杆菌-结核杆菌穿梭质粒pMV261/rpsL的构建及其功能鉴定

目的：构建多耐药临床分离株结核杆菌rpsL基因重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒pMV261/rpsL及其功能鉴定。 方法： 制备临床分离株多耐药结核杆菌基因组DNA，PCR扩增该株结核杆菌rpsL基因，构建及鉴定该株结核杆菌rpsL基因重组穿梭质粒PMV261/rpsL，重组穿梭质粒PMV261/rpsL电转化结核杆菌H37Rv株及其鉴定。 结果： 成功地构建了重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒PMV261/rpsL；重组大肠杆菌－结核杆菌穿梭质粒PMV261/rpsL电转化结核杆菌H37Rv株获得成功，并且重组质粒PMV261/rpsL电转化后的结核杆菌H37Rv株对链霉素耐药。 结论： 该临床分离株多耐药结核分支杆菌对链霉素耐药的机制仅仅是由于rpsL基因的93 bp、94 bp处碱基突变所致，耐药性是一个基因突变的结果，是单基因型。     

阴道斜隔综合征31例临床分析

目的:探讨阴道斜隔综合征的病理解剖特点、临床表现、诊断及治疗。方法:回顾分析2009年1月至2014年12月我院收治的31例阴道斜隔综合征患者的临床资料,其中Ⅰ型15例,Ⅱ型15例,Ⅲ型1例,包括临床表现、辅助检查、治疗方法及预后,术后随访1年~6年。结果:Ⅰ型患者就诊年龄为(13.07±1.58)岁,86.7%于初潮半年内就诊,均以痛经为首诊就诊原因;Ⅱ、Ⅲ型患者平均就诊年龄(25.20±7.09)岁,54.5%在性生活后半年内发病,62.5%以阴道流血流液流脓为首诊就诊原因。所有患者均有阴道壁囊肿,Ⅰ型直径大于Ⅱ、Ⅲ型患者;93.5%的患者合并肾脏缺如,以右肾为主。超声诊断率93.5%,磁共振诊断率100%。31例患者均采用阴道斜隔切除术,术后阴道不规则流血流液、腹痛等症状明显缓解或消失,术后均无阴道粘连发生,有生育要求的患者中71.4%成功受孕。结论:不同分型的阴道斜隔综合征患者临床表现各异,肾脏缺如可对阴道斜隔综合征患者起到提示作用,超声及磁共振检查可以帮助明确诊断。阴道斜隔切除术是有效的治疗方法,早期的诊断及治疗可以明显缓解患者症状,预防生殖系统疾病,保护患者生育功能。     

结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的高效表达及免疫原性研究

目的高效表达结核分枝杆菌6kDa早期分泌性抗原靶（6kDa early secretory antigenic target,ESAT6）和培养滤液蛋白10（culture filtrate protein 10,CFP10）的融合蛋白,通过免疫动物,获得CFP10-ESAT6融合蛋白的多克隆抗体。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板,扩增cfp10-esat6融合基因,将其与表达质粒pET32a（＋）构建成重组质粒pET—cfp10-esat6。在大肠杆菌BL21（DE3）中表达带组氨酸标签的融合蛋白,经亲和层析得到纯化CFP10-ESAT6蛋白。用该蛋白免疫成年家兔,获得的抗CFP10-ESAT6融合蛋白的多克隆抗体,作Western—blot和ELISA分析。结果重组质粒pET—cfp10-esat6构建成功,融合蛋白CFP10-ESAT6大量表达,多克隆抗体制备成功（1：10^4）。结论成功构建并表达了CFP10-ESAT6融合蛋白,制备了大量的CFP10-ESAT6融合蛋白的多克隆抗体,为发展新型结核病疫苗和临床血清学检测奠定了实验基础。     

单孔腹腔镜全子宫切除术临床疗效分析

目的探讨单孔腹腔镜下全子宫切除术的安全性及效果。方法回顾性分析我院2017年1月～2018年4月行腹腔镜下全子宫切除术的87例患者的临床资料,按不同腹腔镜入路及阴道断端缝合方法分为三组:A组30例,采用单孔腹腔镜手术经阴道缝合阴道断端;B组20例,采用单孔腹腔镜手术经腹腔镜缝合阴道断端;C组37例,采用传统腹腔镜手术经腹腔镜缝合阴道断端。比较三组患者术中出血量,手术时间,术后疼痛评分,恢复排气时间,首次离床活动时间,引流管留置时间,并发症发生率,术后住院时间及费用等临床指标。结果三组患者手术顺利,术中均无并发症发生,无一例转开腹手术。单孔腹腔镜组均未额外添加操作孔。A组手术时间与C组比较无统计学差异(P0.05),但B组手术时间明显长于C组,差异有统计学意义(P0.05)。A、B组患者术后排气时间、首次离床活动时间明显早于C组,术后48 h内各时点VAS评分低于C组,差异均有统计学意义(P0.05),但术中出血量、引流管留置时间、住院时间及住院费用与C组比较均无统计学差异(P0.05)。结论单孔腹腔镜全子宫切除术具有术后疼痛轻、恢复快、美观等优势,是一种安全有效的手术方法,值得临床推广应用。阴道断端的缝合可依术者经验灵活选择。     

结核分枝杆菌cfp10-esat6融合基因重组穿梭质粒的构建及其在BCG中的融合与分泌表达研究

通过SOE法（重叠延伸，Gene splicing by overlap extension），扩增cfp10-esat6融合基因，与穿梭整合质粒pMV361构建成重组质粒。另将BCGα抗原（α-Ag）信号肽序列与上述重组质粒构建成另一重组质粒。将两种重组质粒分别导入BCG菌构建融合型重组卡介苗和分泌型重组卡介苗，热诱导后分析其表达产物。本研究成功构建并表达了CFP10-ESAT6融合及分泌表达的重组BCG，为发展新型结核病疫苗打下了一定的基础。     

单孔腹腔镜行囊肿剔除术治疗卵巢巨大囊肿的临床分析

目的:探讨应用单孔腹腔镜行囊肿剔除术治疗卵巢巨大囊肿的安全性及可行性。方法:回顾性分析我院2017年6月至2018 年6月收治的卵巢巨大囊肿患者71例（直径≥12 cm）,按手术途径分为研究组34例（应用单孔腹腔镜行囊肿剔除术）和对照组37例（应用传统腹腔镜行囊肿剔除术）。比较两组患者手术时间、术中出血量、术中囊液外漏率、术后24 h疼痛评分、术后排气时间、首次离床时间、术后并发症发生率、术后住院时间及住院费用等临床指标。结果:研究组和对照组患者术中囊液外漏率分别为2.9%和18.9%;在巧囊组患者中,手术时间及术中出血量两组比较差异无统计学意义;在非巧囊组患者中,研究组手术时间及术中出血量较对照组明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组患者均无并发症发生;研究组术后排气时间、首次离床时间明显早于对照组,且术后24 h疼痛评分低,术后住院时间短,住院费用低,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:在严格选择病例的前提条件下,单孔腹腔镜治疗卵巢巨大囊肿能减少囊液外漏率,减轻患者术后疼痛,促进肠道功能恢复,缩短住院时间,不增加并发症发生率及住院费用,是安全有效的。     

结核杆菌Ag85A DNA疫苗在小鼠体内的免疫效应比较

目的探索增强结核杆菌DNA疫苗有效性的新方法，为研制并开发新一代高效结核杆菌DNA疫苗奠定基础。方法分别构建结核杆菌Ag85A抗原基因真核表达质粒及其与小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的真核嵌合表达质粒，体外转染COS7细胞检测两种重组质粒的表达活性后，将其分别用作DNA疫苗给BALB／c小鼠肌内注射，检测小鼠体内特异性体液免疫和细胞免疫应答相关指标，同时进行动物免疫保护性实验，比较分析两种DNA疫苗在小鼠体内的免疫效应。结果结核杆菌Ag85A抗原蛋白基因与小鼠粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子的嵌合DNA疫苗在小鼠体内的免疫原性明显强于Ag85A抗原基因非嵌合DNA疫苗，但两种DNA疫苗的免疫保护性无明显差异。结论粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子与结核杆菌免疫保护性抗原基因嵌合DNA疫苗能显著增强结核病DNA疫苗的免疫原性。     

Cofilin在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜中的表达及意义

目的:探讨子宫内膜异位症(EMT)在位内膜及异位内膜中候选基因cofilin的表达在EMT发生和发展中的作用.方法:选取我院35例经病理证实为EMT的在位内膜及异位内膜[增殖期17例,分泌期18例;轻度组(Ⅰ、Ⅱ期)18例,重度组(Ⅲ、Ⅳ期)17例]为研究组,以同期16例非EMT患者的子宫内膜标本为正常对照组(增殖期7例,分泌期9例).应用原住杂交方法检测cofilin的表达,并对各组内膜中cofilin表达水平进行统计学分析.结果:研究组的在位内膜cofilin表达水平(2.2569±1.0005)明显高于对照组(1.2525±0.7549)(P<0.01);研究组中EMT异位内膜cofilin表达水平(4.2274±1.2091)明显高于EMT在位内膜(2.2569±1.0005)(P<0.01);研究组中EMT重度组在位内膜及异位内膜cofilin表达水平(分别为2.6941±0.9517及4.5965±1.0353)高于轻度组(分别为1.8439±0.8809及3.8789±1.2846)(P<0.01).对照组内膜组织和研究组中在位内膜及异位内膜的分泌期与增殖期cofilin表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:EMT患者在位内膜中cofilin表达水平异常升高在该病的发生、发展中可能起一定作用.     

CBL联合Seminar教学模式在妇产科住院医师规范化培训中的应用

目的 探索CBL联合Seminar的教学模式在妇产科住院医师规范化培训中的应用效果。方法 选取49名中国医科大学附属盛京医院妇产科轮转的住院医师规范化培训学员作为研究对象,其中研究组24人,采用CBL联合Seminar的教学模式;对照组25人,采用传统教学方法。结果 研究组的基础理论知识成绩、病例讨论成绩、问诊成绩均显著高于对照组（P<0.05）;教学满意度问卷调查结果显示,研究组的满意度均高于对照组（P<0.05）。结论 CBL联合Seminar教学模式能够明显提升妇产科住院医师规范化培训教学效果,值得进一步推广。