大鼠内侧隔区预损毁对海马迟发性神经元死亡的影响

目的：探讨乙酰胆碱（ACh)对短暂性全脑缺血再灌后海马迟发性神经元死亡（DND）的作用。方法：80只健康雄性Wistar大鼠随机分为5组。I组：手术对照组；Ⅱ组：单纯内侧隔区（MS）损毁组；Ⅲ组：单纯脑缺血再灌注组；Ⅳ组：MS假性损毁脑缺血再灌注组；Ⅴ组：MS预损毁脑缺血再灌注组，动物先行MS损毁，第15d再行血管阻断，使脑缺血20min，并于恢复灌注72h后处死，将脑采用常规石蜡包埋、切片，Nissle、HE和Tunel免疫组化染色，在光镜下观测计数海马的神经元数。结果：（1）DND细胞主要发生在各缺血再灌注组（Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ组）的海马CA1区，其他各区未发现明显变化；（2）V组较Ⅲ，Ⅳ组DNA明显减轻，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：ACh参与短暂性全脑缺血再灌后海马CA1区迟发性神经元损伤过程，MS预损毁能使死亡细胞明显减少。     

伤害性刺激电针后中缝背核生长抑素mRNA的表达及其与5-HT的共存

本实验用原住杂交和免疫组化ABC相结合的双标记技术，观察了大鼠中缝背核（RD）内生长抑素（SOM）fllRNA在正常、伤害性刺激、单纯电针和电针镇痛（EA）下的变化特点。结果发现RD正常情况下有一定SOMmRNA表达，伤害性刺激和单纯电针后SOMmRNANA表达增强，EA后进一步增强。在正常情况下RD内有少量的SOMmRNA与5－HT双标记细胞。与正常组相比，伤害性刺激和单纯针刺后双标细胞增多，EA后更甚。结果提示：（1）SOM可能参与痛觉调杯（2）SOM可能参与EA。（3）RD内SOMmRNA与SNT共存，二者可能协同作用，共同参与EA。     

针刺镇痛与睾酮、双氢睾酮的关系

针麻是个复杂的生理调节过程,其除了神经系统的作用外,还有体液因素的参与。近年来实验证明针刺可提高血浆中亮啡肽,ACTH,肾上腺皮质激素的含量,并且针麻效果与这些体液因素有密切关系。另有资料表明针刺可提高血浆睾酮的含量,关于睾酮水平的改变对针刺镇痛的效果是否有影响,目前尚未见报道,本文试对该问题     

免疫电镜技术在神经递质研究中的应用——包埋前处理方法改进

对免疫电镜技术中包埋前处理方法进行了探讨。对某些实验条件和参数作了适当调整.改进了方法和步骤,有利于应用免疫电镜技术对神经递质定性和定位的研究。     

TMB反应产物稳定方法的改进

辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase HRP)被广泛用于神经束路的追踪,HRP法同免疫细胞化学法相结合可确定投射神经元的递质性质。TMB法是显示HRP的最敏感的方法。但TMB反应产物在pH3.0～4.0     

刺激大鼠海马后PAG、NRM和脊髓背角5-HT的变化

目的:探讨刺激大鼠海马后导水管周围灰质(Periaqueductal central gray matter,PAG)、中缝大核(Nucleusraphes magnus,NRM)和脊髓背角5-HT的变化,分析海马在镇痛中的作用机制。方法:健康成年Wistar大鼠40只,随机分为4组。A组:正常对照组;B组:疼痛组;C组:谷氨酸钠组;D组:生理盐水组。四组动物均于2小时后处死,常规灌注冰冻连续切片,采用SABC免疫组化和计算机图像分析技术,检测PAG、NRM5-HT神经元阳性细胞个数及光密度及脊髓背角5-HT阳性纤维及终未的积分光密度等均值。结果:疼痛刺激后,PAG、NRM、脊髓背角内5-HT水平较正常显著增高(P<0.05),谷氨酸钠组则较疼痛组进一步增加。结论:海马兴奋后,激活内源性镇痛系统,使5-HT大量释放,参与镇痛。     

大鼠脑干一氧化氮合成酶阳性神经元的分布及发育

实验用依赖还原型辅酶Ⅱ的黄递酶酶组织化学方法。研究了一氧化氮合成酶阳性神经元在大鼠脑干的分布及发育。结果；一氧化氮合成酶阳性神经元在各日龄大鼠的分布上没有明显差别。一氧化氮合成酶阳性神经元主要集中在上丘浅灰质层，中脑水管周围灰质背外侧部，中缝背核，被盖背外侧核，中缝大核，三叉神经脊束核等部位。     

大鼠中缝背核三种递质传入纤维的脑干起源-免疫细胞化学和酶组织化学双重标记法

实验用HRP逆行追踪法和免疫细胞化学ABC法,研究了大鼠中缝背核内5-羟色胺、P物质以及亮脑啡肽三种传入纤维的脑干起源。发现中央上核,中缝大核,中脑导水管周围灰质,脚间核和第Ⅳ脑室中央灰质均有数量不等的5-羟色胺、P物质和亮脑啡肽能神经元向中缝背核投射。结果提示:中缝背核接受脑干许多核团不同性质神经元的调控。     

电刺激大鼠背侧海马对脑干部分神经核团生长抑素mRNA表达的影响

目的：探讨电刺激大鼠背侧海马对脑干部分神经核团生长抑素（SOM）mRAN表达的影响，分析海马在痛调制中的作用机制。方法：健康成年Wistar大鼠40只，随机分为4组，A组：正常对照组，不给动物任何处理，B组疼痛刺激组，大鼠右侧后肢足底皮下注射4g/L多聚甲醛200μl，作为疼痛模型，C组：电刺激组，将疼痛模型动力的经腹腔注射20mg/L戊巴比妥钠麻醉后，借助于脑立体定位仪，待大鼠清醒后，按Paxions和Watson大鼠脑图谱，用同心圆电极大于鼠右背侧海马给予方波电刺激，时间为2min，D组：电刺激对照组，操作同电刺激组但不通电，时间为2min，4组动物均于12h后处死，经主动脉灌注，冻冻切片，采用地高辛标记反义RNA探针原位杂交及计算机图像分析技术，分别检测中脑导水管周围类质（PAG），中缝大核（NRM）和外侧网状核（LRM）SOM mRAN阳性神经元细胞数及光密度值。结果：疼痛刺激一，PAG 、NRM、LRN内SOMmRAN表达较正常明显增高（P＜0．01），电刺激组PAG、LRN的SOM mRAN表达较疼痛刺激组进一步增加，NRM内SOM mRAN较疼痛刺激组增加不明显，结论：海马兴奋可引起PAG、LRN神经元SOMmRAN表达增加，因此，SOM可能与脑干PAG和LRN参与镇痛。     

针刺镇痛时下橄榄核Fos样蛋白的表达

以Ｆｏｓ样蛋白作为神经元功能活动的标志，观察了大白鼠下橄榄核在伤豁性刺激和针刺镇痛条件下Ｆｏｓ样蛋白阳性神经元数量的变化。发现伤豁性刺激可引起下橄榄核Ｆｏｓ样蛋白阳性神经元数量显著增加（Ｐ〈０．０１）；而在针刺镇痛条件下，Ｆｏｓ样蛋白阳性神经元的数量又明显减少（Ｐ〈０．０１）。结果提示：下橄榄核可能参与了针刺镇痛机制的调节。