小鼠骨髓巨噬细胞培养液的造血抑制活性研究

观察了小鼠骨髓型正常巨噬细胞株经６Ｇｙ＾６０Ｃｏ照射后细胞培养上对ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｇ同期怕影响,结果未照射和照射后Ａｎａ－１细胞培养３上清对ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ的形成均垢抑制活性,但照射后抑制活性更强,上清经灭活后抑制活性减弱,结论;小鼠骨髓巨噬 培养上清对ＣＦＵ－＝Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ均的抑制活性,这种抑制活性可能是抑制因子和细胞毒共同作用的结果。     

临床检验基础强化实验技能训练的教学体会

临床检验基础作为一门实践性很强的专业学科,在临床辅助诊断中占有相当重要的地位,不仅为许多临床疾病提供有重要参考价值的辅助诊断指标,而且有的检测指标可以独立成为某些疾病的确诊依据。随着循证医学时代[1]的到来,许多自动化的先进仪器设备进入临床实验室,如何用最简单、最合理的方法为临床提供有力的诊断证据,是广大检验医学工作者面临的挑战;也对从事该课程实验教学的教员提出了新的要求。1加强培养学生的“三基”训练教师是学生知识的重要来源,因此作为临床检验实验课的教员,首先自身应具备良好的素质:拥有广博的专业知识,既精通本…     

分子信标PCR检测脲原体U.Parvum和U.Urealyticum

目的 建立2个快速、同步检测脲原体U．Parvum和U．Urealyticum的分子信标PCR反应体系。方法 依据脲原体尿素酶B基因序列，设计分别针对U．Parvum和U．Urealyticum的特异性分子信标探针及引物，建立2个分子信标PCR反应体系。通过对脲原体标准株扩增后荧光强度的检测、分子信标S／B值测定以及进行特异性和敏感性实验，对2个体系进行评价并设定2个分子信标PCR反应体系的cutoff值。结果 U．Parvum和U．Urealyticum的分子信标S／B值均〉20。2个分子信标PCR体系能够检测U．Parvum、U．Urcalyticum标准株DNA．与其他14株细菌（包括5株有尿素酶细菌）无交叉反应，检测限度均为10拷贝／μl的重组质粒DNA。U．Parvum分子信标PCR反应体系的cutoff值为3．89．U．Urealyticum分子信标PCR反应体系的cutoff为5．32。结论 2个分子信标PCR反应体系能够快速、同步进行脲原体的分种鉴别，具有高度特异性和灵敏性。     

巨噬细胞炎症蛋白在造血中的作用

巨噬细胞炎症蛋白是炎症反应中的细胞因子之一。目前发现该因子对造血干（祖）细胞也有明显的抑制作用，因此它与血细胞的生成有密切的关系。由于ＭＩＰ是一个大家族，有多种分子的生物学特性及分子结构尚不清楚，因此这里就ＭＩＰ－１α在造血中的作用作一简要归纳。     

尿路感染病原菌的分布及耐药性调查

目的 了解近年来医院尿路感染病原菌的种类及对抗生素的耐药状况。方法 统计分析2002-2004年两家医院门诊及住院患者的尿培养与药敏结果。结果 3年间尿培养总计I921例,检出病原菌546株,平均阳性率为28．4％;尿路感染病原菌以大肠埃希氏菌、肠杆菌科和葡萄球菌为主,其中金黄色葡萄球菌所致尿路感染的比例呈逐年上升趋势。在检出病原菌中,革兰阴性菌对第三代头孢菌素、氟喹诺酮类、氨基糖甙类抗生素敏感;阳性菌对万古霉索、呋喃妥因、替考拉宁显示较高抗菌活性。结论 尿路感染病原菌的变迁及耐药性的增强是抗生素作用下细菌适应生存的必然结果。针对其耐药机理采取更为准确的检验方法及合理使用抗生素是尿路感染诊断和治疗的有效途径。     

PCR法检测人类脲原体U.Parvum和U.Urealyticum

目的 建立2个快速、同步检测脲原体U. Parvum和U. Urealyticum的PCR反应体系.方法 根据脲原体尿素酶B基因序列,设计2对分别针对U. Parvum和U. Urealyticum的特异性引物,建立2个PCR反应体系.通过脲原体标准株和临床阳性标本的PCR产物测序以及进行特异性和敏感性实验,对2个PCR体系进行评价.应用2个PCR反应体系对48例临床标本进行脲原体检测以及与培养法检测脲原体进行方法学比较.结果 2个PCR体系能够检测U. Parvum、U. Urealyticum标准株和临床标本中脲原体,扩增产物长度与目的片段大小一致.标准株和2个临床阳性标本扩增产物测序结果与GenBank中公布的序列完全一致.2个PCR体系与其他14株细菌(包括5株有尿素酶细菌)无交叉反应,检测限度均为10拷贝/ul的重组质粒DNA.对48例临床标本同时进行PCR和培养法脲原体检测,PCR的阳性检出率为54.2%,培养法为39.6%(P＜0.05).与培养法比较,PCR的灵敏度为94.7%,而与PCR法相比,培养法的灵敏度为69.2%.结论 2个PCR反应体系能够快速、同步进行临床标本中脲原体的分种鉴别,具有高度特异性和灵敏度.     

GITR抗体对L615白血病抑制作用的实验研究

目的 探讨糖皮质激素诱发型TNF受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor,GITR)的抗体对抗小鼠L615白血病(T淋巴细胞来源白血病)的效果和作用机制.方法 以L615小鼠建立白血病模型,分3组实验组以及阴性对照组,观察实验小鼠生存状态及时间、外周血白细胞计数及分类、外周血和骨髓中白血病细胞形态变化、肝脾指数、肝脾组织病理改变.结果 GITR抗体可以延长L615白血病小鼠的生存时间,可引起骨髓中白血病细胞发生凋亡、坏死、肝脾指数降低、肝脾组织被白血病细胞浸润,提示GITR抗体能够降低和缓解白血病细胞所致的小鼠外周血白细胞的升高和浸润,以及肝脾的肿大.结论 通过免疫调节机制GITR抗体能够有效地抑制L615白血病细胞的增殖,进而抑制白血病的发展.     

基于微型生化光谱分析仪测定血糖的干试剂研究

目的探索一种制备葡萄糖干试剂的方法,建立干试剂湿化学测定方法,为干试剂微型生化光谱分析仪的应用奠定基础。方法将测定试剂工作液添加到微孔板的小孔内,每孔200μL,用冷冻干燥的方法将试剂干燥,然后用水稀释测定样品,温浴10min,用酶标仪进行比色测定。对冻干添加剂的种类及浓度进行了筛选,应用TBHBA替换酚试剂,增强显色灵敏度,将优化的方法与生化分析仪方法进行对比。结果通过添加10g/L清蛋白制备了复溶性和反应性都较好的葡萄糖干试剂,以TBH-BA替代酚试剂,使灵敏度提高了4.6倍,增加稀释倍数,提高了反应速度,增加了线性范围,降低了检测限,优化的方法测定结果与全自动生化分析仪结果具有较好的一致性。结论通过对方法的改进和改良,研制出了能有效测定血糖的干试剂,为干试剂微型生化光谱分析仪的应用奠定了基础。     

糖化清蛋白酶法快速检测及其临床意义评价

目的评价糖化清蛋白(GA)的酶法快速检测及其临床应用的意义。方法检测147例2型糖尿病(T2DM)患者及78例健康者的空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hBG)、糖化血红蛋白(HbAlc)等指标;同时应用液态酶法测定GA,用GA高值血清和低值血清评估试剂盒的精密度及其线性,建立GA参考范围;分析GA与各检测指标的相关性。结果健康人群GA值为(14.48±2.12)%;对147例患者的相关性分析显示,GA与HbA1c具有良好的相关性(r=0.868 7,P<0.01);GA与FPG、2hBG呈正相关(r=0.854、0.836,P<0.01);HbA1c>7.0%、4.0%≤HbA1c≤7.0%以及HbA1c<4.0%患者GA与HbA1c的相关系数分别为0.823(P<0.01)、0.756(P<0.05)和0.187(P>0.05);健康者、临界者和T2DM患者间GA差异有统计学意义(P<0.001)。结论该法批内变异系数(CV)<2%,批间CV<5%,线性测定r=0.998 7。GA与HbA1c具有良好的相关性,尤其表现于长期血糖控制欠佳的患者。酶法检测GA有良好的精密度和线性。     

基于纳米金检测葡萄糖实验方法的探讨

目的探讨基于纳米金快速检测葡萄糖的新技术。方法依赖酶包被金纳米粒子(GNPs)吸附固定葡萄糖氧化酶(GOD)和辣根过氧化物酶(HRP)。葡萄糖在GOD的催化下发生氧化反应生成H2O2,生成的H2O2在HRP的催化作用下与TBHBA发生颜色反应,检测产物的最大吸收峰。结果反应体系在530nm处有最大吸收峰,吸光度值随葡萄糖浓度的增加而递增。结论 GNPs吸附的酶分子能够用于血糖的检测,并能增加试剂的稳定性。