Prdx6对神经干细胞增殖和分化的影响研究

目的探讨过氧化物氧化还原酶6(Prdx6)对神经干细胞的增殖和分化的影响。方法 (1)采用悬浮培养法从新生SD大鼠脑分离培养神经干细胞,传至第三代后进行神经干细胞特异性标记蛋白巢蛋白(Nestin)的免疫荧光检测;(2)细胞实验分组:溶媒组、Prdx6 1 ng/m L、10 ng/m L、100 ng/m L、1μg/m L组;(3)采用台盼蓝细胞计数法计数各组细胞培养第1 d、第2 d、第3 d、第4 d和第5 d的细胞数,并绘制细胞生长曲线;(4)细胞增殖实验观测各组细胞形成神经球的直径,用Cell Counting kit-8(CCK-8)试剂盒检测各组细胞在450 nm处的吸光度值;(5)在细胞分化实验中,通过免疫荧光染色检测神经干细胞分化后神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性细胞数。结果 (1)体外培养得到悬浮生长的神经干细胞,免疫荧光染色Nestin呈阳性;(2) Prdx6 100 ng/m L组和1μg/m L组神经干细胞形成神经球的直径、吸光度值,以及分化后的NSE、GFAP阳性细胞数与溶媒组比较,差异有统计学意义(均P 0. 05)。结论 Prdx6具有促进神经干细胞增殖和分化的作用。     

过氧化物酶6作用下神经干细胞对面神经损伤的修复研究

目的探索过氧化物酶6(Prdx6)作用下神经干细胞(NSC)对面神经离断性损伤的修复效果。方法选择新生6 h内SD大鼠6只,雌雄不限,体质量100 g左右。选择清洁级雄性成年SD大鼠30只,体质量(220±50)g,鼠龄6~8周。从新生6 h内SD大鼠取脑内分离NSC,采用悬浮的方法体外培养NSC,并进行NSC特异性标记蛋白Nestin的免疫荧光染色鉴定。将清洁级雄性成年SD大鼠分为A组(假手术组)、B组(溶媒组)、C组(Prdx6组)、D组(NSC组)、E组(NSC联合Prdx6组),每组6只。除A组外,其余各组采用手术离断方法对大鼠左侧面神经颊支离断形成5 mm缺损,制作SD大鼠面神经缺损模型,使用大鼠同种自体脱细胞动脉导管作为移植支架进行NSC移植治疗或其他处理。分别在第2、4、6、8周对各组大鼠进行面神经麻痹评分;术后8周利用尼氏染色观察各组大鼠面神经核团内的神经元情况;术后8周利用透射电子显微镜观察再生神经的恢复情况。结果取第3代神经球,用激光共聚焦电子显微镜检测到NSC特异性标记蛋白Nestin阳性表现。获得无细胞成分的脱细胞动脉导管。除A组外,术后第2、4、6、8周E组大鼠面神经恢复情况最佳,D组次之。术后8周,除A组(29.83个±2.64个)外,E组神经元数量(27.83个±1.47个)最多,其次为D组(24.17个±0.98个),差异都有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠面神经再生后通过透射电子显微镜观察,A组神经髓鞘的厚度与成熟度最好,神经外膜完整,束膜清晰,轴突横切面近圆形;其次为E组,细胞器丰富,结构清晰,形态规则,但未达到正常,且E组面神经恢复效果优于D组。结论Prdx6可以促进NSC对面神经损伤的修复效果。     

干细胞联合组织工程学在周围神经损伤中的研究进展

周围神经损伤主要包括直接外力引起的损伤和继发性的血管缺血性损伤,如创伤、炎症、肿瘤压迫、感染或手术操作等。对于无间隙且两端无明显张力的神经断伤,直接缝合是首选的治疗方法;对于神经缺损性损伤,临床上的治疗金标准是自体神经移植。然而,自体神经移植不仅在神经选取上具有局限性,同时还不可避免地造成其他正常功能的损伤[1]。     

血清PCT、hs-CRP联合ESR在四肢骨折内固定术后早期发热患者继发感染中的预测价值

目的 分析血清降钙素原(PCT)、高敏-C反应蛋白(hs-CRP)联合红细胞沉降率(ESR)在四肢骨折内固定术后早期发热患者继发感染中的预测价值.方法 回顾性分析2017年1月—2020年10月连云港市第二人民医院急诊外科收治的198例四肢骨折内固定术后患者(骨折术后组)和182例同年龄段健康志愿者(健康志愿组)资料.骨折术后组男性104例,女性94例;年龄20～78岁,平均52.5岁;道路交通伤101例,高处坠落伤46例,跌倒伤30例,殴打伤21例.健康志愿组男性98例,女性84例;年龄20～78岁,平均51.5岁.骨折术后组于术后48h抽取外周静脉血,健康志愿组采用体检剩余外周静脉血.分别采用酶联荧光法、全程C反应蛋白定量测试剂盒、全自动血沉仪检测血清PCT、hs-CRP及ESR水平,并比较两组差异.比较骨折术后组开放骨折、闭合骨折术后早期发热与未发热患者、术后早期发热患者中继发感染和未继发感染患者的血清PCT、hs-CRP及ESR水平,分析术后感染的影响因素,以及血清PCT、hs-CRP、ESR水平联合预测骨折术后组术后早期发热患者继发感染的灵敏度、特异度、曲线下面积(AUC).结果 骨折术后组中术后早期发热者占比38.9％(77/198),其中继发感染者占比38％(29/77),术后感染率为14.6％(29/198);骨折术后组术后血清PCT、hs-CRP及ESR水平均高于健康志愿组[(3.52±0.75)μg/L vs.(0.48±0.08)μg/L,(10.69±2.15)mg/L vs.(2.10±0.41)mg/L,(26.41±4.55)mm/h vs.(10.52±2.12)mm/h],骨折术后组中术后早期发热患者血清PCT、hs-CRP及ESR水平均高于未发热患者[(5.97±1.69)μg/L vs.(1.96±0.37)μg/L,(19.25±3.35)mg/L vs.(5.24±1.03)mg/L,(42.95±7.83)mm/h vs.(15.88±3.12)mm/h],术后早期发热患者中继发感染者血清PCT、hs-CRP及ESR水平均高于未感染者[(6.25±1.72)μg/L vs.(2.04±0.39)μg/L,(21.30±3.40)mg/L vs.(5.65±1.09)mg/L,(70.25±9.41)mm/h vs.(26.46±5.02)mm/h],差异均有统计学意义(P＜0.05).开放性骨折、闭合性骨折患者中上述指标变化趋势均一致;受伤至手术时间、开放性骨折、≥2次手术均为术后感染的危险因素(P＜0.05),按无菌术标准执行是其保护因素(P＜0.05);血清PCT、hs-CRP及ESR水平联合预测四肢骨折内固定术后早期发热患者继发感染的特异度、AUC均高于单独预测.结论 四肢骨折内固定术后血清PCT、hs-CRP及ESR水平普遍偏高,术后早期发热患者上述指标水平更高,尤其是继发感染患者,三者联合对此类患者继发感染的预测效能高于单独检测.     

绵羊鲜精低温保存及应用技术研究

随着绵羊规模化养殖蓬勃发展,改进羊的繁殖技术成为规模羊场提高效益的关键途径。研究羊鲜精保存技术,建立种公羊站辐射周边提供优质鲜精将大大提高优质种羊利用率及人工授精技术推广力度。目前,由于缺乏相应的鲜精保存技术支撑,种公羊站建设相对滞后。洛阳市畜牧良种繁育推广中心受河南省畜牧局委托承担冻精及鲜精稀释液研发任务。目前研发出了短期(3d)及长期(13d)保存鲜精稀释液配方,在低温(0℃~4℃)保存,3d内活力衰减5%以内。2018年3月-2018年8月在洛阳市畜牧良种繁育推广中心进行了鲜精低温保存及人工授精技术试验。对本单位4头杜泊、4头澳洲白和3头萨福克纯种绵羊种公羊采精后做低温保存技术处理,用处理后的鲜精进行24h、48h、72h活力评定,并选择2岁90只湖羊母羊经同期发情处理后,人工授精。结果是24h受精率达80%,48h受精率达73.3%,72h受精率63.3%,3d内受胎率有一定的差异。但为解决种公羊站短途运输及中长途运输鲜精问题提供新途径。