微流控芯片免疫分析抗体固定方法比较

<正>化学分析设备微型化领域或微流控分析系统,也称为"微全分析系统(μTAS)或芯片实验室(LOC)",目前已受到广泛关注[1-2]。20世纪中期,在微流控芯片上建立的一种新型分析平台[3],目前已被广泛应用在生物研究的各个领域[3],例如细胞培养[4-5]、单细胞检测[6]、基因分析[7-8]和免疫分析[9-10]。近年来,微流控技术得到广泛应用,尤其是在免疫分析方面,比如对于蛋白质的检测等。但是,在研究中我们发现抗体在微流芯片基底表面的固定是影响微芯片免     

利用RIBA试验确定HCV抗体检测的cut- off值及比较分析

目的 利用重组蛋白免疫印迹分析(RIBA)实验,制定本实验室所用的日本希森美康公司的HISCL-5000型化学发光免疫分析仪及配套的相关试剂检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的cut-off值。方法 在2015年10月至2016年9月所检测的19 341例患者标本中收集抗-HCV阳性标本80例,进行RIBA确认实验后进行分析,再利用ROC曲线计算出cut-off值。结果 在本室HCV抗体阳性率为0.41%的数据中,RIBA结果可分为3种,其中25例(31.3%)为阴性,18例(22.5%)为不确定,37例(46.2%)为阳性。当截断值为3.95 COI时,灵敏度为81.1%,特异性为95.1%。另外当特异性为100%时,截断值为5.25 COI,灵敏度为73%。结论 希森美康HISCL-5000型化学发光免疫分析仪及配套的相关试剂检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)与RIBA结果间呈正相关;当cut-off值为3.95 COI时,是一个适合本实验室的cut-off值。     

膳食因素与乳腺癌发病及其预防关系的研究进展

乳腺癌在世界范围内是女性发病率和死亡率最高的恶性肿瘤.近年来随着生活水平的提高,我国从传统的膳食模式转而逐渐趋于西方化,而女性乳腺癌发病率也在迅速增长.由于膳食因素一直被研究者视为乳腺癌发病的一个重要影响因素,该文通过查阅既往文献回顾了肉类、牛奶、大豆类食物和蔬菜水果等膳食因素与乳腺癌发病风险的关系.由于膳食因素作为可调控的危险因素,对于乳腺癌的预防具有重要意义,因此亟需设计良好、大样本的研究来明确如何从膳食因素方面降低乳腺癌的发病风险.     

液相色谱串联质谱法检测微量血维生素D含量

目的建立液相色谱串联质谱法(LC- MS/MS法)测定微量血维生素D含量的方法。方法采用非衍生处理方法,利用正离子电喷雾离子化(ESI+)、多反应监测模式(MRM)、同位素内标法检测微量血维生素D含量并进行相关方法学验证。结果 vitD2在5~100 ng/mL、vitD3在5~150 ng/mL范围内线性良好,线性相关系数分别为0.9988、0.9984。vitD2和vitD3的批内精密度和批间精密度变异系数均小于10%。vitD2低浓度回收率为87.58%,高浓度为94.68%;vitD3的低浓度回收率为92.62%,高浓度为87.65%。vitD2、vitD3的LOD分别为0.36 ng/mL和1.33 ng/mL,LOQ分别为2.5 ng/mL和2.5 ng/mL。患者样本在4℃的稳定性较好,可至少保存7d。vitD2和vitD3的携带污染分别为0.06%和 0.07%,满足要求。结论此LC- MS/MS检测法不仅样本用量少,而且操作简单,无污染,更适合临床检测分析。     

子宫内膜抗体对诊断子宫内膜异位症作用的研究进展

子宫内膜异位症(EMs)是妇科多发病,发病率高达10％～15％[1],且呈上升趋势,表现为盆腔疼痛、痛经并可导致不育,不孕率高达50％[2],严重影响了患者的身心健康.研究发现,EMs多在青少年即有累患,但由于缺乏早期诊断的方法,往往被延迟诊断和治疗[3],从而增加了患者的痛苦和治疗难度.     

对比快速染色法与革兰氏染色法对阴道炎的诊断价值

目的 对比分析快速染色法与革兰氏染色法在阴道分泌物涂片检查中的应用效果及在阴道炎诊断中的价值.方法 回顾性选取北京妇产医院2019年10月至2019年11月疑诊的阴道炎患者120例作为研究对象(其中116例确诊为阴道炎),以无菌棉拭子采集患者阴道分泌物并制作成2组样本,分别进行快速染色法与革兰氏染色法检测.根据临床症状、体征、实验室结果 做出临床诊断.统计快速染色法与革兰氏染色法对病原体检出的数量、灵敏度、特异性、准确率及两种方法的经济成本与效率,分析它们之间的差异.结果 120例患者中,革兰氏染色法与快速染色法分别检出病原体101、97例,其中线索细胞分别为52、48例,真菌分别为30、31例,滴虫均为2例,混合感染分别为17、16例,2种方法各病原体检出率差异无统计学意义(均P>0.05);且120例疑诊阴道炎患者经确诊后,阴道炎116例,非阴道炎4例.快速染色法与革兰氏染色法检出阴道炎分别为97与101例,非阴道炎分别为23与19例,与确诊结果 一致数分别为101与105例;同时2种检测方法病原体检出的灵敏度、特异性、准确率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);且快速染色法的经济成本更低,操作时长更短.结论 快速染色法检测结果 准确、灵敏,特异性好,且与革兰氏染色法检测结果 对比差异无统计学意义,但经济成本更低,操作时长更短,效率更高.     

硫酸脱氢表雄酮在围绝经期/绝经期女性中的应用研究

脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone,DHEA）是人体血循环中最为丰富的甾体物质,有极微弱的雄激素活性,是雄激素和雌激素的惰性前体,主要以硫酸脱氢表雄酮（dehydroepiandrosteronesulphate,DHEAS）的形式进入血液循环,在众多外周组织中再转化为DHEA而发挥生物学效应,到目前为止,其真正作用机制尚不明确。最近国内外研究表明,DHEA（s）在糖代谢、精神神经、心脑血管和妇产科等领域均具有重要作用。现对DHEA（S）在围绝经期／绝经期女性中的研究应用进行综述。     

羊水样本卵磷脂和鞘磷脂检测超高效液相色谱串联质谱方法的建立及应用

目的建立检测羊水中卵磷脂和鞘磷脂(L/S)的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,以便准确、高效地预测胎儿肺成熟度。方法收集孕32~39周孕妇分娩时的羊水样本23份。依据新生儿Apgar评分标准,有3例胎儿胎肺未成熟、20例胎儿胎肺成熟。另收集孕18周孕妇羊水样本7份作为基线对照,建立检测羊水中卵磷脂和鞘磷脂水平的UPLC-MS/MS方法,计算卵磷脂/鞘磷脂(L/S)比值,同时采用板层小体计数(LBC)法检测板层小体(LB),评价2种方法在预测胎肺成熟度中的价值。结果建立的检测羊水中卵磷脂和鞘磷脂的UPLC-MS/MS方法精密度良好,离子峰强度和保留时间均在可检测范围内,主成分分析(PCA)显示6个质控样本聚类良好。以L/S比值=10作为判断胎肺成熟度与不成熟的临界值,UPLC-MS/MS的敏感性和特异性均为100%。以LB=50×10^9/L作为判断胎肺成熟度与不成熟的临界值,LBC法的敏感性和特异性分别为80%和95%。结论建立了检测羊水中卵磷脂和鞘磷脂水平的UPLC-MS/MS方法,其结果可靠,可以准确、高效地预测胎肺成熟度。     

液相色谱串联质谱法测定血清维生素A、E含量

目的 建立液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS法)测定血清维生素A和维生素E含量的方法.方法 采用硫酸锌沉淀蛋白,96孔蛋白沉淀板过滤.采用LCMS/MS[正离子电喷雾离子化(ESI+)的多反应监测模式(MRM)]氘代同位素内标法检测血清维生素A、E含量并进行相关方法学验证.结果 LC-MS/MS检测血清维生素A的批内精密度变异系数为3.2％(2.4％～3.9％),批间变异为5.5％(5.O％～6.0％);维生素E的批内精密度变异系数为4.1％(3.0％～5.1％),批间变异为8.0％(7.6％～8.3％).维生素A在0.06 ～2 μg/mL、维生素E在1.2 ～ 40μg/mL范围内线性良好,线性相关系数分别为0.9987、0.9909.维生素A、维生素E的定量限分别为0.03μg/mL、0.8μg/mL;检测限分别为0.02μg/mL and 0.01 μg/mL.维生素A低浓度回收率为107.5％,高浓度为106.9％;维生素E的低浓度回收率为91.9％,高浓度为88.4％.与液相色谱方法进行比对,两种方法的结果差异无统计学意义(P值均大于0.30)说明两种方法具有一致性.结论 LC-MS/MS检测血清维生素A及维生素E的灵敏度高,结果准确、稳定,可应用于临床分析.     

妊娠期女性常规凝血指标参考范围建立

目的研究本地区妊娠期女性常规凝血指标凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶时间(TT),纤维蛋白原(FIB),D-二聚体(D-dimer)在不同孕期水平变化,建立适用于本实验室的妊娠期女性常规凝血指标的参考范围。方法选择2016年7月至2017年7月间在北京妇产医院建档的健康孕妇1068例,分为孕早期组333例、孕中期组240例、孕晚期组355例及非孕妇女140例。参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)的C28-A3文件,最终建立妊娠期女性常规凝血指标的参考范围。结果研究结果显示,D-dimer与FIB均随着孕周的增长而升高,组间差异具有统计学意义(P<0.05),APTT、PT孕中、晚期较孕早期有缩短趋势,TT孕中期较孕早期有缩短趋势。结论实验室应建立妊娠期女性不同孕期常规凝血指标的参考区间,密切监测孕妇产前凝血功能指标,了解其妊娠期凝血与纤溶功能的变化,对提高分娩安全,预防妊娠期母胎并发症,具有重要指导意义。