FISH及IHC法检测乳腺癌新辅助化疗前后HER2状况的对比研究

目的分析乳腺癌新辅助化疗前后荧光原位杂交（FISH）检测HER2基因扩增状态与免疫组织化学（IHC）检测HER2表达的一致性,探讨两种检测方法的可行性和必要性。方法以135例行含紫杉醇类或CAF方案新辅助化疗的乳腺癌患者为研究对象,分别对其新辅助化疗前后的肿瘤石蜡切片标本行IHC检测和HER2基因的FISH检测,比较两种检测方法的一致性。结果新辅助化疗前对穿刺组织采用IHC与FISH行HER2检测的检出率差异无统计学意义,一致性较好（P=0．727,Kappa=0．510）,而新辅助化疗后组织采用IHC与FISH方法的HER2检出率差异有统计学意义,且一致性较差（P：0．000,Kappa=0．25）;对化疗后肿瘤组织的HER2检测,含紫杉醇类方案组的IHC与FISH结果一致性较CAF方案组低。结论新辅助化疗可能引起HER2基因的IHC与FISH结果的一致性降低,故对于行新辅助化疗特别是行含紫杉醇类新辅助化疗的患者,应行HER2基因的FISH检测,以更好地指导临床决策。     

饮食习惯对肺结核合并糖尿病患者的影响

目的 探讨饮食习惯对肺结核合并糖尿病患者的影响.方法 该院于2011年4月-2012年5月收治的重症肺结核患者合并2型糖尿病患者共52例,住院治疗期间按照肺结核及糖尿病治疗原则的基础上,制定出个性化的饮食护理方案.结果 52例患者出院时生命体征平稳,无咳嗽、咳痰、咯血、胸闷等,痰菌涂片均由阳性转为阴性;患者空腹血糖小于6.1 mmol/L 35例,6.1~8.4 mmol/L5例,大于8.4 mmol/L9例,住院期间无1例发生感染.结论 在遵行医嘱药物治疗的同时,饮食调控也是不容忽视的,有效的饮食计划可以明显提高预期疗效.     

IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡能力的影响北大核心CSCD

目的:探究过表达IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡的影响与机制。方法:免疫组织化学染色(IHC)检测乳腺癌与癌旁正常乳腺组织CXCR4与其配体CXCL12表达,并分析其相关性;Western blot检测CXCR4在人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453和MDA-MB-231中的表达;采用慢病毒稳转技术在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中过表达IL-24,免疫荧光显微镜、RT-PCR和ELISA检测感染效率;将细胞分为5组:LV-IL-24组(感染过表达IL-24慢病毒)、LV-NC组(感染阴性对照慢病毒)、AMD3100组(采用CXCR4/CXCL12轴阻滞剂AMD3100进行培养)、LV-IL-24+AMD3100组(采用AMD3100进行培养的感染过表达IL-24慢病毒的细胞)、阴性对照组(正常培养的MDAMB-231细胞);Transwell、划痕实验和Annexin V-FITC细胞凋亡实验检测上述各组细胞侵袭、迁移及凋亡;Western blot检测各组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平及凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达。结果:CXCR4与CXCL12在乳腺癌组织中的表达均显著高于正常乳腺组织,且二者表达呈正相关;与MCF-10A细胞相比,CXCR4在乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453及MDA-MB-231中表达明显增加(P<0.05),以MDA-MB-231最为显著(P<0.01)。转染过表达IL-24的慢病毒后,MDA-MB-231细胞IL-24 mRNA与蛋白表达均显著增加(P<0.05);与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞侵袭、迁移能力均显著降低(P<0.05),而凋亡率明显提高(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01);Western blot结果显示,与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),而凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达明显增加(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01)。结论:乳腺癌细胞中过表达IL-24可抑制CXCR4表达,通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路降低肿瘤细胞侵袭、迁移能力,促进其凋亡,联合使用CXCR4/CXCL12阻滞剂AMD3100可显著提高IL-24的上述抑癌效应。     

中国南部人群家族性及早发性乳腺癌患者p53基因胚系突变分析

目的：分析p53基因在中国南方部分地区家族性和早发性乳腺癌中的突变位点及特征。方法：以中国南 方地区150例家族性和早发性乳腺癌患者为研究对象,提取静脉血基因组DNA,对p53基因的全部编码序列及外显子 与内含子拼接区进行扩增。 采用变性高效液相色谱进行预筛后,应用DNA测序分析和证实基因突变的结果。结果： 150例患者中,9例的p53编码区域共发现6种不同的p53变异,其中869_888ins20(插入突变)为新发现的致病性突变, 643_660del18(缺失突变)为已报道的致病性突变,91G>A,215C>G,537T>G和743G>A为已报道有致病意义的错义突 变位点。此外,还发现了第4外显子区域的同义突变141G>A及第3内含子区域的缺失突变IVS3+54_70del16和9个基因多 态性位点。家族性及早发性乳腺癌的p53总突变率为6.00%,其中家族性乳腺癌的p53突变率约为6.81%。早发性乳腺癌 突变率约为6.25%。结论：中国南部人群家族性乳腺癌患者的p53基因胚系总突变率高于国内外文献报道,首次发现 的插入突变869_888ins20的致病意义有待今后的功能学验证。缺失突变643_660del18丰富了国人p53基因突变数据库, 有可能是中国乳腺癌人群的特有突变。     

武汉市住院复治涂阳肺结核患者首诊延误调查

目的:对武汉市住院复治涂阳肺结核患者首诊延误及其影响因素进行研究。方法:自行设计调查表,用面对面访谈的方式对188例复治涂阳肺结核患者进行调查。首诊延误的单因素分析采用Wilcoxon符号秩和检验,多因素分析采用Logistic回归。结果:首诊延误中位数为6天;首诊延误时间的危险因素为无咯血症状(OR=2.851,95%CI:1.363-5.964)及结核相关知识得分低(OR=2.082,95%CI:1.115-3.885)。结论:武汉市住院复治涂阳肺结核患者中首诊延误处于较低水平。应加强对人群的结核病健康教育,使其对结核病的可疑症状如咳嗽咳痰等有所警觉,促进其主动到结核病防治专业医疗机构就医,从而缩短首诊延误时间。     

趋化因子CXCL12及其配体CXCR4、CXCR7对HER2阳性乳腺癌细胞生物学功能的影响北大核心CSCD

目的:探究趋化因子CXCL12及其配体CXCR4、CXCR7对HER2阳性乳腺癌细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养HER2阳性乳腺癌细胞BT474,应用siRNA转染技术单独或联合沉默CXCR4、CXCR7,RT-PCR与Western blot检测转染效率;应用CXCL12刺激上述转染细胞,并将其分为5组,A组:正常培养的BT474细胞;B组:CXCL12处理的BT474细胞;C组:CXCL12处理的转染si-CXCR4细胞;D组:CXCL12处理的转染si-CXCR7细胞;E组:CXCL12处理的联合转染si-CXCR4与si-CXCR7细胞;应用CCK-8、流式细胞术、划痕实验、侵袭实验及Western blot分别检测沉默CXCR4和(或)CXCR7对CXCL12诱导的乳腺癌细胞增殖、细胞周期进展、迁移、侵袭和EMT行为的影响。结果:转染siRNA能显著降低BT474细胞中CXCR4和(或)CXCR7的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01);单独或联合沉默CXCR4与CXCR7均能明显抑制CXCL12对乳腺癌细胞增殖、细胞周期进展、迁移、侵袭行为的促进作用(P<0.05或P<0.01),并以联合沉默CXCR4与CXCR7时效果最为显著(P<0.01),与单独沉默CXCR7相比,沉默CXCR4更能抑制CXCL12对乳腺癌EMT的促进(P<0.05)。结论:沉默CXCR4或CXCR7表达均能抑制CXCL12对HER2阳性乳腺癌细胞增殖、细胞周期进展、迁移、侵袭的促进功能,但CXCL12主要通过与CXCR4相互作用来促进乳腺癌的EMT行为,而同时抑制CXCR4或CXCR7能更有效地抑制CXCL12的上述功能。     

中国湖南家族性和早发性乳腺癌患者PTEN和NBS1基因突变检测

目的：探讨中国湖南人群家族性和早发性乳腺癌患者磷酸酶张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog,PTEN)和Nijmegen断裂综合征1(Nijmegen breakage syndrome 1,NBS1)基因的突变特点及潜在意义。方法：纳入131例家族性和早发性乳腺癌患者,采用变性高效液相色谱法(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)对PTEN基因所有外显子以及NBS1基因外显子5和外显子6的突变位点进行筛查,然后采用DNA直接测序证实。结果：在131例患者中,有2例发生PTEN基因插入突变IVS4+109insTCTTA,其突变频率为1.15%;首次发现PTEN基因的2个突变225 A>C(Thr 160 Pro)与IVS5+13T>C,另一个已报道的错义突变为rs121909229 G>A(Arg 130 Gln)。在NBS1基因上发现3个突变,其中IVS6+43A>G与IVS6+127A>G为首次发现,另一个已报道的同义突变为rs1805794 G>C(Glu 185 Gln)。结论：新发现的PTEN和NBS1突变可能是中国湖南人群家族性和早发性乳腺癌的特有突变位点。     

乳腺癌组织miR-92a、KLF4 mRNA的表达及与临床病理参数、预后的关系

目的 探讨乳腺癌组织中miRNA-92a、KLF4 mRNA的表达及与临床病理参数、预后的关系。方法选取2014年1月—2016年9月长沙市第一医院乳甲外科收治的124例乳腺癌患者。qRT-PCR检测癌组织和距离> 5 cm的癌旁组织中miR-92a、KLF4 m RNA表达;Pearson相关性分析乳腺癌组织中miR-92amRNA表达与KLF4 m RNA表达的相关性;绘制不同miR-92a、KLF4 mRNA表达乳腺癌患者的生存曲线;多因素Cox回归分析乳腺癌患者预后不良影响因素。结果 癌组织miR-92a、KLF4 mRNA相对表达量高于癌旁组织（P <0.05）。Pearson相关性分析显示,乳腺癌组织中miR-92a与KLF4 mRNA表达呈正相关（r=0.612,P <0.05）。临床分期Ⅲ、Ⅳ期和有淋巴结转移患者的miR-92a、KLF4 mRNA表达水平高于临床分期Ⅰ、Ⅱ期和无淋巴结转移患者（P <0.05）。不同年龄、肿瘤直径、分化程度、雌激素受体、孕激素受体患者miR-92a、KLF4 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义（P>0...