“以学生为中心”教学模式在医学教育中的运用 FREE

“以学生为中心”教学模式是美国医学教育的基本点，是一种比较成功和有特色的教育模式［1］。笔者在美国加洲大学San Diego分校(UCSD)工作期间，通过与美国大学教师和学生的广泛接触，亲身感受到了中国医学教育与美国医学教育的差别，认为我国目前传统的医学教育与发达国家还存在很大的差别，主要表现在我国目前的教育模式从小学到大学，仍然为传统的“填鸭式”教学，即“以教师为中心”的教学模式，学生缺乏独立思考，自我表现，自我创新的机会。这在医学教育中表现尤其明显，学生很多时候并没有真正理解所学内容，为了考试去死记硬背。这样培养出来的学生往往高分低能，而很多有创造性的医学人才也不能脱颖而出。在美国笔者所在的大学，在生物和医学研究方面，有4位诺贝尔奖获得者，笔者感觉我们很多硬件并不逊于国外大学，而我们为什么没有诺贝尔奖获得者呢？其中一个很重要的原因就是我们培养的学生缺乏独立创造能力，在素质和能力方面远逊于国外大学。
鉴于“以教师为中心”的教学模式存在很多弊端，笔者在我校2004级临床医学7年制49名学生的传染病学临床教学中，大力推行了“以学生为中心”的教学模式，主要体现以下几方面。     

胎肝细胞质液对重症病毒性肝炎患者外周血TL－CFU及mIL－2R影响的实验观察

采用半固体一步单层琼脂培养法和单克隆荧光抗体技术分别观察重症肝炎外周血ＴＬ－ＣＦＵ和ｍＩＬ－２Ｒ，发现重症肝炎患者ＴＬ－ＣＦＵ（１０４．４±３２．６）及ｍＩＬ－２Ｒ（３５．６±８．６）较正常人明显降低。在培养体系中加胎肝细胞质液后，无论在重症肝炎组还是在正常组均不能明显地提高ＴＬ－ＣＦＵ，说明胎肝细胞质液不含具生物佐的促ＴＬ－ＣＦＵ因子。但对ｍＩＬ－２Ｒ表达的影响，在重症肝炎组病人，只有在ＰＨＡ存在条件下才能促进ｍＩＬ－２Ｒ的表达，说明胎肝细胞质波含有某种（些）物质能协同ＰＨＡ促进重症肝炎患者外周血淋巴细胞ｍＩＬ－２Ｒ表达。     

血浆置换联合胎肝细胞悬液治疗重型肝炎

目的 :评价中间型人工肝支持系统治疗重型肝炎的疗效。方法 :对 138例重型肝炎患者进行血浆置换联合胎肝细胞悬液治疗 ,5 6例重型肝炎患者采用血浆置换治疗 ,另 48例重型肝炎患者采用胎肝细胞悬液治疗。观察血浆置换联合胎肝细胞悬液治疗患者治疗前后肝功能、氨基酸谱及心肌酶学变化。比较血浆置换联合胎肝细胞悬液治疗与单用血浆置换或胎肝细胞悬液治疗的疗效。结果 :血浆置换联合胎肝细胞悬液治疗较单用血浆置换或胎肝细胞悬液治疗能更有效提高重型肝炎患者好转存活率 ,改善肝功能 ,提高支链氨基酸 (BCAA) /芳香氨基酸 (AAA)比值 ,改善心肌酶学。结论 :血浆置换联合胎肝细胞悬液可有效治疗重型肝炎。     

tRNA~(val)-CTE复合核酶真核表达载体构建

目的构建tRNA^val—CTE复合核酶真核表达载体，为进一步研究打下基础。方法用RT—PCR法扩增CTE DNA；合成含tRNA^val启动子和HCV5-NCIK区195住的核酶以覆内切酶KpnⅠ和EcoRⅤ序列，通过退火连接到pPUR质粒的BamHⅠ和EcoRⅠ的酶切位点之间，构建质粒pPHCV—Rz；用KpnⅠ和EcoRⅤ双酶切后，将CTE cDNA定向插入表达载体pPHCV—Rz多克隆位点中，构建成重组表达质粒，并用酶切分析和序列测定进行了鉴定。结果酶切鉴定和测序证实tRNA^val启动子和HCV5-NCIK区195住的核酶基因以覆CTE cDNA被正确克隆入真核表达载体pPUK。结论tRNA^val-CTE复合核酶真核表达载体的成功构建，为开展利用tRNA^val-CTE复合核酶切割HCV RNA的研究奠定了基础。     

丙型肝炎病毒NS5A在肝癌细胞对TLR4表达的影响

目的探讨丙型肝炎病毒非结构蛋白质5A（HCV NS5A）对Toll样受体4（TLR4）表达的影响。方法用含HCV NS5A基因的表达质粒pcNS5A瞬时转染QSG7701细胞,采用免疫细胞化学技术检测HCV NS5A及TLR4蛋白质的表达;采用逆转录聚合酶链反应观察HCV NS5A和TLR4的mRNA表达。结果转染pcNS5A质粒细胞内有HCV NS5A蛋白的表达。转染pcNS5A组TLR4 mRNA及蛋白质表达均较转染pRc/CMV和未转染质粒组明显增强,而后两组细胞TLR4 mRNA和蛋白质表达相似。结论 HCV NS5A可上调TLR4 mRNA和蛋白的表达。     

原发性胆汁性肝硬化的临床特点

目的：探讨原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者的临床特征,为临床诊断提供思路。方法：搜集2013年1月至2015年1月中南大学湘雅二医院收治的102例原发性胆汁性肝硬化患者的临床表现、生化检查、自身抗体、肝组织病理检查结果进行回顾性分析。结果：102例PBC患者中91例(89.21%)为女性,临床表现主要为乏力、纳差、口干、厌油、恶心、呕吐、皮肤瘙痒、腹痛、腹胀、消化道出血;体征主要表现为黄疸、脾大、肝大、双下肢浮肿、腹水;生化检查主要表现为碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)及γ谷氨酰转肽酶(gamma glutamyl transpeptidase,GGT)升高,GGT升高较突出。抗线粒体抗体M2亚型(anti-mitochondrial antibodies-M2,AMA-M2)阳性组(81例)与AMA-M2抗体阴性组(21例)比较生化指标差异无统计学意义(P>0.05)。肝硬化组(46例)与无肝硬化组(56例)中两组血清抗核抗体(anti-nuclear antibodies,ANA)、抗线粒体抗体M2亚型(anti-mitochondrial antibodies-M2,AMA-M2)、抗核膜糖蛋白抗体(anti-gp210 antibodies,抗gp210)、抗可溶性酸性磷酸化核蛋白抗体(anti-Sp 100 antibodies,抗Sp100)、抗-Ro52抗体(anti-Ro52 antibodies,抗Ro52)、抗前髓白血病细胞抗体(anti- promyelocytic leukemia antibodies,抗PML)阳性率分别为54.35%,89.13%,41.30%,13.04%,43.38%,10.87%和57.14%,71.43%,42.86%,12.5%,51.79%,3.71%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);而抗三联体抗体(anti-BCOADC-E2 PDC-E2 OGDC-E2 antibodies,抗3E-BPO)在肝硬化组与无肝硬化组阳性率分别为84.78%和58.93%,差异有统计学意义(P<0.05)。30例肝组织病理检查确诊PBC患者的AMA-M2抗3E-BPO阳性率比其他抗体的阳性率高。结论：PBC好发于中年女性,临床表现多样;AMA-A2与抗3E-BPO串联检测有助于提高诊断的阳性率;抗3E-BPO抗体可能作为评价PBC严重性的指标;对于自身抗体阴性的疑似患者,需进一步做肝组织病理检查以确诊。     

不同程度颅脑损伤患者血电解质水平变化及病死率评估研究

目的探讨颅脑损伤患者电解质水平变化与病情预后的关系。方法选取2012-2015年360例颅脑损伤患者作为研究对象,根据格拉斯哥昏迷评分将其分为轻度颅脑损伤组(171例)、中度颅脑损伤组(104例)、重度颅脑损伤组(85例),根据血钠水平将重度颅脑损伤组进一步分为高水平血钠亚组(73例)和稳定水平血钠亚组(12例),同时选取健康体检者70例作为对照组,检测各组入院后5d内血浆电解质(血钠、血钾、血氯)水平,并对结果进行统计分析。结果与对照组比较,轻度、中度颅脑损伤组血钠、钾、氯水平差异无统计学意义(P0.05)。重度颅脑损伤组血钠、氯水平高于轻度、中度颅脑损伤组,差异有统计学意义(P0.01)。轻度、中度、重度颅脑损伤组血钾水平与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。在重度颅脑损伤组中,高水平血钠亚组死亡58例(79.45%),稳定水平血钠亚组死亡4例(33.33%),差异有统计学意义(P0.01)。结论临床监测颅脑损伤患者尤其是重度损伤患者血钠水平变化,有利于病情恢复。     

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A对干扰素α-2b诱导的信号传导和转录激活因子1磷酸化及核转移的影响

目的探讨丙型肝炎病毒（HCV）非结构蛋白5A（NS5A）对干扰素α-2b诱导的Janus激酶-信号传导和转录激活子（JAK—STAT）信号传导途径中STAT1磷酸化及核转移的影响。方法用表达HCVNS5A的质粒（pCNS5A）转染Huh7细胞，应用免疫细胞化学技术检测HCVNS5A的表达，用免疫荧光和Western blot方法检测HCVNS5A对干扰素α-2b诱导的STAT1磷酸化和核转移的影响。结果转染了pCNS5A的Huh7细胞质可见HCVNS5A蛋白的表达；以干扰素α-2b诱导30min后，STAT1磷酸化及核转移在转染了表达HCVNS5A的质粒组比转染空白载体pRC／CMV组及未转染组减少，而未转染组及转染空白载体pRC／CMV组间无明显差别。结论表达HCVNS5A的质粒pCNS5A成功转染至Huh7细胞；HCV NS5A减弱干扰素α-2b诱导的STAT1的磷酸化及核转移，提示NS5A影响干扰素α-2b的JAKSTAT信号传导途径可能是HCV干扰素抵抗的机制之一。     

核酶在细胞外切割HCV核心区RNA的研究

目的 研究核酶在细胞外切割HCV的作用。方法 设计核酶cDNA序列，构建核酶重组质粒及HCV核心区基因cDNA重组质粒。分别进行体外转录，并加入γ-^32P ATP以标记HCV RNA。将核酶RNA、HCV核心区RNA、RNA酶抑制剂及反应缓冲液混事浊国育，以核酶RNA切割HCV RNA。通过变性聚 烯酰胺凝胶电泳及放射自显影来分析结果。结果 β－半乳糖苷酶表型筛选均可见蓝色及白色菌落生长；核酶重组质粒直接测序结果见预期要苷酸序列；HCV重组质粒限制笥酶切分析见410bp条带。核酶切割反应显示：反应时间为15和30min时可见453、307、146nt3条带。反应时间为60min时仅见307及146nt2条带。结论 核酶重组质粒构建成功，所设计核酶对HCV有切割作用。