Gasdermin家族蛋白在缺血再灌注损伤大鼠肾组织中的表达变化

目的研究gasdermin家族蛋白在缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤大鼠肾组织中的表达变化,并探讨该家族各蛋白与急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的关系。方法 20只Sprague Dawley(SD)雄性成年大鼠随机分为假手术组与I/R组(n=10),分别给予假手术或肾脏缺血再灌注处理后,采集血液及肾组织标本;自动分析仪检测各大鼠血清肌酐、血清尿素氮水平,肾组织PAS染色评估损伤程度;蛋白印迹法检测肾组织中炎症因子interleukin(IL)-1β和interleukin(IL)-18、炎性半胱氨酸蛋白酶caspase-1和caspase-11的前体及活性体、gasdermin家族蛋白(GSDMA、GSDMB、GSDMC、GSDMD、DFNA5、DFNB59)前体及N端的表达水平。结果与假手术组比较,I/R组大鼠血清肌酐、血清尿素氮水平及肾小管损伤评分均显著增加(P0.000 1);肾组织中IL-1β、IL-18,caspase-1前体及活性体、caspase-11前体及活性体、GSDMD前体及N端表达水平均显著增加(P0.000 1、P0.001或P0.05),且GSDMD表达变化与肾功能损害程度、炎症因子表达变化呈显著正相关(P0.01),而GSDMA、GSDMB、GSDMC、DFNA5、DFNB59各蛋白前体及N端表达水平均无明显变化(P0.05)。结论 GSDMD蛋白前体及N端在缺血再灌注损伤大鼠肾组织中表达上调,而GSDMA、GSDMB、GSDMC、DFNA5、DFNB59前体及N端表达无明显差异,提示GSDMD蛋白可能是gasdermin家族中唯一介导AKI肾脏焦亡的成员,其他成员可能并不参与该病理生理过程。     

马兜铃酸和缺血再灌注所致急性肾损伤后慢性肾脏病小鼠模型的比较

目的 观察马兜铃酸和缺血再灌注所致急性肾损伤(AKI)后慢性肾脏病(CKD)动物模型的差异.方法 BALB/c小鼠分为马兜铃酸损伤(AAI)组、AAI对照组、缺血再灌注损伤(IRI)组、IRI对照组,AAI组以5 mg/kg剂量腹腔内注射马兜铃酸,AAI对照组腹腔注射等量生理盐水;IRI组予37℃双侧肾动脉夹闭缺血32 min,IRI对照组予假手术;于给药或再灌注后1、3、7、14、28、42 d收集标本.观察不同时间点各组小鼠的死亡情况及体重,自动分析法检测各小鼠血清肌酐、血清尿素氮水平,肾组织PA S染色评估肾损伤程度,Masson染色评估肾脏纤维化情况.结果 IRI组死亡率显著高于AAI组(P<0.05);AAI组小鼠体重下降更显著(P<0.05);IRI和AAI组小鼠血肌酐、尿素水平均高于对照组(P<0.05);IRI组术后第1天肾损伤最重,AAI组第7天肾损伤最重,至造模后42 d部分肾小管仍无完整结构;与对照组比较,造模后14 d IRI和AAI组均开始出现纤维化,AAI组纤维化阳性面积多于IRI组(P<0.05).结论 AAI和IRI均可成功构建小鼠AKI-CKD模型,但AAI模型更简单、稳定.     

不同穿刺针型号对肾穿刺术后出血风险的影响研究

目的 研究不同型号的肾穿刺针对肾穿刺术后出血风险的影响。方法 采用回顾性分析,纳入2020年1月至2022年12月在重庆医科大学附属第三医院和重庆市九龙坡区人民医院住院行肾穿刺活检的患者428例作为研究对象,采用不同型号穿刺针,比较术后出血并发症(血肿、血尿)发生情况。结果 428例患者行肾穿刺术后出血并发症发生率为21.0%(90/428),其中血肿发生率为18.9%(81/428),血尿发生率为2.1%(9/428);血红蛋白(Hb)下降中位数为5 g/L,需要输血及介入治疗等严重并发症发生率为0.9%(4/428)。对采用不同型号肾穿刺针患者进行分组(16G组、18G组)比较,两组基线资料及肾脏病理类型分布差异无统计学意义(P>0.05)。16G组、18G组患者术后出血发生率分别为22.4%(52/232)、19.4%(38/196),其中血肿发生率分别为20.7%(48/232)、16.8%(33/196),血尿发生率分别为1.7%(4/232)、2.6%(5/196),Hb下降分别为6(0,16)g/L、4(0,17)g/L,差异均无统计学意义(P>0.05)。两...     

马兜铃酸和缺血再灌注所致急性肾损伤后慢性肾脏病小鼠模型的比较

目的 观察马兜铃酸和缺血再灌注所致急性肾损伤(AKI)后慢性肾脏病(CKD)动物模型的差异.方法 BALB/c小鼠分为马兜铃酸损伤(AAI)组、AAI对照组、缺血再灌注损伤(IRI)组、IRI对照组,AAI组以5 mg/kg剂量腹腔内注射马兜铃酸,AAI对照组腹腔注射等量生理盐水;IRI组予37℃双侧肾动脉夹闭缺血32 min,IRI对照组予假手术;于给药或再灌注后1、3、7、14、28、42 d收集标本.观察不同时间点各组小鼠的死亡情况及体重,自动分析法检测各小鼠血清肌酐、血清尿素氮水平,肾组织PA S染色评估肾损伤程度,Masson染色评估肾脏纤维化情况.结果 IRI组死亡率显著高于AAI组(P<0.05);AAI组小鼠体重下降更显著(P<0.05);IRI和AAI组小鼠血肌酐、尿素水平均高于对照组(P<0.05);IRI组术后第1天肾损伤最重,AAI组第7天肾损伤最重,至造模后42 d部分肾小管仍无完整结构;与对照组比较,造模后14 d IRI和AAI组均开始出现纤维化,AAI组纤维化阳性面积多于IRI组(P<0.05).结论 AAI和IRI均可成功构建小鼠AKI-CKD模型,但AAI模型更简单、稳定.     

泛素连接酶Parkin的表达与糖尿病肾病肾间质损伤的关系

目的 研究泛素连接酶Parkin在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者肾组织中的表达规律及与肾小管间质损伤的关系.方法 纳入2015-2016年我院收治的40例经肾活检确诊为2型DN患者,并取10例肾肿瘤切除后远端正常肾组织为对照组.采用免疫组化检测不同DN间质损伤评分肾组织的Parkin表达水平,并与临床指标、肾组织病理损伤进行相关性分析.免疫荧光共染检测肾小管Parkin的表达分别与肾间质损伤因子IL-6、TGF-β的表达及间质纤维化标志Col-Ⅳ的表达的关系.结果 Parkin主要在肾小管上皮细胞细胞质中表达,并随着DN肾小管间质损伤评分的加重而逐渐减少.Parkin表达与肾脏结构损伤(肾小球硬化、肾小管萎缩与间质纤维化、肾间质炎症)评分呈显著负相关(P＜0.01),与肾脏功能损伤指标[尿蛋白定量、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、尿素氮、血清胱抑素C、血肌酐]呈负相关关系(P＜0.01),与肾小球滤过率呈正相关关系(P＜0.05).肾组织Parkin阳性肾小管细胞并不表达促炎因子IL-6、促纤维化因子TGF-β及Col-Ⅳ.结论 Parkin表达降低与DN肾间质损伤密切相关.     

糖尿病肾病肾组织TRAIL表达与肾小管间质损伤的关系

目的探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者肾组织的表达以及与肾组织损伤之间的关系。方法选取2010-2013年本科收治的36例患有2型糖尿病经肾活检诊断为DN患者,9例肾错构瘤或肾癌切除术患者经病理检查为正常组织作为对照。收集各组患者人口学资料、临床数据,免疫组织化学检测肾组织TRAIL表达,并与临床数据及肾组织病理损伤进行相关性分析。结果 DN患者TRAIL主要表达于肾小管上皮细胞细胞质和/或细胞膜,其表达水平随着肾小管间质损伤的加重而逐渐增加;与收缩压、尿蛋白定量、尿NAG、尿蛋白/尿肌酐、尿酸、尿素氮、血肌酐、胱抑素C呈正相关(P<0.05,P<0.01),与e GFR呈负相关(r=-0.936,P<0.01)。结论 DN肾组织TRAIL表达与肾组织损伤程度及肾功能密切相关,提示TRAIL在DN疾病进展中具有重要作用。     

MSS4在缺血再灌注损伤大鼠肾脏中的表达及作用

目的 探索MSS4在缺血再灌注损伤(IRI)大鼠肾脏中的表达情况,以及在缺氧/复氧大鼠肾小管上皮细胞中的作用.方法 雄性成年SD大鼠分为假手术组和IRI组,分别予以假手术和肾脏缺血再灌注处理(双侧肾蒂夹闭45 min后再灌注),分别于术后0、12、24、48、72 h收集血液及肾组织标本.自动分析法检测各组大鼠血尿素氮...     

尿NGAL在2型糖尿病肾病肾小管间质损伤评价中的价值

目的探讨尿中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)对评价2型糖尿病肾病(DN)患者肾小管间质损伤的价值。 方法研究对象为2012年1月至2015年12月第三军医大学大坪医院2型糖尿病患者167例(2型糖尿病组);将2型糖尿病组再分为正常白蛋白尿组(n＝56)、微量白蛋白尿组(n＝58)、大量白蛋白尿组(n＝53),其中51例患者进行了肾活检。50例非糖尿病患者作为正常对照组。采用酶联免疫吸附测定方法检测尿液中NGAL水平,分光光度法测定尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)。分析尿NGAL水平与肾功能相关指标[尿NAG、尿白蛋白/肌酐比值(ACR)、eGFR]及肾组织损伤病理评分之间的相关性,以及NGAL对DN肾小管间质损伤严重程度的评价效能,采用SPSS软件进行统计学分析,相关性分析采用Pearson或Spearman方法。 结果糖尿病患者尿NGAL水平较非糖尿病正常对照组明显增加;尿NGAL水平与尿NAG、ACR呈正相关(r＝0.528, 0.578,P<0.001),与eGFR呈负相关(r＝－0.637,P<0.001);尿NGAL水平与DN肾小管萎缩与间质纤维化(IFTA)的严重程度呈显著正相关(r＝0.652,P<0.001);尿NGAL曲线下面积最大(AUC＝0.868),特异度94.7%,敏感度71.9%。 结论尿NGAL是评价DN肾小管间质损伤理想的生物标志物之一。     

缺血再灌注大鼠肾组织及尿液DcR2表达变化与肾损伤的关系

目的 观察缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)大鼠肾损伤模型中肾组织及尿液诱骗受体2(decoy receptor 2,DcR2)的表达变化,探讨其与肾损伤的关系.方法 健康雄性SD大鼠40只,使用完全随机方法分为假手术组和I/R 60 min组,分别于术后1、3、7、21、35 d收集血、尿及双侧肾组织.检测各组大鼠血肌酐(serum creatinine,Scr)及尿NAG水平,使用PAS染色、Masson染色观察肾组织形态学变化并予以病理损伤评分,免疫组化检测肾组织DcR2表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测尿DcR2水平.结果 与假手术组Scr(21.3±1.6)μmol/L、尿NAG(4.4±0.6) U/mmol相比,I/R 60 min组1、3、7、21、35 d时Scr[(122.2 ±15.4)、(193.5 ±27.7)、(66.4±10.2)、(37.8±6.2)、(34.4±2.8)μmol/L]显著升高(P＜0.05),尿NAG[(9.8 ±2.0)、(17.0±2.5)、(7.8±1.5)、(6.5±2.1)、(6.7±2.3) U/mmol]显著升高(P＜0.05);病理结果显示皮髓交界区域出现明显的肾小管细胞坏死、脱落、基底膜裸露、细胞管型形成等病理表现,并于再灌注后期出现肾小管萎缩、间质纤维化等慢性化表现;I/R60 min组肾组织DcR2表达及尿DcR2水平较假手术组显著升高(P＜0.05),DcR2表达量及尿DcR2水平与肾功能、肾组织损伤程度呈正相关(P＜0.05);DcR2表达量与肾间质纤维化程度呈正相关(P＜0.05).结论 缺血再灌注大鼠肾组织DcR2表达量及尿DcR2水平与肾功能及肾组织损伤程度密切相关,DcR2可能在缺血再灌注后肾间质纤维化的进展中具有重要作用.