兔外周血间充质干细胞的体外分离培养及诱导成骨

背景：研究证明外周血中存在间充质干细胞,但含量极少。 目的：拟从兔外周血中提取间充质干细胞,并诱导其向成骨细胞分化。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2008-06/12在山东省立医院中心实验室完成。 材料：新西兰大白兔6只,购自山东省农科院。α-MEM培养基、L-DMEM培养基为Hyclone公司产品。 方法：每隔2 d从兔背部不同部位切去3 cm×3 cm的全层皮肤(保留背部肌层),所切皮肤做原位移植后包扎,每只兔连续创伤4次。分别于创伤前及末次创伤1周后从股静脉取外周血,采用密度梯度离心法获取间充质干细胞,设立2组,分别加入含体积分数为10%胎牛血清的α-MEM培养基或L-DMEM培养基。细胞传至第2代以1×105/cm2密度接种于12孔板,加入含成骨诱导剂的H-DMEM培养液进行成骨诱导。 主要观察指标：创伤前后细胞形态观察,成纤维样细胞集落形成率,成骨诱导效果。 结果：创伤前所获得的细胞首次换液后,未见有梭形细胞贴壁;创伤后所获得的细胞接种24 h即可见有短梭形及多角形细胞贴壁,五六天后出现细胞集落。与L-DMEM培养基组比较,α-MEM培养基组外周血成纤维样细胞集落形成率明显升高 (P < 0.05)。外周血间充质干细胞成骨诱导后,呈梭形、三角形或多角形,有突起,可见两三个核仁和细胞分裂相,增殖速度缓慢,诱导7 d后碱性磷酸酶阳性率达80%以上,诱导21 d后茜素红染色形成钙结节。 结论：皮肤损伤刺激后可成功从兔外周血中获取间充质干细胞,且具备成骨分化特性,α-MEM培养基较L-DMEM培养基更适合外周血间充质干细胞的体外生长。     

负压封闭引流技术治疗小儿大腿鞭炮爆炸伤一例

爆炸伤指由于爆炸形成的人体损伤,分化学性爆炸和物理性爆炸两类。最近笔者利用负压封闭引流手术(vaccum sealing drainage,VSD)成功治疗小儿鞭炮爆炸伤患者1例,效果良好,现报道如下。1资料和方法1.1临床资料:患儿,男,8岁,因"双大腿、阴茎鞭炮炸伤10h"     

倍频Nd:YAG激光治疗酒渣鼻疗效观察

目的：研究激光治疗酒渣鼻的临床疗效。和倍频Ｎｄ：ＹＡＧ（ＶＰＷ５３２ｎｍ）激光治疗酒渣鼻,结果：此方法治疗酒渣鼻治愈率８０％。结论：倍频Ｎｄ：ＹＡＧ（ＶＰＷ５３２ｎｍ）激光是治疗酒渣鼻的有效方法之一。     

脱细胞基质软骨支架的制备

背景：脱细胞基质材料去除了天然材料中的细胞成分,保留了基质成分,有效降低了天然材料的免疫原性,同时能够保持材料的机械强度。 目的：拟利用洗脱方法去除兔肋软骨中的细胞基质,制备天然生物支架材料。 方法：取新西兰大白兔肋软骨,清除周围组织后随机分组处理,以未经处理的肋软骨作为正常对照组;48 h处理组以去污剂-酶化学消化48 h;96 h处理组以去污剂-酶化学消化96 h,3组均通过苏木精-伊红染色及电镜观察脱细胞效果。同时收集诱导第7天的兔骨髓间充质干细胞3×109 L-1,与同种异体肋软骨脱细胞基质体外复合培养,于第3,7天取复合物行电镜观察细胞在脱细胞基质表面的黏附生长情况。 结果与结论：新鲜肋软骨标本每个软骨陷窝内均有排列紧密的二三个软骨细胞,去污剂-酶化学消化后软骨陷窝内的细胞逐渐脱失,至消化处理96 h后,软骨陷窝内的细胞完全脱失。共培养第3天时,脱细胞基质表面有大量骨髓间充质干细胞分布,细胞为多角形,有伪足伸出,锚定在基质表面,部分区域可见细胞在基质表面增殖分裂;第7天时,脱细胞基质表面大部分均为细胞覆盖,细胞呈扁平状,有多个足突充分伸展,细胞之间互相连接,分泌大量细胞外基质沉积在基质表面,呈冰霜样改变,表明制备的脱细胞基质具有良好的细胞相容性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

兔肋软骨脱细胞基质的制备

背景:研究表明新西兰兔软骨组织可作为组织工程支架材料,中关节软骨及耳软骨的脱细胞基质的研究较多,采用肋软骨作为组织工程软骨支架的研究较少.目的:制备新西兰兔肋软骨脱细胞基质,讨天然软骨支架作为组织工程支架的可行性.方法:用联合去垢剂-酶法获得软骨支架,据脱细胞过程中Triton X-100第2次处理时间0,4,8,6 h分为4组.脱细胞完毕后各组支架固定行扫描电镜采集图像观察计算支架孔隙率、孔径长度,对支架进行苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,将脱细胞支架植入异体新西兰兔皮下观察其相容性.结果与结论:兔肋软骨脱细胞基质呈乳白色,小均一,色示支架结构完整,保存大量酸性黏多糖及Ⅱ型胶原成分,描电镜观察经一定时间的脱细胞处理后可得到结构完整,隙均匀的天然软骨支架,孔隙率为(61.31±8.45) %;孔径长度为(32.80±5.15) μm,合正态性分布,组脱细胞支架植入异体新西兰兔皮下7 d后生物相容性良好,围软组织无明显充血、化脓等炎症排斥反应出现.结果显示,肋软骨脱细胞支架具有良好的基质组成,较完整、均匀的孔隙结构及孔径分布,作为组织工程支架材料.     

兔肋软骨脱细胞基质的制备

背景：研究表明新西兰兔软骨组织可作为组织工程支架材料,其中关节软骨及耳软骨的脱细胞基质的研究较多,但采用肋软骨作为组织工程软骨支架的研究较少。 目的：制备新西兰兔肋软骨脱细胞基质,探讨天然软骨支架作为组织工程支架的可行性。 方法：用联合去垢剂-酶法获得软骨支架,根据脱细胞过程中Triton X-100第2次处理时间0,24,48,96 h分为4组。脱细胞完毕后各组支架固定行扫描电镜采集图像观察计算支架孔隙率、孔径长度,并对支架进行苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,并将脱细胞支架植入异体新西兰兔皮下观察其相容性。 结果与结论：兔肋软骨脱细胞基质呈乳白色,大小均一,染色示支架结构完整,仍保存大量酸性黏多糖及Ⅱ型胶原成分,扫描电镜观察经一定时间的脱细胞处理后可得到结构完整,孔隙均匀的天然软骨支架,其孔隙率为(61.31±8.45) %;孔径长度为(32.80±5.15) μm,符合正态性分布,各组脱细胞支架植入异体新西兰兔皮下7 d后生物相容性良好,周围软组织无明显充血、化脓等炎症排斥反应出现。结果显示,兔肋软骨脱细胞支架具有良好的基质组成,有较完整、均匀的孔隙结构及孔径分布,可作为组织工程支架材料。     

异体及镶嵌自体皮治疗重度腋窝瘢痕挛缩4例

特重烧伤病人常并发各功能部位严重瘢痕挛缩畸形,尤以腋窝为甚;又因自体皮皮源极度缺乏,给后期整形带来很大困难。1981年以来,我们应用异体皮镶嵌自体皮手术方法治疗特重烧伤重度腋窝瘢痕挛缩畸形4例,取得较满意效果。     

Versapulse-c多波长激光治疗色素性疾病疗效观察

1998年 7月至 2 0 0 1年 9月 ,我院用 Versapulse- c多波长激光机治疗皮肤色素性疾病 2 5 3 4例 ,取得较好疗效 ,现报告如下。资料与方法 :本文 2 5 3 4例中 ,男 10 3 7例 ,女 14 97例 ;年龄最大 68岁 ,最小 1个月。太田痣 10 0 6例 ,色素痣 2 18例 ,色素沉着 10 1例 ,咖啡斑 4     

烧伤合并吸入性损伤救治探讨

一般资料1990年～1994年,我院共收治烧伤病人642例,其中合并吸入性损伤者49例,发病率为7.7%,比我院1984年前吸入性损伤发病率(6.5%)升高了1.2%。49例中,男性35例,女性12例。年龄最大63岁,最小8个月。损伤原因(附表)多为在密闭的室内或车内因火焰、烟雾所致。本组大部伴有严重的体表烧伤,死亡18例,死亡率为38.6%,较我院1984年前(65.7%)降低了