利用寡核苷酸芯片鉴定多种肠道致病菌方法的建立与初步应用

目前,临床上对腹泻样本的检测主要依靠传统的细菌学培养及生化鉴定,操作方法繁琐,检测周期较长,而利用分子生物学方法如PCR、探针杂交等及免疫学方法也存在特异性差和灵敏度低等问题[1].     

利用寡核苷酸芯片鉴定多种肠道致病菌方法的建立与初步应用

目前,临床上对腹泻样本的检测主要依靠传统的细菌学培养及生化鉴定,操作方法繁琐,检测周期较长,而利用分子生物学方法如PCR、探针杂交等及免疫学方法也存在特异性差和灵敏度低等问题[1].     

铜绿假单胞菌生物膜致豚鼠下呼吸道感染分析

目的探讨铜绿假单胞菌生物膜致病性。方法 60只豚鼠随机分为生物膜组、浮游菌组和对照组,行气管切开术后分别植入生物膜细菌、浮游态细菌及生理盐水包被的硅胶管,15 d后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)、支气管及肺组织,测量活菌数,分离细菌并测定生物膜形成能力,观察组织形态改变。结果生物膜组豚鼠下呼吸道慢性感染发生率为66.7%,明显高于浮游菌组(P0.01);生物膜组豚鼠支气管及肺组织可见肺泡腔内纤维渗出,间隔炎性细胞浸润,纤毛上皮增生,黏膜下淋巴细胞浸润;生物膜组豚鼠BALF及肺组织中细菌总数分别为(7.45±0.23)×103 cfu/mL和(6.78±0.36)×103 cfu/g,并分离出能够形成生物膜的铜绿假单胞菌。结论铜绿假单胞菌生物膜是下呼吸道慢性感染的高危因素之一。     

思维导图法在病原生物学教学中的尝试与体会

摘要：病原生物学知识点多,内容复杂,不易记忆,且课时有限。本研究试图以教师绘制的思维导图作为学生预习的提纲、课堂笔记的蓝本及课后的复习资料,以提高课堂教学效率,提升学生自主学习及创新能力。     

新型甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体

目的 探讨新型甲型流感病毒(2009H1N1)血凝素(HA)DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体特性.方法 构建2009H1N1或1918甲型流感病毒(1918H1N1)HA蛋白表达质粒2009HA和1918HA,采用25μg或200μg剂量2009HA质粒免疫小鼠,以2009HA或1918HA蛋白为包被抗原,测定小鼠血清中2009HA抗体总量或交叉反应抗体含量,分别用2009H1N1和1918H1N1两种假病毒(pp)测定抗体中和活性.结果 25 μg或200μg的2009HA质粒加强免疫小鼠后,4～16周内两组小鼠血清中2009HA总抗体水平以及对2009H1N1pp的中和抗体滴度相似(P>0.05),都含有与1918HA蛋白交叉反应抗体,对1918H1N1pp的交叉中和抗体滴度相似(P>0.05).结论 小剂量2009HA质粒DNA疫苗能够诱导小鼠产生持久的高水平中和抗体,对于预防新现流感病毒具有潜在应用价值.     

维生素C蔬菜王者--辣椒的“防御机制”

维生素是人体必需的营养素,《生物化学》中维生素的定义如下:人体必需、却又无法合成或者合成数量较少,因此必须从食物中摄取的小分子有机化合物。基于这一点,人体(实际上包括所有动物)所需的维生素便只能来自于食物。所以,人类的祖先跟其他动物一起还在丛林和草原上厮混的时候,就必须解决维生素来源的问题。在所有的维生素里面,维生素C又是首当其冲。     

七氟醚预处理大鼠肾缺血再灌注损伤中NF-κB表达、NOS活性变化及意义

目的探讨七氟醚预处理对肾缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将72只SD雄性大鼠随机分为三组各24只。对照组为假手术组,模型组及七氟醚组制作肾缺血再灌注损伤模型。制模前1 h七氟醚组吸入O2和七氟醚的混合气体,七氟醚浓度维持在2.2%。分别于制模后4、12、24 h测定各组肾组织NOS活性及血清Cr、BUN水平;观察肾组织病理变化,免疫组化法检测肾组织中NF-κB蛋白表达。结果对照组肾组织形态结构正常,NF-κB蛋白几乎不表达,NOS活性未升高。模型组及七氟醚组肾组织均出现结构异常;随再灌注时间延长,NF-κB表达增高、iNOS活性增强,血Cr、BUN升高,但七氟醚组明显轻于模型组。结论七氟醚预处理能减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制NF-κB表达、降低iNOS活性有关。     

七氟醚预处理大鼠肾缺血-再灌注损伤中HSP70的表达及保护机制

目的 观察七氟醚预处理大鼠肾缺血-再灌注损伤模型中HSP70的表达变化,探讨其保护作用机制.方法 72只SD雄性大鼠随机分为对照组(C组)、缺血-再灌注组(I/R组)、七氟醚预处理组(S组),每组各三个时相(4、12、24 h).所有大鼠于实验结束时测定肾组织过氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平及血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平.观察肾组织病理变化,免疫组化法检测大鼠肾组织热休克蛋白70(HSP70)、核转录因子-κB(NF-κB)的表达情况.结果.与C组比较,I/R组和S组HSP70表达均显著增加(P<0.05);与I/R组比较,S组HSP70表达在12 h达到高峰,并且显著高于I/R组;C组NF-κB几乎不表达,I/R组NF-κB表达显著增加(P<0.05),并且随再灌注时间的延长而增加;S组再灌注4、12、24 h NF-κB表达显著低于I/R组(P<0.05).与C组比较,I/R组和S组MDA显著升高而SOD显著降低(P<0.05);与I/R组比较,S组SOD显著升高而MDA显著降低(P<0.05);与C组比较,随再灌注时间的延长,I/R组和S组BUN、Cr均显著升高;与I/R组比较,S组12、24 h BUN、Cr均显著低于I/R组;S组肾损伤的病理变化较I/R组显著减轻.结论.七氟醚预处理能诱导肾缺血-再灌注大鼠模型HSP70的表达增强和提早表达,减弱NF-κB活化,增加肾缺血-再灌注后氧自由基的清除能力,实现对肾缺血-再灌注损伤的保护作用.     

丙型肝炎病毒F蛋白上调肝星形细胞胶原表达

目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)的F蛋白对肝星形细胞生长及胶原蛋白表达的影响.方法 将含有HCVf基因的pcDNA3.1-f质粒或pcDNA3.1空载体分别转染肝星形细胞株LX2,G418筛选后获得稳定转染的细胞,分别命名为LX-f细胞或LX-P细胞,MTT法测定细胞增殖情况,ELISA法检测细胞分泌的Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量.结果 自培养24 h起,LX-f细胞各时间点的增殖率均大于LX-p细胞(P<0.01).培养48 h时,LX-f细胞的Ⅰ型胶原蛋白及Ⅲ型胶原蛋白分泌量分别为(25.89±0.42)ng/ml和(18.21±0.49)ng/ml,明显高于LX-P细胞的(22.65±0.49)ng/ml和(15.29±0.62)ng/ml(P<0.01).结论 HCV的F蛋白能促进肝星形细胞增殖,并上调细胞分泌Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白,诱发肝纤维化.     

利用寡核苷酸芯片鉴定多种肠道致病菌方法的建立与初步应用

目前,临床上对腹泻样本的检测主要依靠传统的细菌学培养及生化鉴定,操作方法繁琐,检测周期较长,而利用分子生物学方法如PCR、探针杂交等及免疫学方法也存在特异性差和灵敏度低等问题[1].