分化抗原5C5在人免疫细胞的表达

目的　明确 5C5蛋白为分化抗原 ,检测其在人免疫细胞的表达 ,以及它的信号传导作用。方法　用 5C5蛋白免疫小鼠 ,制备抗 5C5蛋白的单抗。用反义技术制备 5C5蛋白表达抑制的 3D5细胞。用免疫荧光染色和Western印迹确定 5C5单抗的特异性。用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定其分化抗原的性质。用双色免疫荧光染色流式细胞术检测 5C5分化抗原在多种人免疫细胞的表达。用Fura 3 AM试剂作探针 ,用激光共聚焦显微镜观察胞内Ca2 + 浓度的变化。结果　制备了抗 5C5蛋白的特异性单抗。用 5C5单抗作探针 ,从 3D5细胞膜免疫沉淀到 1条相对分子质量 (Mr)为 19× 10 3的蛋白带 ,并在活 3D5细胞见阳性免疫荧光染色。 5C5分化抗原在人周围血CD19+ 、CD14 + 、CD4 + 、CD8+ 和CD5 6 + 细胞的表达率分别为 (33.4 7± 7.9) %、(86 .13± 6 .7) %、(15 .79± 7.1) %、(18.11±12 .77) %和 (11.76± 7.4 7) % ,在人免疫细胞株的表达率分别为 5 8.0 % (Nalm6 )、72 .7% (3D5 )、5 3.6 %(BJAB)、6 1.0 % (Daudi)、6 .9% (SKW6 )、6 .3% (Jurkat)、5 .8% (Peer)、2 1.3% (K5 6 2 )和 39.1% (U937)。3D5细胞在 5C5单抗刺激下 ,胞内Ca2 + 浓度逐渐增高 ,可达 2倍左右 ,对照小鼠Ig则无此作用。结论5C5蛋白为一个分化抗原 ,在人周     

分化抗原gp42在人免疫细胞的表达

目的　明确gp4 2蛋白为分化抗原 ,检测它在人免疫细胞的表达。方法　用gp4 2蛋白免疫小鼠 ,制备抗gp4 2蛋白的单抗。用反义技术制备gp4 2蛋白表达抑制的 3D5细胞。用免疫荧光染色和Western印迹确定gp4 2单抗的特异性。用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定gp4 2蛋白为分化抗原。用双色免疫荧光染色流式细胞术检测gp4 2分化抗原在多种人免疫细胞的表达。结果　制备了抗gp4 2蛋白的特异性单抗。用gp4 2单抗作探针 ,从 3D5细胞膜免疫沉淀到相对分子质量 (Mr)为4 2 0 0 0的一条蛋白带 ,并在活 3D5细胞见阳性免疫荧光染色。gp4 2分化抗原在人外周围血CD19+ 、CD14 + 、CD4 + 、CD8+ 和CD5 6 + 细胞的表达率分别为 5 9.71%± 11.36 %、89.0 8%± 4 .87%、2 6 .0 3%±9.75 %、2 4 .2 4 %± 15 .2 9%和 2 4 .2 0 %± 15 .72 % ,在人免疫细胞株的表达率分别为 5 8.0 % (Nalm6 )、72 .7% (3D5 )、5 3.6 % (BJAB)、6 1.0 % (Daudi)、6 .9% (SKW6 )、6 .3% (Jurkat)、5 .8% (Peer)、2 1.3% (K5 6 2 )和 39.1% (U937)。结论　gp4 2蛋白为一个分化抗原 ,在人外周围血CD14 + 细胞的表达率最高 ,其次为CD19+ 细胞 ,CD4 + 、CD8+ 和CD5 6 + 细胞的表达率较低。     

6A8 α-甘露糖苷酶也表达于细胞膜

目的 制6A8α-甘露糖苷酶羧基端单抗并进行鉴定,以确定6A8-α基露糖苷酶在细胞的表达部位。方法 用基因重组技术构建6A8cDNA3′端DNA片段的重组表达载体,在原核细胞表达其编码蛋白,杂交瘤技术制备单抗以3D5细胞为靶细胞,间接免疫荧光染色后,用激光共聚焦显微镜及流式细胞仪鉴定单抗。结果 6A8cDNA3′端DNA在原核细胞获得表达,制备了抗6A8α-甘露糖苷酶羧基端的单抗,观察到6A8α甘露糖苷酶不仅表达于3D5细胞胞浆,也表达于胞膜。结论 成功地制德了抗6A8α-甘露糖苷酶羧基端单抗,6A8-α-甘露糖苷酶不仅表达于3D5细胞胞浆中,也表达于胞膜。     

编码人分化抗原5C5全长cDNA的克隆及功能初探

目的 编码５Ｃ５分化抗原全长ｃＤＮＡ的克隆及功能探索。方法 构建人活化Ｂ细胞株３Ｄ５细胞的λｇｔ１１ ｃＤＮＡ文库，以核苷酸杂交法从ｃＤＮＡ文库中筛选阳性克隆、作核苷酸序列分析，编码蛋白质氨基酸序列的亲疏水分析，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ测５Ｃ５ ｍＲＮＡ转录本长度，用ＲＴ－ＰＣＲ检测５Ｃ５ ｍＲＮＡ在不同细胞株的表达，观察单抗５Ｃ５－Ｇ１对３Ｄ５细胞增殖的影响。结果 从人活化Ｂ细胞株３Ｄ５的λｇ     

清解灵诱生的内源性集落刺激因子对增强宿主防御功能的作用

目的 :为探讨清解灵 (QJL)诱生的内源性集落刺激因子 (G -CSF)对增强宿主防御功能的作用。方法 :给正常小鼠注射清解灵 ,获取血清 ,用ELISA、骨髓细胞增殖及集落生成试验证明该血清含有G -CSF活性后 ,将该血清被动转输给 8只正常BALB/C小鼠 (实验组 ) ,48h后用大肠杆菌攻击该鼠 ,次日杀鼠 ,测脾悬液中大肠菌数。对照组 (8只 )以正常小鼠血清取代实验组用的血清 ,而后同法处理。结果 :经清解灵注射的小鼠血清与抗G -CSF单克隆抗体呈阳性反应 ,该血清可促进同系鼠的骨髓细胞增殖 ,并使之在固体培养基中形成以中性粒细胞为主的细胞集落。说明该血清确实含有G -CSF。被动转输此血清的实验组小鼠 ,在受大肠杆菌攻击之后其脾悬液中的大肠杆菌数量比对照组显著减少 (P <0 0 1 )。结论 :清解灵可增强宿主的抗感染能力 ,其部分机理可能与诱导机体产生内源性G -CSF有关。     

6A8 α-甘露糖苷酶基因的mRNA表达与染色体定位

目的 对6A8α－甘露糖苷酶基因作染色体定位,比较6A8α－甘露糖苷酶mRNA在人多种免疫细胞株的表达。方法 用Fish原位杂交作染色体定位,用RT－PCR检测mRNA表达。结果 6A8α－甘露糖苷酶基因定位于人第13号染色体长臂的31－32区。6A8α－甘露糖苷酶mRNA在B细胞株SKW6高表达,在B细胞株3D5、BJAB、DESS、Daudi、Nalm6中度表达,在B细胞株Navalm,T细胞株GM、Jurkat,细胞细胞瘤细胞株U937弱表达,在T细胞株Peer,慢性髓性白血病细胞株K562极弱表达。结论 6A8α－甘露糖苷酶基因定位于人第13号染色体长臂的31－32区,其mRNA表达水平在各种人免疫细胞株不同。     

用单抗进行猪卵透明带上与精卵结合相关的表位分析

卵子透明带(ZP)是精卵接触的最初位点,而ZP上的糖蛋白分子在识别配子以及     

免疫避孕的新进展

应用免疫学方法进行生育控制成为当今国际上普遍关注的问题。本文通过抗精子免疫,抗卵子免疫以及抗激素免疫三方面,概括介绍了当今免疫避孕的新进展,重点探讨了有关精子有效抗原结构,卵子透明带抗原以及它们与免疫避孕机理的关系等一系列问题。     

分化抗原gp42表达对B细胞株增殖和血清撤除致死的影响

目的　研究分化抗原gp4 2表达对 3D5B细胞株功能的影响。方法　以生长曲线检测细胞的增殖 ,碘化丙啶 (PI)染色 ,DNA流式细胞仪分析细胞周期 ,Annexin Ⅴ PI染色检测细胞死亡 ,间接免疫荧光染色流式细胞仪分析CD分子的表达 ,用Fluo 3AM作探针激光共聚焦显微镜观察胞内Ca2 + 浓度的变化。结果　分化抗原gp4 2表达抑制的 3D5细胞生长明显加速 (P <0 .0 0 1) ,从S期进入G2 M期的比率明显增加。对血清撤除所致的死亡发生抵抗。分化抗原gp4 2表达抑制的 3D5细胞间的粘附消失 ,CD11c的表达明显减弱。在McAb 5D4的刺激下 ,3D5细胞胞内的Ca2 + 浓度随时间逐步增高。结论　分化抗原gp4 2表达抑制致使 3D5细胞生长加速 ,细胞间粘附消失。分化抗原gp4 2是一个信号传导分子。     

编码与大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人6A8 cDNA在真核细胞的表达

目的观察６Ａ８ｃＤＮＡ（１３５８ｂｐ）在真核细胞的表达。方法Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ，构建６Ａ８ｃＤＮＡ表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ，转染ＣＯＳ－７细胞，及基因免疫小鼠。结果６Ａ８ｃＤＮＡ有４．３ｋｂ和３．５ｋｂ两种ｍＲＮＡ转录形式。４．３ｋｂｍＲＮＡ以外周血白细胞最丰富，其次为淋巴结、脾脏和骨髓，胸腺组织表达较少，胎肝则缺如。３．５ｋｂ者也以外周血白细胞最丰富，其次为肝脏、淋巴结和骨髓，胸腺和脾脏表达量最少。ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ在ＣＯＳ－７细胞表达了分子量４５０００左右的蛋白质，与单抗６Ａ８有反应。ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ基因免疫小鼠，６／１０只小鼠血清与人活化Ｂ细胞株３Ｄ５细胞膜有反应，５／５只对照小鼠血清呈阴性反应。结论６Ａ８ｃＤＮＡ（１３５８ｂｐ）在真核细胞获得表达，但此ｃＤＮＡ非为全长。