干扰lncRNA RHPN1-AS1表达通过靶向miR-339-5p对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA PCNA1(lncRNA RHPN1)反义AS1(RHPN1-AS1)对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:将si-NC(lncRNA RHPN1-AS1阴性对照组)、si-RHPN1-AS1(沉默lncRNA RHPN1-AS1组)、pcDNA(真核表达载体组)、pcDNA-RHPN1-AS1(沉默lncRNA RHPN1-AS1真核表达载体组)、miR-NC(微小RNA-339-5p阴性对照组)及miR-339-5p(微小RNA-339-5p组)分别转染至肝癌细胞Huh7中,记为si-NC组、si-RHPN1-AS1组、pcDNA组、pcDNA-RHPN1-AS1组、miR-NC组和miR-339-5p组;将si-RHPN1-AS1质粒分别与anti-miRNC(微小RNA-339-5p抗结剂阴性对照)、anti-miR-339-5p(微小RNA-339-5p抗结剂)共转染至Huh7细胞中,记为si-RHPN1-AS1+anti-miR-NC组(沉默lncRNA RHPN1-AS1+微小RNA-339-5p抗结剂阴性对照组)、si-RHPN1-AS1+anti-miR-339-5p组(沉默lncRNA RHPN1-AS1+微小RNA-339-5p抗结剂组);转染均采用脂质体法。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)(RT-qPCR)检测正常肝细胞(THLE-2)、肝癌细胞株(Huh7、MHCCLM3、MHCC97H)中miR-339-5p和RHPN1-AS1表达水平;双荧光素酶报告实验检测RHPN1-AS1和miR-339-5p的靶向关系;用蛋白质印迹法检测细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白、P21蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平;用流式细胞术检测细胞凋亡情况;用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测细胞活性。结果:与正常肝细胞THLE-2相比,肝癌细胞株Huh7、MHCCLM3、MHCC97H中RHPN1-AS1高表达,miR-339-5p低表达。RHPN1-AS1靶向调控miR-339-5p的表达。干扰RHPN1-AS1表达和miR-339-5p过表达的肝癌细胞Huh7中P21蛋白、Bax蛋白表达水平显著升高,Cyclin D1、Bcl-2水平显著降低,细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高。下调miR-339-5p表达逆转了干扰RHPN1-AS1表达对肝癌细胞Huh7的增殖抑制和凋亡促进作用。结论:干扰RHPN1-AS1表达可抑制肝癌细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与miR-339-5p表达有关,将可为肝癌的靶向治疗提供新靶点。     

以DJ-1蛋白为靶点治疗肝纤维化的研究进展

肝纤维化是肝硬化演变过程中的一个重要阶段,其病理学特征主要是细胞外基质在肝内过量沉积,活化的肝星状细胞是肝纤维化的病理中心环节。许多细胞因子和信号通路已被证实参与肝纤维化或肝星状细胞的激活过程,但其中很多靶点在肝纤维化中的作用尚没有完全定论。近年来,已有研究提出DJ-1蛋白将成为治疗肝纤维化潜在的分子靶点,DJ-1可通过调控肝细胞内氧自由基水平、肝Kupffer细胞氧自由基水平、炎症细胞和吞噬细胞浸润等延缓肝纤维化的进程。该文从肝纤维化与氧化应激的关系、DJ-1蛋白的概述、DJ-1在治疗肝纤维化中的作用机制等方面综述了DJ-1蛋白在治疗肝纤维化中的作用及研究进展,并分析其作为治疗肝纤维化新靶点的利弊及应用前景。     

164例住院患者药物性肝损害临床分析

目的 分析药物性肝损害（DILI）的致病药物和临床特点,为临床合理用药提供参考。方法 收集本院2013-01~12住院患者中发生药物性肝损害的病例,对患者的基础疾病、用药史、肝损害分型及预后进行回顾性分析。结果 共筛选到符合DILI诊断标准的患者164例,导致药物性肝损害的前五类药物分别是化疗药（51.98%）、中药（8.42%）、抗结核药（8.42%）、抗菌药（7.43%）和心血管系统用药（5.45%）;肝损害类型以肝细胞型为主,占71.34%,其次为胆汁淤积型（15.24%）和混合型（13.41%）;经过保肝治疗,19.51%的患者治愈,64.63%的患者好转,9.15%的患者无效,1.22%的患者死亡。结论 本院导致肝损害的药物以化疗药为主,多数为肝细胞型,经治疗后预后较好。     

慢性牙周炎口腔变黑普雷沃氏菌分离鉴定及促进食管鳞癌演进

目的分离、鉴定口腔变黑普雷沃氏菌(Prevotella nigrescens,P.nigrescens),探讨其对食管鳞癌是否有促进作用。方法胰豆胨肝粉琼脂(GAM)培养基厌氧原代培养慢性牙周炎患者龈沟液,挑选黑色菌落分离纯化;革兰染色、16S rRNA基因测序鉴定分离的单克隆细菌;该细菌感染食管鳞癌细胞NE6-T后细胞生物学性状变化。结果慢性牙周炎患者龈沟液厌氧原代培养120 h后可见多个菌落,其中灰黑色菌落经连续划线法分离纯化为黑色、圆形光滑单克隆菌落。该细菌革兰染色阴性、串珠状排列,16S rDNA序列与P.nigrescens F0103同源性为99.78%(P.nigrescens LY01)。LY01感染促进NE6-T细胞体外增殖、迁移、侵袭和裸鼠皮下荷瘤生长,并诱导Ki67表达上调和p-STAT3激活。结论慢性牙周炎口腔P.nigrescens可能促进了食管鳞癌发展。     

草酸钙结石与氧化应激相关性的研究进展

草酸钙结石为泌尿系统最常见的结石种类,且术后复发率较高.迄今为止,研究认为草酸钙结石形成机制比较复杂,且确切机制尚不明确.然而,既往大量研究及报道纷纷指出结石形成过程中均与氧化应激(OS)相关.本文就草酸钙结石与OS的相关性进行综述,认为草酸钙结石形成可能源于草酸或草酸盐刺激肾小管上皮细胞产生活性氧簇、炎性因子,从而导...     

条件性重编程技术分离培养人原代乳腺癌干细胞

目的 应用条件性重编程细胞(Conditionally Reprogrammed Cells,CRCs)技术建立高效、稳定的人乳腺癌千细胞体外培养,建立潜在的乳腺癌干细胞靶向药研究模型.方法 收集人乳腺癌组织样本,采用CRCs技术分离培养原代乳腺癌细胞,用CD24免疫磁珠标记原代乳腺癌细胞后使用磁性细胞分选仪分选出乳腺...     

HPLC法同时测定丹参配方颗粒中15个成分的含量

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定丹参配方颗粒中15个成分(原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、阿魏酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A、9-丹酚酸B-单甲酯、9′-丹酚酸B-单甲酯、丹酚酸C11个酚酸类成分和二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA4个丹参酮类成分)的含量,为其多成分质量控制奠定基础。方法 采用HPLC法,色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),流动相：乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速：1.0 mL·min^-1,柱温：30℃,检测波长：286 nm,进样量：10μL。结果 丹参配方颗粒中15个成分在考察的浓度范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率为97.83%～100.53%,RSD为1.3%～2.4%。结论 建立的HPLC定量分析方法准确可行,可以应用于同时测定丹参配方颗粒中15个成分的含量,为丹参配方颗粒多成分质量控制提供新的技术手段。     

胰岛素抵抗与脑梗死后认知功能障碍及中医证候分析

目的:对胰岛素抵抗与脑梗死后认知功能障碍中医证候分析之间的关系进行探讨.方法:将86例脑梗死后认知功能障碍患者进行中医辨证,分为气虚络瘀证、肝肾亏虚证、风痰阻络证,与无认知功能障碍的脑梗死患者30例作为对照组,并与简易智力状况检查法(mini-mental state examination,MMSE)评分和进行中医证候线性相关分析.结果:脑梗死后认知功能障碍组与对照组比较,FBG、FINS显著高于对照组(P＜0.01);ISI显著低于对照组(P＜0.01).ISI、MMSE气虚络瘀证低于肝肾亏虚证、风痰阻络证(P＜0.05);HSD则呈现为气虚络瘀证、肝肾亏虚证低于风痰阻络证(P＜0.05).结论:脑梗死后认知功能障碍与胰岛素抵抗密切相关,气虚络瘀证与认知功能障碍程度关系最密切.     

闭式置管灌洗治疗脓肿护理

目的研究闭式置管灌洗治疗脓肿护理,来治疗深部脓肿及巨大浅表脓肿迁延。方法在引流管侧壁放一硬膜外麻醉导管,通过引流管至脓肿,做为冲洗管;选用抗生素配置冲洗液。结果获得满意疗效,无复发。结论闭式置管灌洗治疗脓肿护理值得推广。     

急性单核细胞白血病合并骨髓坏死一例报告

1病例简介患者,男,61岁,因"双下肢骨痛,发热伴皮肤出血点半月"入院。骨痛以骶尾部明显,有发热,体温最高超过39℃,全身皮肤可见散在出血点,以胸部多见。体格检查:T