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目的 构建大肠埃希菌(Escherichia coli)嘌呤核苷磷酸化酶(purine nucleoside phosphorylase,PNP)基因表达载体,研究其生物活性,为肿瘤的基因治疗奠定基础.方法 PCR扩增大肠埃希菌K12的PNP基因,T4连接酶将PNP连接入pMSCV逆转录病毒载体,构建重组逆转录病毒载体... 相似文献
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运用ISO9000质量管理体系中PDCA管理原理建立"1+1"教学督导模式,对全面提升中医教学工作质量及管理水平是有创新意义的。可为中医高等院校教学质量监管工作提供操作性强、参考意义大的新型模式。 相似文献
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脂肪酸分解代谢反应过程长,产生能量多,较难掌握。若在教学中注意以下3点:区分两个脂酰CoA;β氧化与三羧酸循环部分反应相似;能量计算的几个公式,可获得良好的教学效果。 相似文献
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[目的]构建稳定表达ePNP(E.coliPNP)的细胞模型,为肿瘤的基因治疗提供实验基础。[方法]提取大肠杆菌E.coliK12总DNA,PCR方法克隆大肠杆菌ePNP基因,构建逆转录病毒载体质粒pMSCV-ANGPTL4,鉴定测序。脂质体法将三种逆转录病毒载体pMSCV-ANGPTL4、pVSV、pGAG-POL共转染293-EBNA包装细胞,获得高滴度病毒并感染MDA-MB435细胞。荧光显微镜与RT-PCR检测MDA-MB435细胞ePNP基因的表达。[结果]所克隆的ePNP基因与文献报道一致;成功构建了pMSCV/ePNP重组逆转录病毒载体;ePNP基因在MDA-MB435细胞中获得稳定表达。[结论]pMSCV/ePNP自杀基因载体的成功构建及其表达为ePNP应用于肿瘤基因治疗奠定了基础。 相似文献
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运用ISO9000质量管理体系中PDCA管理原理建立"1+1"教学督导模式,对全面提升中医教学工作质量及管理水平是有创新意义的。可为中医高等院校教学质量监管工作提供操作性强、参考意义大的新型模式。 相似文献