优化差速离心法在血培养报警瓶MALDI-TOF MS细菌鉴定中的应用

目的评价用于血培养报警瓶基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorptionionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)细菌直接鉴定的前处理方法。方法建立优化差速离心法流程。收集首都医科大学附属北京同仁医院2015年10月至12月外周血培养报警标本100例(均为单一菌),以转种培养后菌落MALDI-TOF MS鉴定为金标准,对比差速离心法优化前后、BRUKER SEPSITYPER试剂盒(简称试剂盒法)鉴定结果,评价优化差速离心法的准确率。收集2016年1月至10月外周血及体液培养报警标本516例(经革兰染色确认为细菌),对优化差速离心法进行大样本应用研究。结果优化的差速离心法、试剂盒法及优化前的差速离心法鉴定准确率分别为97%、94%及92%,差异无统计学意义;优化的差速离心法鉴定分值2.0的例数则多于其他两种方法,与优化前相比差异具有统计学意义(χ~2=3.916,P=0.048)。516例样本单一菌486例,混合菌30例。优化的差速离心法鉴定准确率为92.2%(476/516)。外周血及其他体液样本鉴定准确率分别为96.5%(179/289)、86.8%(197/227),差异有统计学意义(χ~2=16.92,P0.01)。单一菌鉴定准确率为97.1%(472/486),其中革兰阳性球菌和阴性杆菌分别为96.9%、99.1%,均明显高于阳性杆菌(55.6%),差异有统计学意义(χ~2=25.329,P0.01;χ~2=48.526,P0.01)。混合菌鉴定准确率为13.3%(4/30)。体液样本混合菌比例为11%(25/227),显著高于外周血[1.7%(5/289),χ~2=20.008,P0.01]。结论优化差速离心法鉴定率高、成本低、易操作,优于试剂盒法,对单一细菌MALDI-TOF MS血培养报警直接鉴定更具临床应用价值。     

60岁以上人群血清甲状腺标志物参考区间调查

目的调查60岁以上表观健康人群血清甲状腺功能五项标志物的生物参考区间。方法按照美国国家临床生化科学院关于甲状腺疾病诊断与监测实验室支持中的筛选要求,筛选出60岁以上的老年人431例(女性210例,男性221例),采用免疫化学发光法测定血清三碘甲状腺原氨酸(TT3)、甲状腺素(TT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)。结果男性TSH和FT4水平中位数分别为1.69(1.14~2.24)mIU/L和12.22(10.92~13.47)pmol/L,女性TSH和FT4水平中位数分别为2.28(1.54~3.02)mIU/L和11.48(10.29~12.65)pmol/L,男女组间差异有统计学意义(P<0.05)。60~69岁年龄组TT3和FT3水平分别为1.63±0.33nmol/L和4.80±0.63pmol/L,≥70岁以上年龄组TT3和FT3水平分别为1.50±0.36nmol/L和4.52±0.62pmol/L,年龄组间差异有统计学意义(P<0.05)。60岁以上人群血清甲状腺激素五项参考区间为:TT3 1.01~2.37nmol/L,TT4 108.01~168.56nmol/L,FT3 3.51~5.88pmol/L,FT4 8.80~16.63pmol/L,TSH 0.43~6.05mIU/L。结论在60岁以上人群中,血清甲状腺功能标志物存在年龄和性别差异,因此应按年龄和性别建立不同参考区间。     

分枝杆菌液体培养MALDI-TOF MS快速直接鉴定法的建立与评价

目的建立并评价分枝杆菌液体培养基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)直接鉴定技术。方法收集2014年6月至2016年5月首都医科大学附属北京同仁医院1 466例呼吸科住院患者痰标本,进行BactecTMMGITTM960分枝杆菌快速液体培养(简称液体培养),以其中报警并经萋-尼抗酸染色确认为抗酸杆菌的105例(无重复病例)为研究对象,对比本实验室自行设计并改良的"同仁"分枝杆菌液体培养直接鉴定法(培养液经特殊前处理后直接进行MALDI-TOF MS鉴定)及传统鉴定法(培养液转种于L-J固体培养基,得到菌落后再进行MALDI-TOF MS鉴定),并通过16S rRNA基因及16S~23S rRNA基因间隔区测序验证。结果以基因测序鉴定为金标准,液体培养直接鉴定与传统鉴定法结果一致率为100%;二者鉴定至属的准确率均为100%(105/105),鉴定至种的准确率均为99.05%(104/105)。液体培养后直接鉴定与传统鉴定法MALDI-TOF MS鉴定分值≥2.000分的比例差异无统计学意义(χ~2=2.952,P=0.086)。4例分值1.700分的菌株谱图杂峰较多而有效峰较少。结论本实验室自行设计的"同仁"分枝杆菌液体培养MALDI-TOF MS直接鉴定法鉴定结果准确,缩短了分枝杆菌培养和鉴定的时间,且可保证生物安全,对分枝杆菌感染的快速诊断和及时治疗意义重大,适用于我国各级临床实验室。     

丙型肝炎病毒抗体阳性患者HCV- RNA与ALT结果分析

目的 研究丙型肝炎病毒抗体阳性患者丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测结果分布特点及相关性。方法 收集北京同仁医院2018年1月至2021年6月HCV-Ab阳性患者HCV-Ab、HCV-RNA、ALT检测数据,运用统计学方法分析三者数据分布特点及相关性,以及HCV-RNA阳性患者与HCV-RNA阴性患者HCV-Ab检测值与ALT水平分布特点。结果 患者个体HCV-Ab检测值、HCV-RNA与ALT水平三者之间不存在明显的相关性,但将三者实验数据按检测值的高低、阴阳性以及异常率进行分组仍然存在一定的规律。HCV-RNA阳性患者的HCV-Ab检测值高于阴性患者,预测HCV-RNA阳性的最佳HCV-Ab阈值为10.34(S/CO)。患者ALT异常率、HCV-RNA阳性率随HCV-Ab检测值分组的升高有升高的趋势。ALT异常率与患者HCV-RNA阴阳性有关,但与HCV-RNA水平分组无关。结论 患者HCV-Ab检测值对预测HCV-RNA阴阳性有较大的应用价值,HCV-Ab检测值升高和HCV-RNA阳性的患者发生ALT异常的可能...     

2016与2019年成人致泻性大肠埃希菌食源性腹泻临床流行病学特征研究

目的:研究2016与2019年成人致泻性大肠埃希菌（DEC）食源性腹泻临床特征与耐药性,了解北京市强化食品卫生安全措施前后DEC流行病学变迁。方法:分别收集2016和2019年就诊于北京同仁医院肠道门诊食源性成人腹泻患者1 926例和1 482例,共计3 408例。患者信息录入“肠道预警系统”,便标本分离培养,菌落行基...