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戊型肝炎病毒嵌合蛋白的免疫应答的初步研究 总被引:2,自引:1,他引:2
目的:对含有HEV主要抗原表位的嵌合蛋白进行表达与纯化,并对其免疫原性进行研究。方法:将含有一段HEV ORF2基因片段(394-660aa)和HEVORF3全基因的表达质粒pHEV23在大肠杆菌中进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,其表达产物经Ni^2+-NTA树脂亲和纯化,透析复性。纯化蛋白免疫小鼠,用ELISA检测小鼠血清IgG抗体,T细胞增殖反应检测细胞免疫应答。以Western-blot检测纯化蛋白对患者阳性血清的免疫反应性。结果:纯化蛋白的分子量为55KDa,纯度达90%以上;实验组特异性抗体水平明显高于对照组;T细胞增殖反应实验组与对照组比较有极显著性差异。纯化蛋白能与患者阳性血清呈特异反应。结论:嵌合蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,为进一步研究开发HEV诊断试剂盒及基因工程疫苗提供了基础。 相似文献
2.
以HBV基因转染的HepG2.2.15细胞为体外模型,研究松果菊苷对乙肝病毒(HBV)复制和抗原表达的影响,采用ELISA法测定细胞上清乙肝表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)水平;采用荧光定量PCR法检测HBV DNA水平。以HBV转基因小鼠为体内模型,研究松果菊苷对HBV复制的影响,首先采用荧光定量PCR法检测转基因小鼠肝组织HBV DNA水平,采用ELISA法检测小鼠血清HBsAg和HBeAg水平;同时检测血清转氨酶水平和肝组织病理变化;然后将HBV表达阳性的转基因小鼠随机分为5组:对照组、拉米夫定(50 mg·kg-1)组和松果菊苷高、中、低剂量(50,25,12.5 mg·kg-1)组。每天灌胃给药1次,连续给药30 d。第31天分离小鼠血清检测HBV DNA,HBsAg和HBeAg水平;提取肝组织DNA测定其HBV DNA水平,同时作肝组织病理检查。结果表明:松果菊苷在50,100 mg·L-1作用HepG2.2.15细胞6 d后能显著抑制HBsAg和HBeAg表达,其最高抑制率分别为42.68%,46.29%;同时在100 mg·L-1对HBV DNA具有抑制作用。此外,松果菊苷在50 mg·kg-1剂量时能显著抑制HBV转基因小鼠HBsAg与HBeAg表达,其抑制率分别为42.82%,29.12%,同时对转基因小鼠血清HBV DNA水平有显著抑制作用。提示松果菊苷对HBV复制和抗原表达具有较强抑制作用。 相似文献
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甲型肝炎病毒(hepatitisAvirus,HAV)是广泛传播的肝炎致病因子,儿童接种HAV疫苗,可以有效控制HAV感染和甲型肝炎流行。近年来对HAV受体的研究也取得很大进展,主要包括:HAV受体(HAVcr-1)的发现、HAVcr-1的结构特征、HAVcr-1与HAV的相互作用等方面,这对阐明HAV吸附和进入宿主细胞的分子机制具有重要意义,尤其最近有关HAVcr-1与过敏性疾病的相关性报道,更使人们对HAV的感染性有了新的认识。本文即针对以上几方面进行综述。 相似文献
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目的:比较输尿管硬镜钬激光碎石术与输尿管软镜钬激光碎石术治疗输尿管上段不同部位结石的临床疗效。方法:分析2018年4月—2021年3月行输尿管硬镜钬激光碎石术和输尿管软镜钬激光碎石术治疗输尿管上段直径>1.0 cm结石患者321例,按其术式不同分为硬镜组145例,软镜组176例,将上段输尿管以肾下极、腰4横突、骶髂关节上缘为界分为上中下3个部位后,对2组3个细分部位结石患者的手术成功率、手术时间、严重并发症和结石清除率进行比较。结果:在手术成功率方面,硬镜上部组(74.4%)明显低于软镜上部组(95.5%),差异有统计学意义(P<0.05);硬镜中部组(91.1%)与软镜中部组(93.1%)比较差异无统计学意义(P>0.05);硬镜下部组(94.7%)与软镜下部组(96.2%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。对2组手术成功患者进行比较:在手术时间方面,硬镜上部组(64.4±19.5) min、中部组(66.2±20.9) min、下部组(61.2±17.1) min分别低于软镜上部组(85.4±24.9) min、中部组(82.9±23.5) min、下部... 相似文献
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甲型肝炎病毒受体HAVcr-1及其与过敏性疾病的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,Hw)是广泛传播的肝炎致病因子,儿童接种HAV疫苗,可以有效控制HAV感染和甲型肝炎流行。近年来对HAV受体的研究也取得很大进展,主要包括:HAV受体(HAVcr-1)的发现、HAVcr-1的结构特征、HAVcr-1与HAV的相互作用等方面,这对阐明HAV吸附和进入宿主细胞的分子机制具有重要意义,尤其最近有关HAVcr-1与过敏性疾病的相关性报道,更使人们对HAV的感染性有了新的认识。本文即针对以上几方面进行综述。 相似文献
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《药物分析》是药学专业的一门主要课程,也是执业药师考试必需掌握的科目。在学习过程中,笔者发现需要面对许多药物的化学结构、理化性质和分析方法等繁杂而枯燥的内容。为了提高了学习这门课程的效率和效果,笔者从做好课前预习,学会抓住主线,归纳对比促进记忆三方面总结些学习心得体会。 相似文献
7.
戊型肝炎病毒的研究概况及进展 总被引:4,自引:0,他引:4
戊型肝炎病毒(HEV)是引起戊型肝炎(HE)的病原体。HE呈全球性分布,主要侵犯青壮年,其中孕妇死亡率高达20%。近些年来包括美国、中国、日本、印度在内的一些发达及发展中国家和地区,HE人群感染率呈上升趋势,控制该病刻不容缓。文中针对HEV的研究现状,从HEV的生物学特征、基因分型、细胞模型和动物模型、疫苗及诊断试剂的研究等方面进行综述。 相似文献
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9.
目的:观察瘦素对乙醛诱导肝星状细胞(HSC)活化过程中α-SMA和I型胶原表达的影响,旨在从体外探讨瘦素在酒精性肝病中的可能作用。方法:采用SD大鼠肝脏原位灌流消化的方法获得并原代及传代培养HSC,分乙醛(200μmol/L)处理组,瘦素(100nmol/L)处理组及联合处理组(乙醛200μmol/L加瘦素100nmol/L)。用实时荧光定量PCR方法检测各组细胞TGF-β1、Ⅰ型胶原及α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)mRNA表达水平,Western blot检测各组细胞α-SMA表达量,ELISA法检测培养上清中TGF-β1及Ⅰ型胶原含量。结果:①乙醛处理组中TGF-β1和Ⅰ型胶原基因及蛋白表达量明显高于空白对照组(P<0.05),α-SMA表达量与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);②瘦素处理组TGF-β1、Ⅰ型胶原及α-SMA表达量与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);③联合处理组TGF-β1、Ⅰ型胶原及α-SMA表达量明显高于对照组(P<0.05),但TGF-β1、Ⅰ型胶原表达量与乙醛处理组相比差异无显著性意义(P>0.05)。结论:在乙醛诱导肝星状细胞活化过程中,瘦素能协同上调α-SMA的表达;但对TGF-β1及Ⅰ型胶原的表达无影响,Ⅰ型胶原和α-SMA的表达可能是依赖于不同的调控机制来实现。 相似文献
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细胞免疫研究和治疗在全世界如火如荼地开展,细胞治疗是一项新兴技术,它的发展比相对应的监管条件和标准化过程都快。南于缺乏标准化和规范化的生产和治疗程序,我国的细胞治疗日前处于非常混乱的局面。本文在对现行细胞治疗的标准和规范方面做卅总结的同时,对有关机构,特别是生物技术公司等,在树突状细胞一细胞阗子诱导的杀伤细胞(DC—CIK)细胞生产、细胞制剂的运输和储存、细胞治疗操作的标准化和规范化方面提出了几点建议供相关人员探讨。 相似文献