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1.
ThestudyofIL┐1β,TNF┐α,IL┐6geneexpresionandplasmalevelsonhemodialysisbeforeandafterdialyzerreuseQianJiaqi钱家麒,YuZhiyuan余志远,DaiH... 相似文献
2.
γ-干扰素基因修饰人肝癌细胞的免疫原性研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的研究IFN-γ基因修饰后人肝癌细胞的免疫原性。方法利用逆转录病毒载体LXSN分别建立了四种IFN-γ基因修饰人肝癌细胞,经Southern及Northern杂交进行鉴定分析,流式细胞仪(FACS)分析细胞表面MHC分子表达,灭活肿瘤细胞体外刺激诱导细胞毒T淋巴细胞(CTL)产生。结果Southern及Northern杂交结果表明,IFN-γ基因在宿主细胞中获得了正确整合和表达。FACS分析结果表明,IFN-γ基因修饰后人肝癌细胞表面HLAⅠ类分子表达强度显著增强,Ⅱ类分子的表达阳性百分率有显著提高。一些IFN-γ基因修饰人肝癌细胞在体外诱导细胞毒T淋巴细胞的能力有所提高。结论IFN-γ基因修饰可增强人肝癌细胞的免疫原性,为基因工程瘤苗的临床应用提供了一定依据。 相似文献
3.
用血清学方法研究显示中国人胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)与HLA-DR9相关。鉴于白种人中的研究显示IDDM与HLA-DQβ链第57位氨基酸相关,Asp-57对IDDM呈抗性,non-Asp与IDDM易感性相关。我们用PCR技术扩增了中国人中血清学DR9纯合的IDDM患者和正常对照的HLA-DQB1基因第二外显子并测定了核苷酸顺序,结果未发现IDDM特异HLA-DQB1等位基因,但发现IDDM病人HLA-DQB157位均为天冬氨酸。表明中国IDDM患者中的HLA-DQB157位天冬氨酸不一定具有保护个体抵抗IDDM的足够能力。IDDM易感性可能涉及多个基因位点的变化,另外还可能与其它遗传因素及环境因素有关。 相似文献
4.
血透生物相容性与血透并发症密切相关,并直接影响患者的存活率和生活质量。研究提示,血透相关的一系列变化可能与激活单核细胞释放细胞因子、影响白细胞粘附分子表达,引起与粘附功能相关的白细胞功能异常有关。本项目自90年代初在国内率先、在国际上也以领先步伐采用多聚酶联反应、细胞原位杂交技术、酶联免疫吸附试验及流式细胞仪分析方法等技术,全面系统地研究血透时不同透析膜初用、复用及不同透析时相IL-1β、TNF-α与IL-6在外周血单个核细胞中的基因表达与 相似文献
5.
放射诱导经Egr-1启动子调控的腺病毒介导CDglyTK基因的肿瘤靶向表达 总被引:13,自引:1,他引:12
目的:构建由Egr-1基因启动子驱动CDglyTK基因表达的腺病毒载体,通过放射诱导调控CDglyTK基因的肿瘤靶向表达,用于肝癌的基因-放射治疗,方法:利用细菌内高效同源重组法,制备腺病毒载体AdEger-CD/TK.MM45T.Li肝癌细胞感染AdEger-CD/TK后,体外观察γ射线照射诱导CDglyTK基因表达及在前药5-FC、GCV存在的条件下钉对存活率的变化。利用荷瘤小鼠肝癌模型观察不同处理的抑瘤效应。结果:体外实验结果显示,γ射线照射可诱导CDglyTK基因在MM45T.Li肿瘤细胞内的表达,并呈剂量依赖性;显著增强细胞对前药5-FC、GCV的敏感性(P<0.01);当5-FC和GCV同时存在时具有明显的协同效应。体内抗肿瘤实验结果提示,与单纯肿瘤局部照射(TLI)、瘤内注射AdEger-CD/TK+腹腔注射5-FC+GCVD土产且相比,瘤内注射AdEger-CD/TK+腹腔注射5-FC+GCV合并TLI组的抗瘤效果最好(P<0.01),并可使30%的肿瘤完全消退,且未见全身毒性反应的增加,结论:利用放射调控CDglyTK基因的肿瘤靶向表达,是一种安全、有效的肿瘤基因治疗新策略。 相似文献
6.
pSV-VEGF165肌内原位注射促进兔缺血后肢侧支血管形成 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 为临床探索一种更简便安全的下肢动脉缺血性疾病的基因治疗途径。方法 建立兔后肢缺血动脉模型,将体外构建的重组质粒pSV-VEGF165注射于缺血肌群,30d后行动脉造影并切取标本,测定毛细血管密度和毛细血管/肌肉数比值。结果 经pSV-VEGF165治疗后,缺血肢体毛细血管密度和毛细血管/肌肉数比值显著增加,小腿部位比大腿部位增加明显,动脉造影显示部分缺血肢体侧支动态明显增多。结论 肌肉内原位 相似文献
7.
为探讨γ干扰素用于基因治疗的有效途径,应用RTPCR从小鼠脾脏获得小鼠γ干扰素(mIFNγ)全长cDNA,经序列测定后克隆到真核表达载体pLXSN中,用阳离子脂质体Lipofectamine介导转染小鼠肝癌细胞,用PCR、RTPCR对该基因的整合和表达进行了鉴定,并对细胞培养上清中γ干扰素的活性进行了检测。结果表明,该基因已经有效地整合到细胞基因组上并实现了表达,这为进一步开展细胞因子基因治疗创造了条件。 相似文献
9.
对105例儿童白血病细胞作了IgH基因重排半巢式聚合酶链反应(PCR)分析,结果显示重排主要见于B细胞系急性淋巴细胞白血病(阳性率75.5%)及相关杂合性白血病(HAL)中,说明IgH基因重排PCR分析结果可作为分型指标之一。15例正常外周血淋巴细胞则无明显条带,说明可以区分克隆性和反应性增生。22例同时与DNA印迹比较,结果相关。5例PCR产物序列分析表明序列同源性小,是克隆特异性的。3例动态分析示3例均在完全缓解期测得白血病克隆,说明IgH基因重排PCR分析可以检测白血病克隆的消长、演变,值得进一步研究。 相似文献
10.
含细胞因子cDNA的缺陷型逆转录病毒载体质粒分别经大肠杆菌扩增、CsCl超离心法大量抽提纯化后,采用磷酸钙共沉淀法转染逆转录病毒包装细胞系PA317。分别收集到含IFN-γ、TNF-α和IL-2基因的缺陷型逆转录病毒上清及只具空白载体质粒pLXSN的病毒上清,这四种病毒颗粒用于转导人肝癌、胃癌细胞,由此建立了感染人肝癌、胃癌细胞株的转基因方法,该方法简便有效,可获得单克隆化的细胞因子基因修饰株,基因修饰株细胞抽提的DNA经PCR扩增后确证其含有细胞因子基因的逆转录病毒基因组存在,SacI酶切后用相应细胞因子探针作Southern杂交证明其未发生重排,抽提的mRNA经逆转录PCR及Northern杂交证明有相应细胞因子及筛选标记基因的表达,生物活性分析也证实各基因修饰细胞培养上清液中有一定活性的相应细胞因子, 相似文献