根据其临床表现及出现的并发症,制定相应的观察要点和护理措施。加强患者术前、术后护理能够明显减少并发症,达到良好的治疗效果。