杂交瘤细胞的小鼠腹腔复苏法

<正> 已经建立的杂交瘤细胞,常冻存于液氮,应用时再作复苏传代。传统的复苏方法,程序繁琐,耗费试剂,且容易造成污染。为此,我们对杂交瘤细胞在小鼠腹腔内直接复苏进行了探索,简介如下。 一、方法: (一)将抗-HBs/a杂交瘤细胞(本室建立)从液氮中取出,立即置37℃水箱,待刚好解冻后(约1分钟),全部移入50ml塑料离心     

制备抗线粒体单克隆抗体的初步结果

83年初自大鼠肝经蔗糖密度梯度差速离心法分离到形态典型的线粒体,聚丙烯酰胺电泳证明无杂蛋白及核酸,以此线粒体为抗原免疫Balb/c小鼠,腹腔及皮下共免疫4次,末次注射3天后取脾,制成7.6×10~6/ml细胞悬液,与SP2/0骨髓瘤细胞按1:4在50％PEG(分子量4000)溶液中进行融合,融合率为39％,由于后来霉菌污染,仅选了未污染并克隆好的孔上清液进行检测,从151孔中用ELISA法检出特异性抗体的6孔(弱阳性的2孔)计有2H_4,2H_5,2H_6,5C_5,2B_(11),6B_9,有9孔为分泌小鼠Ig的杂交瘤细胞,计有2H_4,     

应用RPHA法检测载脂蛋白B

用纯化载脂蛋白B(apo—B)免疫羊制备高效价抗体(双扩散法1:32),以该抗体提纯的IgG,致敏双醛化绵羊红细胞,检测人血清apo—B,获得满意结果。 1 材料和方法 1.1 羊抗apo—B血清,本室制备。 1.2 apo—B致敏血球,按Hirata法。 1.3 检测方法:被检样品先作1:100稀释,再按RPHA法常规操作。结果以最高稀释度++以上凝集为阳性孔,查标准曲线,所得结     

抗乙型肝炎表面抗原单克隆细胞株的建立及实验研究

<正> 我们利用简易二氧化碳培养环境,用NS-1骨髓瘤细胞与HBsAg免疫的小鼠脾细胞融合,获得-株分泌抗HBsAg的杂交瘤细胞株-E_6。现将结果报告如下。 材料和方法 小鼠免疫脾细胞的制备及细胞融合按郭恒昌等介绍的方法进行。融合后的细胞置消毒玻璃干燥器内,加适量水,密封后按其体积的5～10％灌入CO_2气,放37℃电热恒温箱中培养,每2天结合换液观察细胞生长情况。7天后吸取上清液用双抗原夹心法的ELISA及上海医化所提供的试剂作PHA法测定抗HBs,选择效价高而细胞数少的阳性孔,以有限稀释法进行亚克隆,1周后用同样方法再亚克隆,     

抗-HBs/a单克隆抗体致敏血球检测HBsAg应用研究

目前用于检测HBsAg的诊断血球多采的马抗-HBS致敏(简称马抗血球)。由于动物抗体的异质性和动物个体差异,往往给试剂的标准化带来困难。而单克隆抗体为高度特异的均质性抗体,如能严格操作程序,较易作到试剂标准化,保证实验结果的稳定性。我们以单克隆抗-HBs/a致敏双醛化绵羊红血球(简称单抗血球),检测HBsAg,结果十分满意,现报告如下:     

抗布氏杆菌单克隆细胞株的建立(简报)

以Br、28M活菌感染BALB/c小鼠(10亿/只)后,间隔21、28天和融合前三天又用28M死菌加强免疫(血清效价:试管凝集1:32),取其脾细胞与SP2/0细胞(7:1)融合,融合     

杂交瘤细胞系直接在小鼠体内复苏的探索

建株的杂交瘤细胞系一般冻存于液氮,待应用时再作复苏传代。传统的复苏方法易受污染导致失败。为此,我们对杂交瘤细胞系直接在小鼠体内复苏进行了摸索。简介如下: 将抗HBs/a杂交瘤细胞(本室建株的细胞)系从液氮中取出,立即于37℃水箱解冻(约1分钟)后,全部移入50毫升塑料离心管中,加无血清1640或GKN溶液50毫升洗涤,1000转/分