时间分辨荧光免疫分析技术在真菌毒素检测的应用

近些年,生物标记技术不断的发展,免疫分析技术得到了快速的发展.例如放射免疫分析技术,由于放射分析技术存在污染性和局限性,限制其进一步发展与应用,继由放射免疫分析技术之后,又研究形成了各种非放射免疫技术,包括酶标记分析技术、荧光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术、时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoreimmuoassay,TRFIA)技术等.     

抗黄曲霉毒素B1单抗制备及免疫学定量方法建立

目的本研究合成并鉴定了AFB1人工抗原,制备AFB1的单克隆抗体(AFB1mAb)。方法采用NHS法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成W人工抗原AFB1-BSA和AFB1-OVA,紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定;AFB1-BSA免疫BALB/C小鼠,通过间接ELISA和阻断ELISA法选择细胞融合备用鼠;用杂交瘤技术制备AFB1mAb,并对其效价、亲和力、敏感性、特异性、亚型进行鉴定;体内诱生腹水法大量制备单抗。结果 UV图谱和SDS-PAGE图表明结半抗原AFB1和载体BSA及OVA偶联成功;筛选出2H5-F6、2H5-C9、2H9-C3三株杂交瘤细胞;鉴定单抗亚型均为IgG1;细胞上清效价1∶2.0×102～1∶1.28×103,2H5-F6的腹水效价1∶1.28×106,AFB1mAb亲和常数Ka为2.65×1010 L/moL,对AFB1的IC50为2.58 ng/mL;与AFB2的交叉反应率为1.61%,与其他类药物无交叉反应。结论通过试验获得高效价、敏感、特异的AFB1mAb,可用于各种食品中AFB1残留的快速免疫学检测试验。     

食品中黄曲霉毒素高灵敏检测方法研究进展

黄曲霉毒素(Aspergillus flavus toxin,AFT)主要是由黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)产生的次生代谢产物,目前已分离鉴定出12种,分别是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q1、H1、GM、B2a和毒醇,黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2是粮油制品中黄曲霉毒素存在的主要形式[1].1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织的癌症研究机构(International Agency for Research on Cancer,IARC)划定为Ⅰ类致癌物,主要作用于肝脏,在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)最为多见,其毒性和致癌性也最强[2].     

免疫分析技术在草甘膦残留检测中的应用

草甘膦作为一种高效除草剂,越来越广泛地被应用于农业生产。与此同时,草甘膦的残留问题及其潜在危害也逐渐引起人们密切关注。近年来,针对草甘膦残留的检测方法已成为研究热点,其中荧光免疫、酶联免疫吸附、免疫传感器等免疫分析方法因具有灵敏、特异、快速的特点而发展迅速。本文主要对草甘膦残留的免疫分析技术进行综述,为草甘膦残留快速检测深入研究提供参考。     

量子点标记技术在免疫学检测中的应用

1959年,Yalow等[1]将放射性同位素示踪与免疫反应相结合建立了放射免疫测定法,实现了痕量分析化学方面的重大突破,从而开创了标记免疫分析这一崭新领域。此后,一系列标记免疫分析方法纷纷涌现并不断发展,如酶联免疫吸附法、荧光免疫测定法、免疫层析测定法、免疫传感器测定法等等。     

镰刀菌毒素及其人工抗原制备研究进展

镰刀菌属是真菌中较大的一个属,分布极为广泛[1].镰刀菌分泌产生的毒素种类很多,其中对人类危害最大的主要是玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN、ZEA)、伏马菌素(fumonisin,F)和单端孢霉烯族化合物等.其中根据单端孢霉烯族化合物分子上功能基团的类型,又将其分为A和B两类,A类主要为T-2毒素,B类主要为脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON).这几种毒素是食品中最普遍存在的镰刀菌毒素,与人类的健康关系密切.镰刀菌毒素检测方法尤其是灵敏快速的免疫学检测方法研究,对提高粮食质量安全,预防其毒害作用具有重要的意义.本文就镰刀菌毒素危害及其人工抗原制备的研究动态进行综述.