冠状动脉旁路移植术后竞争血流对桥血管血流动力学的影响

目的 研究冠状动脉旁路移植术后,不同程度竞争血流对左侧胸廓内动脉管壁壁面切应力(wall shear stress, WSS)的影响。方法 基于阈值分割方法,通过采用SimVascular软件从CT图像提取并重建左侧胸廓内动脉(left internal mammary artery, LIMA) 左前降支（left anterior descending, LAD）吻合口模型。根据LAD的狭窄程度将竞争血流分为无竞争（100%狭窄）、轻度竞争（50%、75%狭窄）和高度竞争血流（0%、30%狭窄）3组。通过数值模拟方法观察上述情况下吻合口模型的血流动力学表现。结果 随着竞争血流的增加,LIMA桥血管管壁WSS逐渐降低,但是震荡程度逐渐增加。高度竞争血流组LIMA管壁平均WSS（0%狭窄：2.73 Pa,30%狭窄：2.85 Pa）明显低于轻度竞争血流组（50%狭窄：4.77 Pa,75%狭窄：6.01 Pa）和无竞争血流组(100%狭窄：8.64 Pa);而其震荡剪切指数(oscillatory shear index, OSI)（0%狭窄：0.206,30%狭窄：0.085）却明显高于轻度竞争血流组（50%狭窄：0.014,75%狭窄：0.013）和无竞争血流组(100%狭窄：0.006)。结论 当LAD狭窄程度小于50%时,大量的竞争血流会使LIMA管壁WSS明显降低,并且呈剧烈震荡的状态,这种不利的WSS表现会影响LIMA的远期通畅率,并造成手术远期疗效的下降。     

658例乙型肝炎患者HBV多位点耐药基因检测结果分析

目的分析乙型肝炎患者HBV核苷(酸)类似物耐药相关的10个位点的突变情况及其临床意义。方法采用焦磷酸测序法对658例各型乙型肝炎患者行核苷类似物抗乙肝病毒多位点耐药基因检测并分析不同核苷(酸)类似物耐药的突变形式,对常见突变模式者ALT和HBV-DNA水平进行比较。结果 300例发生不同位点变异,变异率为45.59%,其中有明确用药史者202例。拉米夫定耐药突变中以M204V和M204I最常见,前者通常伴随L180M突变,后者常单独出现;阿德福韦酯耐药中以N236T和A181位碱基替换为主;恩替卡韦耐药均伴随拉米夫定和阿德福韦酯耐药变异,以T184位点的碱基替换最为常见;主要变异模式间ALT及HBV-DNA水平均无明显差异。90例未接受过核苷(酸)类似物治疗者亦检出耐药相关突变。结论检测HBV多位点耐药基因相关突变有助于临床及时发现和确认乙型肝炎患者HBV耐药并指导抗病毒治疗。     

乙型肝炎病毒C基因启动子变异检测方法的建立

目的 建立乙型肝炎病毒（HBV）C基因启动子（BCP）变异的限制性片断长度多态性（RFLP）检测方法,更好地了解BCP变异的发生与乙型病毒性肝炎（乙肝）的病情、预后以及治疗的影响。方法 结合引物设计软件Primer Premier5.0,选定保守区域,设计了2对最佳引物,建立了HBV BCP变异检测PCR-RFLP的实验方法。结果 对34例不同乙肝患者进行BCP变异检测发现：肝硬化（LC）组和慢性乙型肝炎（CHB）组中发生变异的例数明显高于无症状感染者（Asl）（χ2值分别为6.39和3.98,P〈0.05）。并且HBeAg（-）组发生变异的例数明显高于HBeAg（＋）组（χ2=4.60,P〈0.05）,结论该方法操作简便、敏感度与特异性高、结果 可靠,并可用于较大范围调查该变异株的流行情况,为临床进一步诊断和治疗提供了科学的依据,同时对人们进一步了解HBVBCP变异的发病机制具有重要意义。     

肝脏疾病时血清谷胱甘肽S—转移酶的测定及其临床意义

谷胱甘肽S-转移酶(EC2、5、1、18Gluta-thione S-transferase,GST)是一组具有多种生理功能的蛋白质,其功能主要与解毒有关,肝脏含量最高,外周血中酶活性变化,在一定程度上能反映肝脏功能和损伤变化。近年来,国内外研究以血清GST作为肝病的诊断指标受到重视。本文就测定方法及在肝脏疾病时的临床意义进行了研究。     

应用丙型肝炎病毒合成肽检测HCV特异性IgM抗体

目的筛选验证捕捉丙型肝炎病毒(HCV)抗体能力最强的合成肽,进一步探讨抗HCV-IgM的效价与HCVRNA含量之间的关系。方法合成HCVCp14、HCVCp9和HCV5-1-1三种肽段,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定乙丙型肝炎和抗HCV阳性者血清抗HCV-IgM。同时测定HCVRNA。结果在39例急性丙型肝炎患者中,抗HCVCp14-IgM的阳性率为89.7%,而HCVCp9-IgM和抗HCV5-1-1-IgM的阳性率分别为48.7%和17.9%。HCVCp14-IgM的效价(A492nm值)>2.0以上者,HCVRNA的平均含量为105.1±3.6copies/μl。结论抗HCVCp14-IgM的检出及效价高低与HCV的复制活跃程度相关。     

乙型肝炎患者血清HBV前C区A83变异株的检测

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区A83点突变与临床关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)对64例乙型肝炎(乙肝)患者HBV前C区基因进行扩增,对PCR产物进行限制性片段长度多态性分析(RFLP),鉴定前C区第83位核苷酸点突变。结果:34例(53.13%)有A83点突变,其中12例(18.75%)为单独变异株感染,22例(34.38%)为变异株与野毒株混合感染。慢性乙型肝炎(CHB)和肝硬化(LC)组高于无症状HBV携带者(ASC)(P<0.05)。抗-HBe( )组的检出率为70.0%,高于HBeAg( )组的25.0%(P<0.01),并且随着HBVDNA含量的增高,其发生变异的可能性越大(P<0.05)。结论:前C区A83点突变的发生可能与机体长期的炎症活动、免疫压力的选择有关。     

定量聚合酶链反应检测乙型肝炎患者血清HBV—DNA及其临床应用

目的：探讨乙型肝炎患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与乙肝标志物和肝损害程度的关系,方法：采用信号引物能量转移定量聚合酶链反应（ＰＣＲ）,检测１９３例各型乙肝患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量。结果：在慢性乙肝患者中,随着临床肝损害程度加重,血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量逐渐下降,血清ＨＢｅＡｇ阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ含量明显高于抗－ＨＢｅ及抗－ＨＢｃ阳性组,而后两组中部分病例ＨＢＶ－ＤＮＡ水平仍很高,血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量     

茵兰益肝颗粒剂体外抑制乙型肝炎病毒复制的实验研究

[目的]验证含有茵兰益肝颗粒剂药效成分的药物血清对转染乙型肝炎病毒基因的人肝癌细胞系2.2.15(HepG2.2.15)细胞分泌乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原的(HBeAg)抑制作用。[方法]组织培养及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。[结果]药物血清第8天对HepG2.2.15细胞半数毒性浓度(TC₅₀)为11.48%,最大药物血清无毒浓度(TC₀)为6.0%。6.0%~3.0%、1.50%、0.75%4种药物血清浓度在HepG2.2.15细胞中第8天对HBsAg的抑制率分别为7.89%~5.8%、1.6%、1.6%,对HBeAg抑制率均为负值。[结论]茵兰益肝颗粒剂对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg有较低的抑制率,对HBeAg无抑制作用。     

Smad4-siRNA真核表达载体的构建与鉴定

目的构建Smad4特异的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Smad4表达在肝纤维化治疗中的意义奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的Smad4基因核苷酸序列,选择设计能转录小发夹结构RNA(Small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与psilencer3.1-H1-hygro质粒载体连接,构建真核表达载体,使用限制性内切酶鉴定及测序鉴定是否为阳性克隆。结果成功构建psilencer3.1-Smad4载体,拟进一步采用RNAi技术观察其对Smad4基因表达的抑制情况,从而研究其在肝纤维化治疗中的作用。结论Smad4-siRNA真核表达载体被成功构建。     

血清基质金属蛋白酶-1、2、3、9在胸部主动脉疾病和急性心肌缺血中的检测及意义

目的 探讨血清基质金属蛋白酶(MMPs)-1、2、3、9在急、慢性胸部主动脉疾病和急性心肌缺血的变化及意义.方法 共80例急性主动脉夹层、慢性主动脉夹层、胸部主动脉瘤、急性心肌缺血患者及正常对照16例,采用ELISA方法检测血清MMP-1、2、3、9.结果与急性主动脉夹层组相比,急性心肌缺血组MMP-3升高,2组比较差异有统计学意义[(19.10±3.11) μg/L与(11.89±1.31) μg/L,P=0.02].与其他组相比,正常对照组MMP-1[(1.30±0.56) μg/L]明显低于急性夹层动脉瘤组[(2.99 ±0.78) μg/L,P=0.03]、慢性夹层动脉瘤组[(3.12 ±0.78) μg/L,P=0.02]、胸主动脉瘤组[(3.01±1.01) μg/L,P=0.03]、急性心肌缺血组[(5.01±0.98)μg/L,P=0.01].MMP-1与年龄增加呈正相关(r =0.38,P＜0.05).在急性主动脉夹层手术的患者,MMP-1、MMP-3和MMP-9含量手术后即刻较手术前升高,而MMP-2减少,差异均有统计学意义(P均＜0.05);术后24h,MMP-1、MMP-2及MMP-9回到术前水平.结论 对于胸主动脉疾病和急性心肌缺血,测定血清MMP含量为简单、快速、有效的临床指标,可在基层卫生中心开展.