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1.
HCV抗原表达研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
自1989年确证HCV病毒的存在后,各国科学家用基因重组表达手段,采用不同的表达系统和方式对HCV基因区段进行了多方位表达,并对表达蛋白做了初步研究,由此发展出HCV诊断试剂。本文对近几年国内外HCV重组表达的研究做一简要综述。 相似文献
2.
目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)抗体(Ab)阴性,HCV-RNA阳性血清建立体外感染肝细胞模型.方法 HCV Ab阴性,HCV-RNA阳性的窗口期血清与人肝细胞共同培养,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色、Western blot、共聚焦显微镜和透射电镜等方法检测细胞内HCV核酸复制、蛋白质表达及超微结构改变.结果 细胞与病毒共同培养7~45 d,细胞内和/或培养上清中可间断检出HCV正、负链RNA;细胞浆内有HCV 核心和NS3抗原的表达;细胞超微结构有改变,并于感染后第24天时观察到类似病毒样颗粒.结论 窗口期血清中的HCV能在人肝细胞7701中复制一段时间. 相似文献
3.
目的 分析丙型肝炎病毒(HCV)抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂盒(EIAgen HCV Ab Kit)的可信度.方法 应用考核试剂EIAgen HCV Ab Kit和参比试剂Ortho HCV 3.0 ELISA对2 881例样本进行检测,检测结果不一致时,应用重组免疫印迹试验(RIBA)确证.所用试剂为RIBA(R)HCV 3.0 SIA或核酸试验(NAT),并对结果进行综合分析.结果 2 881例样本中,阳性样本333例,阴性样本2 539例,9例不确定的样本被剔除.考核试剂检测真阳性333例,无假阴性结果,真阴性2 527例,假阳性12例.考核试剂灵敏度为100.00%,高于参比试剂;特异性为99.53%,略低于参比试剂.考核试剂对部分国内常见HCV基因型的灵敏度为100.00%,对于非HCV感染的病毒性肝炎、自身免疫性疾病及妊娠样本具有良好的特异性,特异性均为100.00%.溶血、脂血样本对考核试剂检测结果无影响.考核试剂阳性预测值为96.52%,阴性预测值为100.00%,符合率为99.58%.考核试剂S/CO≥5.9的样本301例,其中用参比试剂检测S/CO≥3.8占88.70%;考核试剂S/CO<5.9的样本32例,其中用参比试剂检测S/CO<3.8占87.50%.结论 试剂EIAgen HCV Ab Kit灵敏度100.00%,特异性较好,是一种优质的抗-HCVELISA试剂,尤其适用于阳性样本的筛选.采用EIAgen HCV Ab Kit试剂检测样本,当S/CO≥5.9时,样本的阳性预测值比较高. 相似文献
4.
目的 通过与Ortho3.0丙型肝炎病毒(HCV)抗体诊断试剂盒比较,分析评价EIAgenHCV抗体诊断试剂盒(EIAgen)的诊断性能。方法应用考核试剂EIAgen和参比试剂Ortho3.0HCV抗体诊断试剂盒对2881份样本进行检测,检测结果不一致时,应用重组免疫印迹试验(RIBA)确证试剂RIBAHCV3.0或核酸试验(NAT)确证试剂进行确证,以对结果进行综合分析。结果2881份样本中,考核试剂及参比试剂检测结果均为阳性,且参比试剂的测量值/临界值(S/CO)≥3.8,或检测结果符合确证试验阳性结果的阳性标本为274份,考核试剂及参比试剂检测结果均为阳性且参比试剂的S/CO〈3.8为59份,阴性标本2539份,不确定的9份被剔除。考核试剂检测真阳性274份,无假阴性结果;真阴性2527份,假阳性12份。考核试剂敏感度为100%,高于参比试剂的98,91%;特异度为99.53%,略低于参比试剂的99.88%。考核试剂对部分国内常见HCV基因型(1a型、1b型、2a型、3型和6型)样本27份,均为真阳性,敏感度为100%,对于非HCV感染的病毒性肝炎、自身免疫性疾病及妊娠样本具有良好的特异度,特异度均为100%。溶血、脂血样本对考核试剂检测结果无影响。考核试剂阳性预测值为95.80%,阴性预测值为100%,准确性为99.57%。考核试剂S/CO≥5.9的样本301份,其中用参比试剂检测S/CO≥3,8占88.70%;考核试剂S/CO〈5.9的29份,其中用参比试剂检测S/CO〈3.8占86.21%。结论EIAgen敏感度100%,特异度较好,是一种优秀的检测抗-HCVEIAgen试剂,尤其适用于阳性样本的筛选。采用EIAgen试剂检测样本,当S/CO≥5.9时,样本的阳性预测值较高。 相似文献
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目的 了解HBV/HCV/HIV联合核酸检测的临床应用.方法 使用Abbott Architecti2000化学发光检测盒对534份血浆样品进行血清学检测,Roche COBAS AmpliPrep/COBAS TaqManHBV Test试剂定量检测分别与2种联合核酸检测结果 进行比较分析.结果 81份HBsAg、HBeAg、抗-HBc 3项均阳性样品联合核酸检测均为HBV阳性,200份HBsAg阴性的样品中联合核酸检测试剂分别有11、19份检测为HBV阳性.HBV DNA定量检测>500 IU/ml的193份样品联合核酸检测试剂阳性符合率分别为96.9%、94.3%,117份样品<500 IU/ml阳性符合率分别为40.2%、45.3%,151份HBV DNA阴性样品联合试剂阴性符合率为99.3%、96.0%.结论 中国人群中存在一定比例低载量HBV携带者,联合核酸试剂作为献血员筛查的补充方法 在提高血液及其制品使用的安全性方面具有一定的临床使用意义. 相似文献
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窗口期丙型肝炎病毒感染样品抗原检测意义分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的对窗口期丙型肝炎病毒(HCV)感染样品检测核心总抗原(HCVcAg Trak—C)意义进行评价,考核国外丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂盒的质量及可能的用途。方法用该试剂对8649份自然供血员及566份HCV可疑感染者血清进行核心总抗原检测,分析抗原的分布情况。与抗体试剂(Anti—HCV)、游离抗原(HCV free Ag)试剂、核酸(HCV RNA)试剂进行比较。并对检测数据进行统计分析。结果筛出157份核心总抗原和抗体同时阳性血清,抗体阴性而总抗原阳性血清5份。利用RNA试剂检测这5份血清HCV RNA阳性。利用HCV free Ag试剂检测这9215份血清,发现两份HCV游离核心抗原阳性血清,其中一份为抗原和抗体同时阳性血清,RIBA检测确证这份血清产生的是核心区抗体。另外一份为单独游离核心抗原阳性血清。结论由于检出了HCVcAg单独阳性的窗口期样品,认为利用HCV抗体试剂对血液进行筛查的同时,使用HCVcAg做必要的补充实验,可以减少因窗口期造成的漏检。 相似文献
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目的分析丙型肝炎病毒(HCV)早期感染血液样品核酸(RNA)检测的意义,并对检出的核酸阳性血清进行基因分型。方法对8649份自然供血员及566份HCV可疑感染者血清进行核酸(TMA RNA试剂)检测,检测出的HCV RNA阳性样品利用基因分型芯片进行分型。同时利用HCV核心总抗原(HCVc Ag)和游离抗原(HCV free Ag)试剂以及抗体(Anti—HCV)试剂进行检测。并对检测数据进行比较分析。结果在所有血液样品中发现1份HCV抗体、HCVc Ag、HCV free Ag全部阴性但RNA阳性的样品,基因型别为1b型。在8649份自然供血员血清中筛出1份HCVc Ag、HCV free Ag以及HCVRNA阳性但抗体阴性血清,基因型别为1b型。在566份HCV可疑感染者血清中,筛出1份HCV free Ag和核心抗体同时阳性血清,基因型别为1b型。TMA试剂筛出5份RNA阳性血清但微粒子抗体试剂检测阴性,TMA试剂筛出6份RNA阳性的血清而酶标抗体试剂检测阴性。这6份血清,利用傲拓HCV总抗原试剂检测,其中5份HCV总抗原阳性。在澳大利亚国家血液中心进行复核,其中5份RNA阳性。在566份血清中,TMA试剂检出RNA阳性495份,阳性率87.4%。对RNA阳性血清进行型别分析,以1b、2a型为主,分别为46.5%和27%。结论由于检出了HCV RNA单独阳性的窗口期样品,认为利用HCV抗体试剂对血液进行筛查的同时,使用HCV RNA试剂做必要的补充实验,可以减少因窗口期造成的漏检。型别分析认为,窗口期感染样品基因型别也以1b,2a型为主。 相似文献
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HCV核心抗原作为“窗口期”HCV感染标志物的检测 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 缩短献血者HCV感染检测的“窗口期”。方法 采用HCV核心区抗原ELISA试剂盒检测商业PANEL系列血样和健康无偿献血者标本 ,对初复检均为阳性的标本 ,采用HCV中和试验及HCVRNAPCR定性及定量确认结果。结果 1 74 9份无偿献血者标本中 ,1 8份标本初检阳性 ,复检后仍有 2份阳性 ,经HCV核心区抗原中和试验 ,HCVRNAPCR定性及定量结果均为阴性 ,HCV核心区抗原ELISA试剂的特异性为 99.88%。对PANEL 1 4份系列样本的检测显示 ,HCV核心抗原比第 3代丙肝抗体早 4 6d检出 ,与PANEL生产厂家所提供的数据几乎完全相同。结论 HCV核心抗原的检测可明显缩短献血者HCV感染检测的“窗口期” ,进一步降低输血后HCV感染的风险 相似文献
9.
为了更加全面、客观地检测国产丙型肝炎诊断试剂的质量,特别是对用于筛查献血员的诊断试剂进行严格的质量控制,在建立第一代丙型肝炎诊断试剂质控参考品的基础上,用雅培、联合生物技术公司、北京生物制品研究所等国内外试剂对400份血浆进行检测,选出198份血浆,用多种试剂及不同的方法(酶联免疫吸附试验、免疫斑点试验、聚合酶链反应)对其进行了反复的核验,建立了我国第二代丙型肝炎诊断试剂质量控制参考品。用此参考品对国产试剂进行了检定并制定了相应的检定标准,此套参考品及检定标准已获卫生部批准。 相似文献
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我们用融合蛋白表达质粒pGex构建了HCV核心抗原表达质粒Cq后,研究使其表达水平达到了菌体总蛋白的30%以上。 材料和方法 1.材料: 宿主菌 E.coli 06由我室保存,JM101由预防医学科学院病毒所惠赠。 2.方法: (1)C27按常规诱导表达,A(光密度,曾称吸光度OD)540nm为0.3~0.4时细菌生长达对数生长期。 (2)表达水平测定:经SDS-PAGE,用LKB激光扫描仪测定总菌体蛋白中的C27蛋白百分含量。 相似文献