结核分枝杆菌Ag85B/GST融合蛋白表达载体构建及在大肠杆菌中的表达

目的 构建结核分枝杆菌Ag85B／GSF融合蛋白表达质粒，并在大肠杆菌(E．coli)中诱导表达。方法 以质粒pUC18／Ag85B为模板，用PCR法扩增结核杆菌Ag85B基因，扩增的Ag85B上游含有EcoR Ⅰ酶切位点，下游含有SalⅠ酶切位点；将Ag85B基因定向插入质粒pGEX-4T-1中，构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并转化E．coli B121，筛选阳性重组子，限制性内切酶切鉴定和DNA序列测定，异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，SDS-PAGE和Westem blot鉴定结果。结果 成功构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并表达出Mr约56000大小的Ag85B／GSY融合蛋白，表达量占总菌体的30％。结论 为进一步进行纯化Ag85B蛋白和研究其在膀胱肿瘤治疗中的作用奠定了基础。     

二次肾移植的效果及影响因素

[目的]探讨二次肾移植的效果及其相关影响因素。[方法]回顾分析46例二次肾移植病例,对二次移植的效果及切除与保留失功肾、距首次移植的时间对二次移植的影响进行分析。[结果]二次肾移植与首次移植的1、3、5年病人存活率方面无明显差异,但3、5年移植肾存活率明显下降,二次移植排斥反应发生率明显上升,以慢排为主;保留和切除失功肾及距首次移植时间对二次移植人/肾存活率及排斥反应均无明显影响。[结论]二次移植仍是移植肾失功后的首选治疗措施,其急排和慢排发生率较首次移植明显升高。失功肾的保留及距首次移植时间对排斥反应及人/肾存活率无明显影响。     

Celebrex对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的抑制作用

目的探讨选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂Celehrex对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞株的抑制作用及机制。方法体外培养人雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC3,应用MTT法、RT-PCR和ELISA法检测Celebrex对PC3细胞生长的作用及对COX-2mRNA、前列腺素E2（PGE2）和IL-6表达的影响。结果Celebrex在一定时间和剂量范围内可明显抑制PC3细胞的生长,Celebrex无论在时间-效应或剂量-效应关系上均不影响PC3细胞COX-2mRNA的表达,但能明显减少PGE2和IL-6的表达。结论炎症因子的分泌增多可能是雄激素非依赖性前列腺癌细胞生长的动力,Celebrex对COX-2mRNA的表达无明显影响,主要是通过抑制COX-2及其下游炎症因子PGE2和IL-6等的表达而对雄激素非依赖性前列腺癌发挥抑制效应。     

双下腔静脉畸形供者活体肾移植1例

本文介绍1例肾移植供者术前血管CT成像显示其左侧生殖静脉较粗(直径14.19 mm), 多次CTA成像考虑为双下腔静脉畸形。此例在完善检查排除手术禁忌证后行"后腹腔镜下左侧供肾切取术", 术中发现左侧生殖静脉内径约15 mm, 与右侧下腔静脉直径接近, 最终确定其为双下腔静脉。本例提醒术者在术前不仅要关注肾动脉变异情况, 还要关注相关静脉的变异, 避免术中误伤血管。     

小柴胡冲剂对耐激素型排斥反应的治疗作用

目的 探讨中药制剂小柴胡冲剂对肾移植术后耐激素性急性排斥反应的治疗作用及其机制.方法 应用放射配体结合分析法测定38例肾移植术后发生急性排斥反应(AR)者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体(GR)位点的变化,以GR位点数量将其分为低GR位点组(16例,GR<800,)和高GR位点组(22例,GR≥800)两组,观察甲基强地松龙(MP)及MP加小柴胡冲剂对AR的疗效及对GR表达的影响.结果 AR组GR位点数明显高于肾功能稳定组(P<0.01),其中16例GR低表达者的GR位点数明显低于肾功能稳定组(P<0.05).GR高表达组多数对MP治疗反应好,治疗后GR位点明显降低(P<0.01),8例GR低表达者单纯MP冲击治疗,7例效差,治疗后GR位点无明显变化(P>0.05),而8例MP加小柴胡冲剂治疗者6例效果较好,治疗后GR位点明显升高(P<0.05),MP 小柴胡冲剂治疗组GR mRNA表达较单纯MP治疗组及治疗前有明显升高(P<0.01).结论 监测外周血淋巴细胞GR表达可以预测AR对激素治疗的敏感性,辅助应用小柴胡冲剂可提高GR的表达,逆转AR的激素抵抗性.     

良性前列腺增生与前列腺癌的VEGF、IL-6表达

【目的】探讨前列腺增生 (BPH)、前列腺癌 (PCa)的发生及其与雄激素非依赖发生的机制。【方法】根据临床雄激素阻断治疗效果将PCa患者分为激素依赖 (ADPC)组和激素非依赖 (AIPC)组 ,根据手术及病理进行临床分期、病理分级 ,应用免疫组化对手术标本进行血管内皮生长因子 (VEGF)、白细胞介素 6 (IL 6 )的表达检测。BPH和正常前列腺组织 (NP)作对照 ,分析其与生物学行为的关系。【结果】从NP、BPH至PCa ,VEGF表达依次明显升高 (P <0 .0 1) ;IL 6表达在PCa明显高于BPH(P <0 .0 1) ,BPH与NP之间无明显差异 (P >0 .0 5 )。AIPC组织中IL 6表达明显升高 ,IL 6表达与PCa的分化程度及分期密切相关 ;VEGF表达与AIPC发生及临床生物学行为无明显关系。【结论】VEGF与前列腺组织血管及上皮 (间质 )的形成有关 ,是BPH乃至PCa发生的重要因素 ;IL 6是PCa发生及AIPC进展的促进因子 ,与PCa的预后有关。     

肾移植术后并发结核感染的诊治体会

我院 1978～ 1999年间共行肾移植85 3例次 ,并发结核感染 13例 ,现将我们的诊治体会报告如下。13例中 ,男性 7例 ,女性 6例 ,年龄16～ 5 7岁 ,平均 37.4岁 ,原发病均为慢性肾炎尿毒症 ,血液透析 6个月～ 3年 ,术前常规行胸片检查 ,均未见异常 ,均无结核病史。术后常规应用免疫抑制剂 ,移植肾功能均恢复正常。术后发生右肺结核 6例 ,左肺结核3例 ,双肺结核 1例 ,急性粟粒性肺结核2例 ,肠结核 1例 ,5例合并胸腔积液。结核发病时间为术后 5个月～ 7年 ,以咳嗽、咳痰为首发症状者 8例 ,以发热为首发症状者 4例 ,因腹痛就诊者 1例。结核菌素纯蛋…     

良性增生前列腺组织中TGF_(β1)mRNA和蛋白的表达

目的 :在转录和翻译水平探讨转化生长因子 β1(TGFβ1 )在良性前列腺增生症 (BPH)前列腺组织中的表达及意义。方法 :应用原位杂交和免疫组织化学法对 2 2例 BPH和 10例正常前列腺 (NP)组织标本中 TGFβ1的表达进行定性、定位检测。结果 :BPH前列腺和 NP组织的上皮和间质都有明显的 TGFβ1 m RNA表达 ,其表达在 BPH和 NP间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;在两组内 ,基质细胞 TGFβ1 m RNA表达明显高于上皮细胞 (P<0 .0 1)。 BPH前列腺和 NP的上皮组织中 TGFβ1 蛋白表达较弱 ,且两者之间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;间质中 TGFβ1 表达均为阳性 ,BPH前列腺间质中阳性表达显著强于 NP的间质 (P <0 .0 1) ,以基质为主要成分的增生结节中表达更高。结论 :TGFβ1 是导致 BPH前列腺间质增生的重要物质 ,启动 BPH发生发展的因素在转录后水平调控 TGFβ1 的表达。     

活体供肾者健康状况分析

目的：评价活体供肾术对供肾者健康状况的影响，探讨供肾时机及安全性。方法：对30例活体供肾者进行随访，分析活体供肾术后供肾者的患病率、长期肾功能、生活质量的变化。结果：30例活体供肾者中2例术后出现气胸，经处理恢复，余均未出现并发症，安全度过围手术期。经2～85个月随访，其中2例供者术后6个月内尿常规检查发现红细胞3～5个／HP，2例出现微量白蛋白尿，经治疗痊愈；2例出现尿路结石，处理后结石排出；1例血肌酐轻度升高，2例出现焦虑情绪。3例出现切口疼痛，18例感手术侧不适，经处理后逐步缓解，均未影响日常生活及工作。结论：活体供肾移植有很多优点，要把握供肾的时机，加强对供肾者术后的健康随访，确保活体供肾者的安全性。     

α1A受体阻滞剂联合环氧化酶抑制剂对慢性非细菌性前列腺炎的治疗作用

目的：以慢性前列腺炎症状评分（NIH-CPSI）为评价指标.探讨a1-受体阻滞剂联合环氧化酶抑制剂对慢性非细菌性前列腺炎的治疗作用.方法：105例慢性非细菌性前列腺炎患者治疗前后进行前列腺液（EPS）常规检查和细菌培养、慢性前列腺炎症状评分（NIH-CPSI）评价,应用a1A-R阻滞剂坦索罗辛＋环氧化酶（COX-2）抑制剂塞来昔布进行治疗观察.结果：治疗后患者EPS常规检查WBC计数明显减少（P＜0.01）,CPSI评分明显改善（P＜0.01）.结论：a1A-R阻滞剂＋COX-2抑制剂联合用药对慢性非细菌性前列腺炎有较好的治疗作用.