羊心淋巴流阻断后血清生化指标的改变

为给临床心脏术后监测心淋巴管损伤程度及可能出现的并发症提供参考指标，以手术方法阻断羊心淋巴流并对其血清相关成份进行了测定。实验发现，实验组术后谷草转氨酶（ＳＧＯＴ）、谷丙转氨酶（ＳＧＰＴ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）均有不同程度的增高，以ＳＧＯＴ增高最为明显，术前均值为４７．５３Ｕ，术后２天增至１０４．２０Ｕ，高峰出现时间最早，多在术后２４小时。血清离子改变中低钾最为突出，血钾在术后２天明显降低（Ｐ＜０．０１），术后７天逐渐恢复，术后１４天恢复至术前水平。血清蛋白改变以球蛋白降低、白蛋白／球蛋白比值升高为主。提示心淋巴循环郁滞可导致心肌细胞损伤、毛细血管通透性和结构的改变。不同酶活性的变化对郁滞的敏感度存在着差异。     

人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建

目的：构建人血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C，VEGF-C)基因的真核表达载体，以便进一步研究VEGF-C基因在淋巴管生成中的作用。方法：根据人VEGF-C的cDNA序列，设计合成一对5′端分别含有EcoR I和BamH I酶切位点的特异性引物，运用RT-PCR方法克隆人乳腺癌细胞MDA-MB-231中的VEGF-C cDNA(1．26Kb；回收PCR产物(1．28Kb），并将其连接至克隆载体pMDl8-T中；重组的pMDl8-T在大肠杆菌DH5α内扩增后，经质粒提取、EcoR I和BamH I酶切，筛选出阳性重组子，并进行基因测序鉴定；琼脂糖凝胶电泳回收含有VEGF-C cDNA全长的酶切片断(1．27Kb)，然后在DNA连接酶作用下将其与真核表达载体pcDNA3．1(-)连接，重组质粒经EcoR I和BamH I酶切予以鉴定。结果：RT-PCR产物合有VEGF-C cDNA，基因测序显示重组的pMDl8-T中含有正确的人VEGF-C cDNA全长序列，重组的pcDNA3．1（-)中含有人VEGF-C cDNA全长序列。结论：成功构建了人类VEGF-C真核表达载体VEGF-C／pcDNA3．1（-)。     

心脏淋巴引流阻断慢性期冠状动脉病变

手术阻断羊心脏淋巴引流后３０～１８０ｄ，用光镜，电镜观察冠状动脉及其分支病理变化，结果显示，术后３０ｄ动脉壁病变明显，动脉壁增厚，水肿，内皮细胞和平滑肌细胞超微结构破坏，内膜局灶性增厚，动脉壁外膜及其周围心肌间质结缔组织增生并存在二性水肿，６０ｄ以后，无明显病理改变，提示以淋巴经流障碍慢性期仍可引起的冠状动脉病理改变，主要是术后３０ｄ。     

结扎切断法制作大鼠后肢缺血模型的效果

下肢缺血是临床上的常见疾病。动物后肢缺血模型是下肢缺血性疾病发病机制和治疗研究的基本前提。从制作方法看,除了缺血-再灌注模型采用暂时阻断动物后肢股动脉的方法之外,多数研究均采用通过结扎并切断动物股动脉及其主要分支的方法来达到持久阻断后肢     

基质细胞衍生因子-1α和白细胞介素-1β诱导淋巴管内皮表型的作用

目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及白细胞介素-1β(IL-1β)诱导内皮细胞表达淋巴管表型的作用。方法 SDF-1α和IL-1β分别诱导内皮细胞株CRL-1730,用Real-time PCR、Western blotting及免疫细胞化学等方法检测其内皮及淋巴管标志物,的表达情况。结果 SDF-1α诱导培养之后,CRL-1730细胞株的内皮细胞标志物血管性血友病因子(vWF)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)2随其浓度增高而表达降低,淋巴管标志物平足蛋白(podoplanin)、同源异形盒蛋白-1(Prox-1)和淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)随其浓度增高而表达增高。IL-1β诱导之后,CRL-1730细胞株的vWF、VEGFR2和podoplanin、prox-1、LYVE-1的变化趋势同SDF-1α,而VE-cadherin的表达量基本不变。结论 SDF-1α和IL-1β都能够诱导血管内皮细胞表达淋巴管标志物。     

中药白芨建立大鼠脑缺血模型可行性探讨

目的:以中药白芨作为栓塞剂建立大鼠脑缺血模型,探讨这一新方法的可行性. 方法:手术暴露大鼠右侧颈部血管,向右颈内动脉注入一定量的白芨微粒悬液或白芨胶,在术后一定时间内进行神经功能缺失评分、大脑切片红四氮唑(TTC)染色和组织学H.E染色. 结果:白芨微粒组大鼠术后4 h内呈现意识障碍,持续性对侧肢体轻度偏瘫及环转,TTC染色显示右侧大脑半球额叶、顶叶皮层和基底核附近局灶性缺血或梗塞,光学显微镜下可见缺血区脑组织水肿或坏死,神经元轮廓模糊,核固缩或裂解等;白芨胶组仅在术后术后1 h内有轻度意识障碍,12 h内出现对侧肢体行动障碍,但未见明显病理改变. 结论:白芨微粒可以作为栓塞剂建立大鼠脑缺血模型.     

核仁素在结节性甲状腺肿与甲状腺乳头状癌中表达及意义的研究

目的:研究核仁素在结节性甲状腺肿及甲状腺乳头状癌中的表达,探讨核仁素在二者疾病发生中的作用及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测36例结节性甲状腺肿及60例甲状腺乳头状癌中核仁素的表达,分析核仁素的表达与性别、年龄、有无转移及病理过程的关系。结果:核仁素在正常甲状腺、结节性甲状腺肿及甲状腺乳头状癌中的总阳性率分别为0、44.4%、100%,差异有统计学意义(P<0.01)。结节性甲状腺肿中核仁素表达于结节期的滤泡上皮细胞核,而胶质贮存期滤泡上皮与结节期的纤维组织不表达。核仁素在伴有转移的乳头状癌组织中表达于细胞核、细胞质与细胞膜,而核仁素在无转移的癌组织中仅表达于细胞核,差异均有统计学意义(P<0.01)。核仁素表达与患者年龄、性别无关(P>0.05)。结论:核仁素参与了结节性甲状腺肿及甲状腺乳头状癌的病理过程,表达随疾病恶化而向核外转移。核仁素可作为判断甲状腺乳头状癌有无转移的客观指标,对指导临床治疗有重要意义。     

血管细胞粘附分子与细胞间粘附分子在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达及意义

目的:探讨血管细胞粘附分子(VCAM-1)与细胞间粘附分子(ICAM-1)在体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)中的表达.方法:采用直接贴壁法获得rMSCs;用免疫细胞化学方法从蛋白水平对VCAM-1和ICAM-1进行定位分析,采用免疫荧光直标法在流式细胞仪上检测VCAM-1、ICAM-1抗原的表达率;RT-PCR法从mRNA水平对VCAM-1和ICAM-1进行半定量分析.结果:免疫细胞化学显色显示, VCAM-1表达弱阳性,而ICAM-1表达强阳性;流式细胞仪检测显示,VCAM-1的表达率14.9%,而ICAM-1的表达率为100%;RT-PCR显示,VCAM-1的mRNA呈微弱表达,ICAM-1的mRNA呈强表达.结论:体外培养下,rMSCs VCAM-1低表达,而ICAM-1高表达,为进一步研究骨髓MSC在细胞替代治疗等临床应用提供参考.     

食管癌相关淋巴结中淋巴细胞趋化因子受体7的表达及意义

目的:观察趋化因子受体7(CCR7)在食管癌引流淋巴结中的表达情况,探究食管癌微环境对淋巴细胞CCR7表达的影响。方法:采用免疫组织化学显色检测食管癌患者癌转移淋巴结与未转移淋巴结中淋巴细胞CCR7的表达,并进行统计学分析。结果:转移淋巴结中淋巴细胞CCR7的表达较未转移淋巴结明显降低。结论:食管癌微环境能够降低淋巴结中淋巴细胞CCR7的表达。