免疫-PCR法检测儿童尿中生长激素水平

目的 :建立超灵敏度的免疫 PCR法检测尿中生长激素的水平。方法 :在经戊二醛处理的PCR管中完成双抗夹心酶免疫反应 ,通过PCR扩增连接在抗原 抗体复合物上的DNA分子 ,琼脂糖电泳及扫描判断结果。结果 :处理后的PCR管完全能够进行免疫反应 ,其灵敏度可达 0 1pg ml左右。琼脂糖电泳及扫描结果表明 ,30例正常青春发育期前儿童与 1 0例经常规生长激素激发试验诊断为生长激素缺乏 (growthhormone deficient,GHD)的儿童 ,1 2h夜尿生长激素 (GH)水平有明显差异。结论 :此法的敏感度比酶标法高 1 0 3 ～ 1 0 4倍 ,适于儿童尿中微量GH水平的检测     

聚乙二醇化天花粉蛋白注射液中天花粉蛋白的HPLC测定

建立了HPLC法检测聚乙二醇化天花粉蛋白注射液中天花粉蛋白的含量。采用硅胶基TSK-G3000SW凝胶柱，0．02mol／L磷酸二氢钠溶液-0．15mol／L氯化钠溶液-95％乙醇（45：45：10）为流动相，检测波长222nm。天花粉蛋白在5～50μg／ml范围内线性关系良好。平均回收率为100．0％，RSD为1．8％。     

免疫—PCR法检测儿童中生长激素水平

目的：建立超灵敏度的免疫－PCR法检测尿中生长激素的水平。方法：在经戊二醛处理的PCR管中完成双抗炎心酶免疫反应，通过PCR扩增加接在抗原－抗体复合物上的DNA分子，琼脂糖电泳及扫描判断结果。结果：处理后的PCR管完全能够进行免疫反应，其灵敏度可达0．1pg/ml左右。琼脂糖电泳及扫描结果表明，30例正常青春发育期前儿童与10例经常规生长激素激发试验诊断为生长激素缺乏（growth hormone-deficient,GHD）的儿童，12h夜尿生长激素（GH）水平有明显差异。结论：此法的敏感度比酶标法高10^3-10^4倍，适于儿童尿中微量GH水平的检测。     

单克隆抗体亲和层析法纯化Namalva细胞干扰素

采用自行研制的α干扰素单克隆抗体亲和层析胶3D9进行了Namalva细胞干扰素纯化的初步研究.结果表明α干扰素纯化活性回收率达96%,比活性达1×108IU/mg,一次亲和层析纯化倍数4.4×104.电泳及Westem blot结果显示相对分子质量在2.1×103.     

蛋白质芯片技术的分类、研究与应用进展

随着人类基因组测序的完成，研究不同细胞或组织表达的全部蛋白质数据库的构建与细胞在不同状态的蛋白质表达差异已成为研究热点，标志着蛋白质组学1日寸代的到来。蛋白质芯片技术的出现为我们提供了一种比传统的凝胶电泳、Westem blot和ELISA更为方便和快速的研究蛋白质的方法。本文主要从蛋白质芯片技术的分类、研究与应用进展方面做一简要综述。     

应用组织芯片技术研究CA125和EPCAM联合检测卵巢癌的价值

目的：构建高通量的组织芯片，评价CA125、EPCAM联合和单一检测对卵巢癌诊断的价值，探讨免疫荧光染色及激光非共聚焦方法扫描组织芯片的可行性。方法：制备卵巢组织芯片，含82例样本，其中卵巢上皮性癌52例，正常卵巢组织30例。用免疫组织化学法检测CA125和EPCAM的表达，四格表法统计出四项诊断指标值。结果：联合CA125和EP-CAM，诊断卵巢癌的特异性由86．67％上升到93．33％，阳性预测值则升至96．97％。结论：免疫荧光技术具有特异性强、敏感性高、速度快等特点，用于组织芯片染色是可行的。CA125和EPCAM的联合检测可提高特异性和阳性预测值，对卵巢癌的诊断有较高价值。     

三种α-干扰素亚型结构与功能的研究

目的 利用自制的6株单克隆抗体对α2a-干扰素、α2b-干扰素和α1b-干扰素的结构与功能进行分析。方法 采用细胞ELISA法、抗增殖活性和抗病毒活性等试验。结果 对干扰素抗病毒活性有影响的单克隆抗体对干扰素抗增殖活性也有影响，而对干扰素抗增殖活性有影响的，不一定对干扰素抗病毒活性有影响。结论 干扰素表面细胞受体结合位点与单克隆抗体结合位点是分开的。干扰素的抗病毒活性位点也是它的抗增殖活性位点，而干扰素的抗增殖活性作用的发挥可能还有其它位点的参与；单克隆抗体的中和活性不是通过阻断干扰素分子与细胞表面受体结合造成的。     

三种α干扰素亚型单抗的特性鉴定

采用中和活性法、免疫印迹法 ,通过α1b、α2b、α2a干扰素与自制的 6株单抗反应的结果差异 ,对 3种干扰素加以鉴别。中和活性结果表明 ,AK1单抗只与IFN α1b有中和活性 ,AK2单抗只与IFN α2有中和活性 ,而AK4单抗与IFN α1b和IFN α2b皆有中和活性。免疫印迹结果表明 ,AK1单抗只与IFN α1b有印迹反应 ,AK2与IFN α2有印迹反应 ,而AK4单抗与IFN α1b和IFN α2b皆有印迹反应 ,与IFN 2a无印迹反应。AK1或AK2能够鉴别IFN α1b与IFN α2 ,AK4能够鉴别IFN α2a与IFN α2b。