用于治疗难复位性寰枢椎脱位的新型经口前路寰枢椎侧块融合器的生物力学研究

目的　比较新型寰枢椎侧块融合器与传统内固定方式（TARP＋髂骨块内固定技术,后路椎弓根钉棒固定技术）的生物力学差异。 方法　收集40例TARP术后病人的CT扫描数据进行测量并设计新型融合器。挑选6具新鲜上颈椎标本。分别进行完整状态,失稳状态及进行3种内固定方式[（TARP+融合器（A1）;TARP+髂骨块（A2）;后路椎弓根钉棒技术（B）]处理。再测量不同状态下标本的屈伸,侧屈,旋转6组动作的活动范围（ROM）并进行统计学分析。 结果　新型融合器有三种型号：13/12/7,12/11/7,11/10/7（长／宽／高）;矢状面角设计为：16°/18°/20°。生物力学数据分析显示：Cage组（A1）与髂骨组（A2）在6个方向的活动度差异无统计学差异（P>0.05）;在屈伸及旋转活动中,TARP固定组（A1、A2）与后路固定组（B）不存在显著差异（P>0.05）;在侧屈活动中,TARP固定组（A1、A2）与后路固定组（B）存在显著差异（P<0.05）。 结论　配合TARP技术使用的新型融合器与TARP＋髂骨块的生物力学稳定性相仿,在侧屈方向优于寰枢椎后路椎弓根螺钉技术。且融合器相对于髂骨块而言,理论上具有以下优势：①简化手术步骤;②避免取髂骨相关并发症。     

黄精多糖调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化

BACKGROUND: Bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) have the ability of multi-directional differentiation. Polygonatum sibiricum polysaccharide can promote osteogenetic differentiation of mouse BMSCs by activating Wnt/β-catenin signaling pathway, which is expected to become a new drug for the treatment of osteoporosis.     

HPLC法同时测定五倍子发酵百药煎中没食子酸及鞣花酸含量

目的:建立同时测定五倍子发酵百药煎中抗氧化活性成分没食子酸和鞣花酸含量的方法,并对不同批次五倍子发酵百药煎中的含量进行比较。方法:反相高效液相色谱法,Waters Symmmetry ShieldTMRP18(4.6×250 mm,5μm)C_(18)色谱柱;流动相:乙腈-0.1%三氟乙酸水,梯度洗脱;流速1.0 m L·min~(-1);检测波长254 nm;柱温35℃。结果:五倍子没食子酸和鞣花酸含量分别为3.94%,0.25%;发酵成百药煎含量增加,分别为14.20%,0.26%。结论:所建方法操作简便、准确、重复性好,适用于同时测定五倍子发酵百药煎中没食子酸和鞣花酸的含量,含量测定结果为百药煎的药用研究和产品的开发提供了依据。     

人中黄炮制前后6种化学成分的含量变化及其质量评价

目的:建立同时测定人中黄中甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸、甘草查尔酮A及甘草次酸6种化学成分含量的方法,比较甘草转化成人中黄前后三萜类和黄酮类成分的变化情况,评价人中黄样品的质量,为建立其科学制备方法提供参考。方法:采用HPLC,流动相乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,采集时间100 min,流速1 m L·min~(-1),柱温30℃,检测波长237 nm。采用聚类分析、主成分分析和G检验3种方法进行分析。结果:12批市售人中黄样品中甘草苷,甘草素,异甘草素,甘草查尔酮A,甘草酸和甘草次酸的质量分数分别为0.04~0.23,0.25~0.66,0.17~0.37,0.33~3.42,1.54~15.21,0.03~0.95 mg·g~(-1)。甘草中这6种成分的平均质量分数分别为1.64,0.32,0.17,0.50,22.46,0 mg·g~(-1)。相比甘草,市售人中黄中甘草苷含量下降了98.17%,甘草素升高了40.63%,异甘草素升高了17.65%,甘草酸下降了76.80%,甘草查尔酮A升高了68.00%。甘草与人中黄具有本质差别,不同方法制备的人中黄及12批市售样品间均具有一定差异。结论:该方法稳定可行、重复性好。当前市面流通的人中黄样品质量参差不齐、差异明显,可能是由于人中黄的制备工艺存在差异或原料甘草品种不同所致,且在某种程度上氨化环境对于人中黄的形成具有积极作用。     

地黄炮制过程中异毛蕊花糖苷含量的动态变化

目的:建立HPLC同时测定地黄中毛蕊花糖苷及异毛蕊花糖苷含量的方法,比较鲜地黄及其炮制品中异毛蕊花糖苷的含量变化情况。方法:采用Waters-Symmetry ShieldTMRP18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%乙酸(18∶82),流速1 m L·min-1,检测波长334 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果:在鲜地黄中暂未检测到异毛蕊花糖苷,而鲜地黄通过一定温度及时间的加工炮制后可产生异毛蕊花糖苷。清蒸不同时间的地黄样品中,毛蕊花糖苷及异毛蕊花糖苷含量变化属于一个动态变化过程,且蒸制时间对地黄中异毛蕊花糖苷含量影响较大;鲜地黄在一定温度下烘制可产生异毛蕊花糖苷成分,但烘制不同时间段,其含量变化不明显。毛蕊花糖苷与异毛蕊花糖苷在一定条件下可以相互转化。结论:地黄中异毛蕊花糖苷的产生部分由毛蕊花糖苷转化而来,可考虑将异毛蕊花糖苷也列为熟地黄的质量控制指标性成分之一。     

小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α－玉米赤霉醇对 PⅠNP 和 BMP －2表达的影响

目的：探讨小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α－玉米赤霉醇（α－ZAL ）对Ⅰ型前胶原 N 端前肽（PⅠNP）和骨形态发生蛋白－2（BMP －2）表达的影响。方法采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞，取第3代细胞分为空白诱导组、阳性诱导组及高、中、低浓度α－ZAL 诱导组。空白诱导组仅加入成骨条件培养基，阳性诱导组加入等量成骨条件培养基及雌二醇，高、中、低浓度α－ZAL 诱导组分别加入成骨条件培养基及梯度浓度（10－5、10－6、10－7 mol ／L）的α－ZAL。采用 ELISΑ法测定 PⅠNP 和 BMP －2的表达量。结果小鼠骨髓间充质干细胞原代培养呈长梭形，有接触抑制现象，诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状，细胞生长密集时可重叠生长。与空白诱导组比较，各组 PⅠNP 表达量均明显升高（P ＜0．01），阳性诱导组及低、中浓度α－ZAL 诱导组 BMP －2表达量均明显升高（P ＜0．01），高浓度α－ZAL 诱导组 BMP －2表达量明显下降（P ＜0．01）。与阳性诱导组比较，低浓度α－ZAL 诱导组 PⅠNP 表达量明显升高（P ＜0．01），而中、高浓度α－ZAL诱导组 PⅠNP 表达量明显下降（P ＜0．01），低、中浓度α－ZAL 诱导组 BMP －2表达量均明显升高（P ＜0．01），高浓度α－ZAL 诱导组 BMP －2表达量明显下降（P ＜0．01）。结论α－ZAL 呈剂量相关性促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化，低浓度（10－7 mol ／L）α－ZAL 可显著促进骨髓间充质干细胞骨向分化过程中 PⅠNP 和BMP －2的表达，随着剂量的升高，促进作用下降。     

封堵术治疗青年偏头痛合并卵圆孔未闭的疗效

目的 分析青年偏头痛患者行卵圆孔未闭（PFO）封堵术后的临床疗效。方法 采用回顾性分析研究,选取2021-01—2022-01于商丘市第一人民医院行PFO封堵术的126例青年偏头痛患者,通过与PFO封堵术前对比,随访观察术后3个月、6个月、12个月的临床疗效指标变化,包括偏头痛发作的频率和持续时间、头痛冲击试验（HIT-6）评分,以及视觉模拟量表（VAS）评分等,对比不同级别PFO患者介入封堵术后的缓解程度。结果 PFO闭合后的随访显示,术后偏头痛的平均每月发作频率、持续时间、HIT-6评分及VAS评分均显著降低（P<0.001）。在3个月的随访中,54例（42.9%）患者的头痛指数降低>60%;12个月随访期间,40例（31.7%）患者偏头痛完全缓解,100例（79.3%）患者的头痛指数降低>60%。结论 封堵术可使大部分合并PFO的青年偏头痛患者头痛症状和生活质量得到一定程度的改善,具有一定的临床指导意义。     

PC12细胞诱导分化成神经元样细胞的培养机制研究

目的：研究适宜PC12细胞的培养方法及其在神经生长因子（NGF）作用下的分化效果.方法：PC12细胞培养于F12K培养基中,传代时直接将细胞吹打下来,并用注射器吹散成单细胞悬液;PC12细胞接种于6孔培养板中,并用含NGF 50μg/L的无血清培养基进行诱导分化5d,倒置显微镜下观察细胞的形态特征,Image J软件进行图像分析.结果：PC12细胞生长状态良好,且经NGF作用5d后,细胞体积显著增大,突起增多增长,细胞分化率达（72.60±3.61）％.结论：本实验中对PC12细胞培养的方法简单易行,适用于PC12细胞的培养;NGF能够诱导PC12细胞分化成神经元样细胞,可为神经退行性疾病的研究奠定基础.     

黄精多糖对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中ALP和BGP表达的影响

目的探讨黄精多糖(PSP)对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨钙素(bone gla protein,BGP)表达的影响。方法取8周龄雄性BALB/C小鼠1只,无菌操作分离小鼠股骨和胫骨,注射器冲出骨髓制成细胞悬液,传代3次后分为7组用于实验。诱导组细胞采用体积分数为0.1双抗、含不同浓度PSP的血清+IMDM培养,非诱导组细胞采用体积分数为0.1双抗血清+IMDM培养。每天在倒置显微镜下观察各组细胞的生长情况及形态变化。在培养第3,5,7,9,11,13天用四唑盐法(MTT)检测细胞的生长情况并绘制细胞生长曲线。在培养第7天、第14天采用ELISΑ酶联免疫吸附法分别测量细胞碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)的表达量。结果①小鼠骨髓间充质干细胞经PSP诱导后呈三角形、多角形、不规则状,可重叠生长。②各组细胞生长曲线总体趋势基本相同,在第7,9,11,13天,非诱导组细胞不再生长,而各PSP诱导组细胞均继续生长。③各不同浓度PSP诱导组均比非诱导组高表达ALP和BGP(P0.01)。结论PSP可显著促小鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化过程中ALP和BGP的表达,且随着浓度的增高该促进作用逐渐增强。