“自上而下”法评定检验项目的测量不确定度

目的 对本核医学实验室电化学发光检验项目的测量不确定度进行评价.方法 依据CNAS技术报告“医学实验室一测量不确定度的评定与表达”,采用“自上而下”的方法,评定偏移和实验室内测量复现性两部分分量引入的不确定度并合成,计算相对扩展不确定度.结果 本核医学实验室电化学发光检验项目的相对扩展不确定度分别是AFP,8.56％;CEA,12.01％;t-PSA,11.87％;f-PSA,12.14％;FER,16.32％;CA125,8.53％;CA15-3,11.89％;CA19-9,9.40％(k=2).结论 核医学实验室对定量项目的测量不确定度进行评定很有必要.     

应用免疫沉淀和蛋白质组学发现多发性骨髓瘤肿瘤相关抗原的研究

目的 利用免疫沉淀和蛋白质组学发现多发性骨髓瘤的肿瘤相关抗原,探索多发性骨髓瘤的发病机制和发现新的诊断标志物。方法 收集8例多发性骨髓瘤患者和8例健康对照者的血清标本并分别混合,用Protein G PLUS-Agarose免疫沉淀试剂分离和纯化多发性骨髓瘤患者和正常人血清中的抗体,并用此抗体与多发性骨髓瘤细胞系U266细胞裂解液混合,形成抗体-抗原复合物,通过1维不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(1D-SDS-PAGE)分离蛋白质,切胶酶解后通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分离并鉴定,用Proteome Discovery软件进行蛋白质数据库检索。结果 MM组较对照组共筛选出14个上调的蛋白,7个下调的蛋白,分别列在表1和表2中。结论 利用免疫沉淀及蛋白质组学筛选出了21个可能与肿瘤自身免疫相关的差异蛋白,其中的α-烯醇化酶、波形蛋白、热休克蛋白90与文献记载有较好的一致性,可作为肿瘤相关抗原的候选蛋白。     

4套hs- CRP检测系统在临床适宜区间内检验结果的可比性研究

目的 对hs-CRP项目在血细胞分析系统和常规生化分析系统共4套检测系统进行可比性验证,为临床医生及患者提供一致性较强的检测数据。方法 依据CNAS-GL047《医学实验室定量检验程序结果可比性验证指南》中的参比系统比对方案和WS/T 407-2012《医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南》提供的考虑检测系统不精密度的比对方案对4套检测系统进行结果可比性验证。结果 依据参比系统比对方案和考虑系统不精密度的比对方案进行的比对试验均通过。结论 对于同一分析物虽然样本类型不同但临床预期用途相同,不同的检验程序在临床适宜区间内是可以进行结果可比性验证的。     

探讨Lys-C胰蛋白酶对于质谱法测定糖化血红蛋白的应用价值

目的 探讨Lys-C胰蛋白酶在国际临床化学组织(International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine,IFCC)推荐的质谱法测定糖化血红蛋白的参考方法中的应用价值.方法 分别用两种特异性蛋白水解酶(GLU-C胞内蛋白酶和Lys-C胰蛋白酶)酶解血红蛋白后,进行SDS-PAGE电泳,衡量蛋白酶解的效率,再将消化后的血红蛋白进行质谱分析,测定标本中糖化血红蛋白的浓度.结果 在相同的电泳条件下,Lys-C胰蛋白酶酶解血红蛋白的效率优于GLU-C;酶解后的血红蛋白标本经质谱方法分析可知,两种蛋白酶用于检测糖化血红蛋白浓度时,可以得到基本一致的结果,由两种方法绘制的标准曲线r2分别为0.929和0.998.结论 在IFCC推荐的糖化血红的蛋白参考测量方法中,一直使用GLU-C胞内蛋白酶酶解血红蛋白,该研究尝试通过Lys-C胰蛋白酶的使用,降低整个实验成本.经结果分析,证实应用这两种特异性的蛋白酶检测糖化血红蛋白时,可以得到基本一致的结果,推荐使用文中所列方法将Lys-C胰蛋白酶作为酶解糖化血红蛋白的特异性蛋白酶.