两种脓毒症模型小鼠血清白细胞介素-6与其早期生存率的关系

目的探讨盲肠结扎穿孔( CLP)、腹腔持续置管引流( CASP)脓毒症模型小鼠血清白细胞介素-6(IL-6)与其早期生存率的关系。方法将60只雄性BALB/c小鼠编号,采用数字表法随机分为3组,即假手术组( Sham组)、CLP组、CASP组,各20只。 CLP组小鼠麻醉后,于中下腹正中线做纵行切口,充分暴露并结扎盲肠,用18 G注射器针头在结扎部位远端穿孔并来回贯穿2次,将少量肠内容物挤出,回纳盲肠,缝合腹壁切口。 CASP组术前准备、开腹方式同CLP模型,暴露小鼠升结肠系膜,在其对侧处插入静脉导管,退出针芯,荷包缝合并固定、剪断静脉导管,将游离端放置于腹腔内。用棉签挤压肠管,使少量肠内容物从导管口溢出,以确认导管通畅。 Sham组术前准备、开腹、术后处理同CLP组,不行盲肠结扎、穿孔。观察各组小鼠术后12、24、36、48、60、72 h的生存率。术后6 h采集各组小鼠尾静脉血,采用 ELISA 检测血清 IL-6,比较此时间点3组存活小鼠间 IL-6水平以及CLP组、CASP组的存活和死亡小鼠间IL-6水平。结果 Sham组、CLP组和CASP组术后72 h生存率分别是100.0%(20/20)、45.0%(9/20)和10.0%(2/20),3组间总体比较差异有统计学意义(字2=32.970,P<0.01),两两比较3组间差异均有统计学意义(P值均<0.05);3组小鼠生存时间曲线经Log-rank检验,差异有统计学意义(字2=34.030,P<0.05)。术后6 h,Sham组、CLP组、CASP组存活小鼠血清 IL-6水平分别是(36.62依10.30) ng/L、(2443.47依970.50) ng/L、(4057.93依827.41)ng/L,差异均有统计学意义(Hc=29.270,P<0.01);CLP组和CASP组各组内存活小鼠血清IL-6水平平均分别为(1348.80依276.25) ng/L、2100.00 ng/L,明显低于死亡小鼠的(3157.29依330.94)ng/L、(4275.48依512.71)ng/L,CLP组差异有统计学意义(t=13.071,P<0.01)。结论两种脓毒症模型小鼠的转归都有一定的病死率,较好地模拟了脓毒症的病理生理过程,CLP模型侧重于模拟局限性腹腔脓肿,CASP模型则侧重于模拟弥漫性腹膜炎。 CLP组模型术后6 h血清IL-6水平较低的小鼠,术后72 h生存率较高。     

线上线下混合式教学在整合医学的应用

近年来,山西医科大学成功实施了整合医学课程体系教学改革：以培养卓越医生为导向,整合互联网优质教学资源,以学生为中心,以教师为主体,开展Gigsaw小组讨论、PBL翻转课堂、诊疗情境模拟、前沿学术沙龙等多种教学手段,将知识传授、能力培养和价值塑造融为一体,应用于系统整合医学教学体系中。实践表明,线上线下混合式教学能调动学生学习的积极性,提高学生自主学习能力、解决问题能力和创新思维能力等综合素质。     

局部解剖学实验教学改革初探?

局部解剖学是基础与临床医学相衔接的“桥梁课程”,实验教学能够有效地将理论与实践相结合,强化学生专业基础知识。 PBL和Sandwich教学法是高等医学教育改革的新理念,但在实践过程中也受到课堂空间和学生能力的局限。以局部解剖实验教学中遇到的问题为基础,提出将PBL和Sandwich教学法相结合,以期提高学生学习能力和运用局部解剖学知识解决实际临床问题的能力,为更好地开展PBL和Sandwich教学法相结合的教学模式提供参考。     

脓毒症小鼠死亡高发期腹腔脏器血流动力学观察

目的: 研究脓毒症小鼠死亡高发期腹腔脏器血流动力学的变化。方法: 应用高分辨小动物超声成像系统对正常雄性昆明小鼠先行心脏收缩功能和血流动力学指标的超声检测(0 h)后,行盲肠结扎穿孔术(CLP)。术后分5 个时点(12 h、24 h、36 h、48 h、60 h) 对小鼠进行相应超声指标检查。每只小鼠均进行编号,以便对小鼠进行连续性的观测,7 d仍存活的小鼠视为存活动物。结果: CLP小鼠在脓毒症死亡高发期心输出量(CO)大致保持在正常水平或高动力学状态。左心收缩功能出现明显的代偿性改变。腹主动脉血流量的变化表现为先升高后降低,其阻力指数(RI)和搏动指数(PI)从24 h 开始出现明显升高。右侧肾动脉的血流量从12 h开始便出现明显的下降,直到60 h仍明显低于正常,其RI和PI变化不明显。门静脉血流量12 h明显升高,24 h明显下降,其后血流量与0 h相比未见显著差异。充血指数从12 h即明显升高,其后维持在高于正常的水平。结论: 脓毒症小鼠腹腔各脏器在死亡高发期发生血流动力学的特征性变化。研究这些变化有助于阐明脓毒症的发病机制。     

脓毒症小鼠死亡高发期心功能变化的动态观察

目的:研究脓毒症小鼠死亡高发期心功能的动态变化。方法:应用高分辨小动物超声成像系统对正常雄性昆明小鼠先行超声心动图检查(0h)后行盲肠结扎穿孔术,术后分5个时点(12h,24h,36h,48h,168h)对小鼠进行超声心动图检查,168h(7d)仍存活的小鼠视为存活动物,每只小鼠均进行编号,确保对其进行连续观察。结果:小鼠在盲肠结扎穿孔术早期即出现回心血量显著减少,左室舒张末期容积在CLP术后24h达最低点,较术前下降了46%。小鼠在脓毒症的刺激下心脏功能出现明显的代偿性改变,尤其以收缩功能最强,舒张功能的代偿弱于收缩功能,CLP术后24h,射血分数和短轴缩短率较术前分别增加了27%和39%,E/A比值和E峰减速时间较术前减少了30%和25%。结论:强大的心脏代偿功能是脓毒症小鼠得以存活的重要原因之一。重视心脏代偿功能尤其是舒张功能的保护对提高生存率有重要意义。     

NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白

 目的：寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列（leucine-rich repeat, LRR）结构域相互作用的蛋白质分子。方法：克隆NALP3富含亮氨酸重复序列（NALP3-LRR）结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母双杂交载体,对人胚肺cDNA文库进行杂交筛选,经酵母回交实验验证蛋白质在酵母细胞内的相互作用并对阳性克隆的DNA进行序列测定和生物信息学分析。将筛选到的阳性克隆进一步用免疫共沉淀实验验证NALP3-LRR结构域与阳性蛋白之间相互作用的可靠性。结果：成功克隆NALP3-LRR结构域的DNA序列并经测序检验正确。用酵母双杂交技术对人胚肺cDNA文库进行酵母杂交筛选共获得4个阳性克隆。免疫共沉淀实验证实能与NALP3-LRR结构域发生相互作用的阳性蛋白是人细胞周期蛋白H和禽传染性支气管炎病毒株Cal99的ORF1a。结论：NALP3的富含亮氨酸重复序列结构域能与人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白发生相互作用。     

模拟诊疗模式在局部解剖学实习教学中的应用

为引导学生实现解剖学基础理论知识向实践操作能力的转化,从课前准备、课堂教学和课程考核及课后反馈三方面设计局部解剖学实习教学。以局部解剖学的腹部章节为例,通过对急性阑尾炎进行小组病例讨论及模拟阑尾切除术,强化学生对解剖学基础知识的掌握及应用,提升学生的临床思维能力和实践操作能力。