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1.
日本血吸虫副肌球蛋白T细胞表位的预测和鉴定 总被引:3,自引:1,他引:2
目的鉴定日本血吸虫副肌球蛋白的T细胞表位。方法用SYFPEITHI软件预测日本血吸虫(中国大陆株)副肌球蛋白的T细胞表位,候选表位分别命名为P20、P21、P22、P23、P24。设计并合成候选表位的编码核苷酸,定向克隆入融合表达载体pET-32c( ),经酶切及测序鉴定出重组克隆。阳性克隆经IPTG诱导表达,表达产物以Ni^2 -NTA柱亲和层析及透析纯化。纯化后的硫氧还蛋白(Trx)融合蛋白体外刺激C3H/HeJ及C57BL/6小鼠腹股沟淋巴结或脾脏单个核细胞,^3H-TdR掺入法检测其增殖。结果候选表位中P20、P21、P22、P23能有效刺激C3H鼠致敏淋巴细胞细胞增殖,P20、P22能刺激C57鼠致敏淋巴细胞增殖。结论P20和P22可能是日本血吸虫副肌球蛋白的通用性T细胞表位。 相似文献
2.
苏川 《南京医科大学学报(自然科学版)》2005,5(4)
文章从我国与发达国家寄生虫感染与医学寄生虫学教育的特点出发,分析了我国医学寄生虫学教育面临的问题,探讨性地提出为了更好地适应我国国情、满足我国新时期培养医学生的需要,进行医学寄生虫学教育改革的几点建议. 相似文献
3.
用噬菌体肽库筛选重组日本血吸虫线粒体相关蛋白的表位 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:筛选和鉴定重组的日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白rSj38的表位。方法:用纯化的rSj338/26GST免疫家兔获得抗rSj338/26GST的多克隆抗体IgG,将抗体进一步纯化,获得抗rSj338单特异多克隆抗体IgG。用纯化抗rSj338抗体对噬菌体12肽库进行5轮免疫学筛选,挑取克隆。采用Western blot免疫识别,核苷酸序列测定分析其获得的表位并与rSj338/26GST进行同源性比较。将获得的不同表位的阳性克隆分别免疫小鼠,并采用Western blot及dot-ELISA方法筛选能刺激小鼠产生较高滴度抗rSj338抗体的阳性克隆,并将阳性噬菌体免疫的小鼠血清对纯化的rSj338/26GST,26GST,日本血吸虫成虫及虫卵抗原进行Western blot识别。结果:经5轮免疫学筛选后挑取的32个克隆,用Western blot方法30个克隆能被抗rSj338抗体识别,核苷酸序列分析发现共有11种表位,与rSj338无一级结构的同源性。经动物免疫初步实验筛选。共获得4个免疫原性较强的阳性克隆,其免疫鼠血清均可识别rSj338/26GST,日本血吸虫成虫及虫卵抗原。结论:获得了4种日本血吸虫中国大陆株线粒体相关蛋白rSj338的表位,均为模拟表位,这将为日本血吸虫病的疫苗研究开辟新的途径。 相似文献
4.
人外周血CD4+CD25+调节性T细胞的分离、鉴定和功能特征 总被引:4,自引:7,他引:4
目的: 分离人外周血CD4+ CD25+ Treg细胞, 并检测其功能.方法: RT-PCR技术检测CD4+ CD25+ Treg细胞中Foxp3的mRNA表达;与CD8+ T细胞和CD4+ CD25- T细胞共同培养, 或加入外源性IL-2及IL- 4, 检测其抑制功能;流式细胞术检测IFN-γ、 IL- 4和IL-10.结果: CD4+ CD25+ Treg细胞高表达Foxp3, 主要分泌IL-10, 能够抑制CD8+ T细胞和CD4+ CD25- T细胞的增殖, 高浓度IL-2能够阻断CD4+ CD25+ Treg细胞的抑制功能.结论: CD4+ CD25+ Treg细胞是一群具有免疫抑制功能的调节性T细胞, 这种抑制作用能够被高浓度IL-2阻断. 相似文献
5.
6.
目的大量获得纯化的日本血吸虫22.6kDa重组抗原.方法用PCR方法将其编码基因序列经改造后亚克隆入载体质粒pGEx-1λT进行表达.结果得到了融合表达的蛋白抗原.此融合蛋白表达量大,用凝血酶酶切后易大量制备纯化的重组22.6kDa抗原.结论以此融合蛋白免疫的小鼠抗血清进行免疫印迹试验,表明Sj22.6/Sj26GST融合重组蛋白具有与Sj22.6蛋白一样的免疫学活性. 相似文献
7.
日本血吸虫(中国大陆株)22.6ku抗原编码基因的核酸疫苗pCMV/S … 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探索日本血吸虫(中国大陆株)22.6ku抗原(Sj22.6)编码基因作核酸疫苗的可行性。方法 用新设计的引物以PCR法对Sj22.6编码基因进行改造,然后亚克隆入真核表达载体pCMV-β并转入大肠杆菌JM109。结果 提前重组质粒经酶切分析,筛选出了含有正向插入片段的阳性重组质粒,结论 此阳性重组质粒可用于核酸疫苗等进一步研究。 相似文献
9.
10.
日本血吸虫(中国大陆株)22.6kDa重组抗原对小鼠免疫保护性的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:为研究日本血吸虫(中国大陆株)22.6kDa抗原的免疫保护性。方法:将其编码cDNA经PCR扩增后亚克隆入载体质粒PGEX—1λt进行表达,并用重组抗原免疫了一批昆明鼠。结果:与对照组相比,重组抗原免疫小鼠获得了38.93%的减虫率。结论:证明重组的日本血吸虫22.6kDa抗原可诱导宿主抗血吸虫感染的部分保护力。 相似文献