动态研究HBV和AFB1诱发树鼠句肝细胞癌过程中一些基因的表达

目的：探讨人乙肝病毒(HBV)和黄曲霉毒素B,(AFB1)致肝细胞癌(HCC)及协同致HCC作用的机制。方法：将树鼩分为4组：A组：感染HBV加摄入AFB,;B组：只感染HBV;C组：只摄入AFB1;D组：作空白对照。然后定期行肝活检,用免疫组化、分子生物学等技术动态观察一些癌基因(蛋白)和抑癌基因的表达。结果：①A组谷胱苷肽转移酶(GGT)阳性灶个数及面积明显多于、大于B、C组;②A组P21蛋白检出率明显高于B和C组,A组6只P21蛋白阳性的树鼩到120周时全部发生了HCC;③实验后期,A组HBxAg检出率及HBVDNA整合率明显高于B组;④在诱癌过程中,IGF-Ⅱ表达率呈波动形,带癌肝的表达率显著高于无癌肝;⑤105周时,A、B、C组P53蛋白表达率显著高于D组;在A,C组检出P53异常带;⑥第45及105周时,A组c-fos表达率分别为23．1％和20％;C组为38．5％和15．4％,B,D两组均未检出;⑦H-c-myc基因：直到120周,无癌肝组织均未见异常;在肝癌组织中,A组有4例扩增,c组无异常;@CDK4基因：只有A组在第75周有1例扩增,该树鼩在第106周时发生了HCC。在HCC中,A组有25％出现CDK。扩增,C组未见异常。结论：再次证实HBV和AFB。有协同致HCC作用;AFB、有利于HBxAg的表达和HBVDNA的整合;CDK4、Kiras和P53基因的变异参与了HCC的发生和演进;P21和c-fos蛋白的过表达与P^53蛋白的失活,促进了HCC的发生和演进;CDK4和c-myc基因的改变与HBV的感染有一定的关联。     

茶叶等六种食用植物对黄曲霉毒素B_1致大鼠肝癌作用的影响

人类环境中,存在许多致癌、致突变物,同时也存在许多能抑制致癌、致突变作用的物质[1、2]。寻找能抑癌、抑致突变作用的物质,用以预防人类癌症,已为许多学者所重视[2、3]。黄曲霉毒素(AFT)是人类食物中最常见的致癌物之一。为寻找能抑制AFT致癌的物质,本文应用我室建立的“黄曲霉毒素B_1(AFB_1)致肝癌作用体内短期实验模型”,研究了绿茶、红茶、猴头菌、香信、灵芝、绿豆等六种食用植物对AFB_1致大鼠肝癌作用的影响。雄性wistar大鼠,8周龄,腹腔注以肝癌启动剂AFB_1(500μg/ml二甲基亚砜),     

乙肝病毒和黄曲霉毒素B1在树鼩肝癌形成中的协同作用

目的:动态观察乙肝病毒(HBV)和黄曲霉毒素B1(AFB1)在树鼩原发性肝细胞癌(HCC)形成过程中的作用.方法:成年树鼩按不同处理分为四组:A-HBV+AFB1组;B-HBV组;C-AFB1组;D-空白对照组.整个实验期间,各组所有动物定期抽血及肝活检.实验于160周结束,处死所有动物.血及肝组织标本进行HBV感染标志及常规病理组织学等检测.结果:第一例HCC于实验99周时出现于A组.A、C组的HCC发生率分别为66.7%和30.0%;HCC的平均出现时间在A、C组分别为120.3±16.6周和153.3±5.8周(P<0.01).B、D组于实验结束时均无一例HCC发生,但动态观察中见B组的肝细胞增生结节不仅发生较早而且较多,其中一例于实验130周死亡时已有直径大至0.5cm的增生结节形成.结论:HBV作为独立的致肝癌因素时作用较弱,但HBV与AFB1有很强的协同致肝癌作用;在HCC的形成过程中可能存在着"病毒-化学协同机制".     

OLT对AFB1致树鼠句肝癌前病变的化学预防作用

目的：应用树鼯进行Oltipraz（OLT）对黄曲霉毒素B1（AFB1）的化学预防研究。方法：实验树鼯按不同处理方法分为4组：A组：正常对照二组：AFB1;C组：AFB1十药1（OLT7次／周,共5周）;D组：AFB1＋药2（OLT1次／周,共5周）。动物处死后肝组织作低温石蜡连续切片,分别染γ－GT、GST－P及HE。结果：C组与A组树鼯肝内均有较多沿汇管区分布的γ－GT阳性肝细胞群;而D组与B组肝内γ－GT阳性肝细胞群量明显减少（P＜0．01）。结论：实验结果提示了OLT具有对抗AFB1毒性的化学预防作用,并且此种作用具有一定的剂量－效应关系。本研究结果为进一步将树鼯应用于类似短期实验研究打下基础。     

EXPRESSION OF ras GENE IN EXPERIMENTAL HEPATOCARCINOGENESIS IN TREE SHREWS

Hepatocellularcarcinoma(HCC)occursathighfrequencyinSoutheastAsiaandSub-SaharanAfrica.ThemajorriskfactorsinvolvedinthedevelopmentoflivercancerintheseareasarehepatitisBvirus(HBV)andthefoodcontaminatedwithaflatoxinBI(AFBI).["'lAlthoughepidemiologicalevi...     

聚合酶链反应凝胶电泳的摄影

为提高聚合酶链反应凝胶电泳的图像质量,用不同的胶卷,设定不同的曝光和冲洗条件,对凝胶电泳进行摄影条件摸索.结果(1)对弱荧光带拍摄,ISO100/21°黑白胶卷曝光条件为f/2,时间30～60秒;ISO400/27°黑白胶卷曝光条件为f/2.8,时间5秒左右.(2)对强荧光带拍摄,ISO100/21°黑白胶卷曝光条件为f/2或f/2.8,时间10～30秒;ISO)400/27°黑白胶卷曝光条件为f/4,时间1～4秒.冲洗可用原液浓度D-72显影液.照片图像效果满意.提示电泳荧光亮度和正确曝光是图像质量的关键.     

绿茶对黄曲霉毒B_1致大鼠肝癌作用的抑制

应用本室建立的黄曲霉毒素B_1(AFB_1)致肝癌作用短期体内实验模型,研究了三种绿茶(广西灵山茶、云南大叶茶和福建鼎坑茶)对AFB_1致肝癌作用的影响。实验用雄性纯系Wistar大鼠,以AFB_1作为肝癌启动剂(400μg/kg体重/次,ip,每周6次,连续2周),然后饲以含0.015％AAF饲料2周,加大部份肝切除,作为选择性促进程序,使被AFB_1启动的肝细胞迅速增生成灶。各实验组大鼠从注AFB_1前10天至停注后3天饲以含5％绿茶的饲料,对照组则给以基础饲料。大鼠于停饲AAF饲料3天后处死。肝脏按规定部位取材,作r—谷氨酰转肽酶(r—GT)染色,用测微计测算肝癌前病变r—GT阳性灶,数据输入微型计算机,算出平均每cm~2肝面积中r—GT灶的数目、面积,每cm~3肝组织的灶数和每个灶的体积。结果,三种绿茶均显示明显抑制AFB_1的致肝癌作用。r—GT灶的数量、面积及体积均明显地少于和小于对照组。这一发现对人类肝癌的化学预防将有重要的实用价值。     

绿茶及BHA抑制AFB_1致大鼠肝癌作用的效果比较

应用体内短期动物模型,将绿茶与BHA对AFB_1致肝癌作用的抑制效果进行比较,发现5%绿茶饲料的抑制效果低于5000 ppm BHA饲料.5%绿茶对AFB_1诱发γ-GT灶的抑制率,相当于50～500 ppmBHA.     

茶多酚抑制AFB_1致大鼠肝癌作用的初步研究

应用AFB_1致肝癌作用的短期实验模型,观察绿茶成分茶多酚对AFB_1诱发肝癌前病变酶变灶的影响。结果发现,茶多酚对肝癌前病变大偏差酶变灶、小偏差酶变灶及总酶变灶均有显著的抑制作用。提示茶多酚可能是茶叶防癌的主要有效成分之一。     

COMPARATIVE STUDY ON THE INHIBITORY EFFECT OF GREEN TEA, COFFEE AND LEVAMISOLE ON THE HEPATOCARCINOGENIC ACTION OF DIETHYLNITROSAMINE

The present study aimed at clarifying whether Chinese green tea, coffee and levamisole (LMS) have similar Inhibitory effect on hepatocarclnogenesis induced by diethylnltrosamine (DEN) as they had been proved in our previous aflatoxin B1 (AFB1) experiments. Male Wistar rates were divided into control (A), green tea (B), coffee (C) and levamisole (D) groups. All rats received the same basic DEN treatment according to the program originally designed by Solt and Farber. During the two weeks before and one week after i. p. injection of DEN, the group B, C and D were given 2. 5% green tea, 5% coffee and 0. 1% LMS diet, respectively. The results demonstrated that coffee, LMS and , in particular,green tea showed Inhibitory effect against DEN-induced hepatocarcinogenesis, indicating that green tea can be used as chemopreventive agent for DEN-, as well as for AFB1-induced hepatocarcinogenesis.