HBV感染人胎盘滋养层细胞机制的初步探讨

目的 采用透射电镜观察HBV体外感染人胎盘滋养层细胞的超微结构变化.方法 HBV体外感染人胎盘滋养层细胞.ELISA检测培养上清中HBsAg,PCR检测细胞培养上清和滋养层细胞中的HBV DNA.HBV荧光定量PCR检测细胞培养上清中HBV DNA量(拷贝/ml).透射电镜观察滋养层细胞的超微结构.结果 感染组滋养层细胞培养上清中HBsAg在PBS清洗后12 h时A值为0.942,96 h时上升为1.264.PCR检测感染组细胞培养上清和感染组细胞HBV DNA均为阳性.PBS彻底清洗后0、12、36、60、84 h感染组细胞培养上清的HBV DNA分别为:＜103,3×104,6×105,5×105,3×105拷贝/ml.透射电镜观察到感染组滋养层细胞膜附近存在包涵素(Clathrin)形式的内吞小体形成,并且发现内吞小体内存在病毒颗粒样结构.在感染组细胞粗面内质网内发现HBsAg特异性的纤维丝状结构.结论 HBV可能经包涵素依赖的细胞内吞形式进入滋养层细胞,进而实现感染细胞或通过胞释作用将病毒排至细胞的对侧而实现穿越滋养层细胞屏障.     

产科并发症与精神分裂症的病例对照研究

目的 探讨产科并发症与精神分裂症的关系。方法 病例对照研究,单因素、多因素分析。并计算相对危险度和95%的可信限。结果 单因素分析显示,孕期并发症（OR=4.63,95%CI=1.27-20.66）、生产并发症（OR=3.29,95%CI=1.06-11.29)达到统计学意义。特别分层分析,男性生产并发症发生率明显高于对照组。多因素分析,孕期营养差、孕期并发症与精神分裂症有密切的关系,OR（95%CI）分别为3.98(1.13-14.07),4.93(1.44-16.86)。结论 精神分裂症的发生与孕期、生产期环境因素密切相关,孕期、生产期损伤者为精神分裂症的高危人群。     

E 系统和 HBV 母婴传播相关关系的 Meta 分析

目的 探讨Ｅ系统在ＨＢＶ绩婴传播中的作用。方法 运用Ｍｅｔａ分析技术对１８个ＨＢＶ母婴研究进行定量综合。结果 母亲Ｅ抗原阳笥具有高度危险性（ＯＲ＝２４．６７,９５％Ｃ不３．１７～４６．０６）,Ｅ抗体阳性则相对不显（ＯＲ＝１．２０,９５％ＣＩ,０．５５～２．５８）,对各研究结果作齐性检验,无显差异（Ｐ〉０．０５）。结论 Ｅ抗原阳性是ＨＢＶ母婴传播的危险因素。     

人胎盘组织和滋养层细胞膜联素V的检测

目的检测膜联素V(AnnexinV)在人胎盘组织的表达及其分布,探讨乙肝病毒(HepatitisBVirus,HBV)感染胎盘细胞的可能方式.方法收集血清学HBsAg阳性孕妇足月胎盘组织39例、血清学HBsAg阴性孕妇足月胎盘组织4例,将培养的滋养层细胞制成细胞爬片,用免疫组化方法检测胎盘组织和滋养层细胞中的Annexin V.随机选取7例胎盘组织采用免疫荧光标记方法结合激光共聚焦技术对Annexin V进行重测.结果Annexin V存在于人类胎盘组织中,位于滋养层细胞、间质细胞及绒毛毛细血管内皮细胞的胞浆中.结论胎盘中含有丰富的AnnexinV,推测其可能是乙肝病毒进入滋养层细胞并感染胎儿的潜在受体.     

免疫预防后HBeAg与HBV宫内感染分析

目的 探讨免疫预防后母亲及其新生儿HBeAg阳性对乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染及婴儿产生抗．HBs的影响。方法 以194例HBsAg阳性孕妇及其所生的196例婴儿为研究对象。通过随访分析母亲或新生儿HBeAg阳性对HBV宫内感染的发生、新生儿HBV持续感染及其与婴儿抗．HBs产生的关系。结果 196例新生儿有10例发生宫内感染，母亲或新生儿HBeAg阳性是宫内感染的危险因素（P〈0．05），RR值分别为4．76（1．28～17．67）、5．53（1．49～20．48），共有1例HBV宫内感染慢性化的婴儿，其出生时HBeAg也阳性。在出生于HBeAg阳性母亲的婴儿、HBeAg阴性母亲的婴儿之间，在出生时HBeAg阳性的婴儿、出生时HBeAg阴性的婴儿之间，在1，4，7月龄随访时各组间抗-HBs的A值差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 HBeAg可自由通过胎盘，因此该指标不能作为宫内感染与否的判断指标。免疫预防后母亲及新生儿HBeAg阳性与否在宫内感染和慢性化中仍起重要作用。但对婴儿抗-HBs的产生无影响。     

人早孕绒毛组织的体外原代培养和人滋养细胞株的建立

目的:建立快速、有效的绒毛滋养细胞体外原代培养的方法以及建立人滋养细胞株和初步评价。方法:采用胰酶和胶原酶I混合消化法消化绒毛组织,用胰蛋白酶消化传代体外培养,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦方法对培养出的细胞进行形态和骨架评价。结果:显微镜下可见细胞呈多边形,细胞平铺生长,有细胞融合后形成的合体滋养层细胞;透射电镜下可见细胞表面的微绒毛丰富;胞质丰富,内质网扩张明显,有丰富的糖原颗粒、髓样小体和明显的脂滴,以及细胞间紧密的桥粒样结构连接;直接免疫荧光双标记染色检测到角蛋白18和波形蛋白均为阳性。结论:采用胰酶和胶原酶I混合消化法可获得较纯的滋养细胞,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦检测细胞外形和骨架,确定该体外传至56代的细胞株为滋养细胞株。     

重组体pEF—HCF诱发小鼠体液免疫反应的研究

目的：探讨基因疫苗在HCV感染中的预防和治疗价值,方法：将HCV C区基因插入pEF质粒EF－1α启动子下游。构建pEF-HCV C重组质粒,然后经肌肉注射及皮下注射免疫Balb/c小鼠。结果：在接种后3周内在肌注组内检测到抗HCV,但是抗体滴度较低,在加强免疫后7天血清抗－HCV明显增高,而其它几组 未检出抗-HCV。结论：构建的HCVDNA重组体可诱发Balb/c上鼠产生体液免疫应答。     

人正常早孕滋养细胞体外培养株的系统鉴定

目的 建立人早孕滋养细胞株（HPT-8）的系统鉴定方法。方法 通过光镜、扫描电镜、透射电镜、免疫组化和免疫荧光激光共聚焦的方法对体外培养出的HPT-8进行系统鉴定评价。结果 电镜下可见细胞表面微绒毛丰富；胞质丰富；内质网扩张明显，细胞间紧密的桥粒样结构连接；检测细胞胞浆中角蛋白18和波形蛋白均为阳性，细胞胞浆中角蛋白7为阳性，细胞膜上移动相关蛋白为阳性。表皮生长因子受体、滋养细胞趋化因子和胎盘碱性磷酸酶结果均阳性，而人绒毛促性腺激素和胎盘催乳素结果均为阴性。结论 通过多种方法对HPT-8进行形态、超微结构、蛋白骨架和功能指标的综合评价，可以较全面的确定体外传至72代的细胞株HPT-8为具有部分内分泌功能的滋养细胞株，为进一步开展实验研究建立细胞模型。     

炭疽疫苗和肾综合征出血热疫苗联合接种安全性的初步研究

目的针对战前和战时大规模人群免疫以及反生物恐怖需求,对炭疽疫苗和肾综合征出血热疫苗联合免疫接种方案的安全性进行初步评价研究,为炭疽疫苗和肾综合征出血热疫苗的联合接种提供科学依据。方法按完全随机分组方法,将180只小鼠和120只豚鼠按体质量编号随机平均分组。小鼠分为6组:联合免疫组(MA组)、联合免疫炭疽半量组(MBA组)、肾综合征出血热疫苗接种组(MB组)、炭疽疫苗组(MC组)、炭疽半量组(MBC组)、空白对照组(MD组)。豚鼠分为4组:联合免疫组(GA组)、肾综合征出血热疫苗接种组(GB组)、炭疽疫苗组(GC组)、空白对照组(GD组)。于免疫后10周内收集受试动物全身及局部反应数据,采集血液样本进行血液学检测,采集脏器组织进行病理和组织学检查,评价联合接种疫苗的安全性。结果在接种后仅前2周两种动物疫苗接种组均出现进食、进水量减少及白细胞计数增多,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。小鼠第14天MA组、MBA组、MB组、MC组、MBC组WBC与对照MD组比较差异均有统计学意义(P<0.05),第28天MB组、MC组、MBC组WBC与同期MD组比较差异均有统计学意义(P<0.05),其余小鼠各实验组间WBC各检测时段差异均无统计学意义(P>0.05)。各组小鼠的红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)、淋巴细胞百分率(LY%/LYMPH%)、淋巴细胞绝对值(LY#/LYMPH#)间差异均无统计学意义(P>0.05)。豚鼠的血液学指标变化基本和小鼠一致。组织切片镜检示组织结构正常。接种炭疽疫苗5×107cfu的组(MA组和MC组)各死亡小鼠1只。结论本研究选用的联合接种方式对于受试动物均是安全可行的,但对于小鼠联合接种炭疽疫苗2.5×107cfu和肾综合征出血热疫苗5×10-2ml可能更安全。