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将本室改造的毕赤酵母接入100ml BMGY培养基培养24h,离心收集酵母细胞并重悬于100ml BMMY培养基,每12小时加入终浓度为0.5%甲醇诱导表达具有内在金属螯合位点的突变型人膜联蛋白V。48h后离心沉淀培养基,获得的上清经硫酸氨沉淀、分子筛分离纯化蛋白;SDS—PAGE鉴定其相对分子质量为36000,并测定其纯度为95%。纯化后的蛋白加入终浓度为1mmol/L二硫苏糖醇,37℃保温15min恢复活性, 相似文献
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将本室改造的毕赤酵母接入100ml BMGY培养基培养24h,离心收集酵母细胞并重悬于100ml BMMY培养基,每12小时加入终浓度为0.5%甲醇诱导表达具有内在金属螯合位点的突变型人膜联蛋白V。48h后离心沉淀培养基,获得的上清经硫酸氨沉淀、分子筛分离纯化蛋白;SDS-PAGE鉴定其相对分子质量 相似文献
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背景与目的:碘难治性分化型甲状腺癌(radioactive iodine-refractory differentiated thyroid cancer,RAIR-DTC)是近年来研究的热点。因肿瘤细胞的异质性,不同病灶的生长速度及治疗疗效不尽相同。该研究探讨18F-FDG PET/CT在RAIR-DTC多发肺转移患者经阿帕替尼治疗效果评估中的价值。方法:纳入于中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院经阿帕替尼治疗的RAIRDTC患者。入组患者于基线、治疗后4周及8周行CT及18F-FDG PET/CT检查。结果:共7例患者,49个肺转移灶,SUVmax在基线时为0.8~23.2。基线时病灶的SUVmax水平与治疗后4周及8周的SUVmax变化(SUVmax-4w/SUVmax-baseline,SUVmax-8w/SUVmax-baseline)显著相关(P<0.000 1,P<0.000 1)。4周及8周的病灶直径变化率(CT4w/b,CT8w/b)与基线SUVmax无明显线性相关(P=0.666 4,P=0.478 7)。而4周的SUVmax变化(SUVmax-4w/SUVmax-baseline)与CT4w/b及CT8w/b显著相关(P=0.033 3,P=0.004 8)。对于基线水平SUVmax大于5的病灶,SUVmax-baseline与CT4w/b、CT8w/b均具有线性关系(P=0.008 2,P=0.016 9)。结论:18F-FDG PET/CT在RAIR-DTC多发肺转移患者靶向药物治疗中具有广阔的应用前景,可以识别肿瘤一致性,辅助选取靶病灶,并通过病灶的SUVmax预测患者对靶向药物治疗的疗效。 相似文献
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目的评价PET/CT在年轻肿瘤患者中的应用价值。方法回顾性分析我院行躯干PET/CT检查且年龄≤25岁的病例,共75例(男性35例,女性40例)89次检查。结果所患肿瘤前三位依次为淋巴瘤(31%)、卵巢肿瘤(16%)和神经内分泌肿瘤(8%)。PET/CT用于协助诊断(42%)、分期(11%)、疗效评估(27%)和复发监测(30%)。PET/CT对63%(22/35)的淋巴瘤诊断、分期、治疗评估和复发监测有重要意义,改变了58%(7/12)的卵巢肿瘤患者的诊疗决策,对40%的其他肿瘤患者有帮助。对年轻患者的图像分析须注意胸腺、卵巢和子宫内膜等生理性摄取。结论PET/CT对于指导儿童和青少年肿瘤诊疗具有较大价值,可在权衡辐照危害后合理选用。 相似文献
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目的 探讨细菌显像剂2-脱氧-2-氟山梨醇(2-deoxy-2-[18F]-fluorosorbitol, 18F-FDS)的合成过程、正常小鼠显像并计算内照射剂量,比较小鼠模型中大肠杆菌感染病灶及肿瘤病灶对FDS的摄取情况。方法 18F-FDS由氟多功能模块经"一锅法"由PET常用显像剂2-氟-2脱氧葡萄糖(18F-fluorodeoxyglucose, 18F-FDG)经NaBH4还原制备;实验组感染小鼠及荷瘤鼠尾静脉注射18F-FDS后60min进行microPET显像,通过Inveron Research软件测量病灶靶/本底比值;对照组注射18F-FDG,同样方法测量病灶靶/本底比值进行对照分析。结果 18F-FDS放化收率为80%±5%(n=8,未进行时间衰减校正),合成时间25min,放化纯度>99%。正常小鼠尾静脉注射18F-FDS后microPET显像提示示踪剂从泌尿系统排泄;背景组织肺及脑内的非特异性放射性摄取较低;大肠杆菌感染小鼠microPET显像,感染灶有较高的感染灶/肌肉比值,荷瘤鼠显像示18F-FDS肿瘤组织靶/本底比值明显低于18F-FDG。结论 18F-FDS放化合成方法操作简单,收率高,细菌感染灶有特异性摄取,在分辨感染和肿瘤上具有应用前景。 相似文献
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荷肉瘤小鼠肿瘤细胞凋亡显像实验研究 总被引:2,自引:1,他引:1
目的制备细胞凋亡显像剂99mTc-annexinⅤ,并在荷肉瘤小鼠体内对凋亡肿瘤组织进行活体显像。方法利用硫酸铵沉淀和Octyl-Sepharose疏水层析纯化来源于毕赤酵母重组表达、带有内在螯合位点的annexinⅤ。通过葡庚糖酸盐配体在annexinⅤ上直接标记放射性核素99mTc,SephadexG-25脱盐处理制备99mTc-annexinⅤ。在Balb/C小鼠右侧腋下接种肉瘤株S-180,1周后荷肉瘤小鼠经腹腔注射化疗药物环磷酰胺诱导肉瘤细胞凋亡。化疗18h后经小鼠尾静脉注射99mTc-annexinⅤ,扫描6h后肿瘤组织的SPECT图像。分别于放射性药物注射后0.5、1、3、6h处死动物,测定各脏器、组织的放射性计数,分析99mTc-annexinⅤ在荷肉瘤小鼠体内的生物分布。结果经过硫酸铵沉淀和Octyl-Sepharose疏水层析纯化,annexinⅤ纯度达到95%。直接标记和脱盐处理制备出的99mTc-annexinⅤ放射性化学纯度为90%。将99mTc-annexinⅤ注射到环磷酰胺处理的荷肉瘤小鼠体内,肿瘤组织能够显像。结论我们标记合成了99mTc-annexinⅤ,该探针可以活体显示肿瘤组织的凋亡情况,可能为临床应用和药物开发提供了一种手段。 相似文献
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目的研究甲状腺激素升高时脑纹状体多巴胺转运蛋白(DAT)、多巴胺(DA)及其代谢产物3,4二羟苯乙酸(DOPAC)的含量变化。方法将24只大鼠分为2组,其中一组采用灌胃法连续每天给予大鼠左甲状腺素钠(优甲乐,用量按大鼠体质量25μg/100g,溶于生理盐水中,体积1ml)造成实验性大鼠甲状腺激素增高状态;对照组仅采用灌胃法给予生理盐水1ml;于模型建立前后按随机数字表法抽取左甲状腺素钠组及对照组大鼠各6只,分别取尾静脉血1ml,采用放射免疫法测定TT3及,TT4水平。14d后将上述对照组及左甲状腺素钠组大鼠再各自平均分为2组,一组用于99^Tc^m-2β-[N,N’-双(2-巯乙基)乙撑二胺基]甲基-3β-(4-氯苯基)托烷(TRODAT-1)大鼠脑内分布研究,另一组用于高效液相-电化学检测器(HPLC-ECD)测纹状体DA及DOPAC含量,观察上述大鼠脑纹状体区DAT的分布及DA、DOPAC含量的变化。多组比较采用ANOVA分析,2组间比较采用均数t检验。结果左甲状腺素钠组大鼠在服用左甲状腺素钠后活动明显增加,体质量增长低于正常对照组[(223.90±8.40)与(261.60±14.20)g,t=6.98,P〈0.05]。甲状腺激素水平测定示:左甲状腺素钠组给药前后TT3,分别为(1.46±0.17)和(2.72±0.29)nmol/L(t=10.51,P〈0.0001);TT4分别为(83.52±10.06)和(187.12±36.48)nmol/L(t=7.74,P〈0.0001);对照组生理盐水注射前后TT3分别为(1.54±0.09)和(1.71±0.20)nmol/L(t=1.68,P〉0.05),TT4分别为(98.38±9.77)和(88.38±6.76)nmol/L(t=1.36,P〉0.05)。99^Tc^m-TRODAT-1大鼠脑内分布(每克脑组织百分注射剂量率,%ID/g)研究示:左甲状腺素钠组纹状体为(2.80±0.25)%ID/g,明显低于正常对照组[(3.13±0.14)%ID/g,t=-3.62,P〈0.05]。经检测左甲状腺 相似文献
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目的 重组表达抗Aβ40的人单链抗体,为被动免疫治疗阿尔茨海默疾病提供研究材料。方法 将从人噬菌体单链抗体文库中筛选获得的抗Aβ40人单链抗体基因,突变BamHI酶切位点,克隆连接到T载体,经过PCR和酶切鉴定。EcoRI和NotI双酶切pT-scFvAβ40质粒,连接到经过同样酶切的pPIC9K载体构建pPIC9K-scFvAβ40质粒,经过基因测序验证。线性化pPIC9K-scFvAβ40,转化GS115毕赤酵母,经0.5%甲醇诱导表达抗Aβ40的人单链抗体。结果 基因测序证实pPIC9K-scFvAβ40序列正确,转化GS115获得重组菌株。经过0.5%甲醇诱导,重组菌株分泌表达分子质量大小约为33kD的蛋白质。结论 成功构建pPIC9K-scFvAβ40质粒,Aβ40的人单链抗体在毕赤酵母系统得以重组表达。 相似文献
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目的:评价我国自主研发的重组人促甲状腺激素(rhTSH)在辅助分化型甲状腺癌(DTC)患者131I治疗前后动态评估中的作用。方法:该Ⅰ期研究采用剂量递增设计,纳入2019年5月至2020年11月就诊于北京协和医院及郑州大学附属肿瘤医院的24例DTC患者(男5例、女19例,中位年龄41岁),根据国产rhTSH(简称rhTSH)使用方法分为4个剂量组[0.9 mg×1 d(A组),0.9 mg×2 d(B组),1.8 mg×1 d(C组),1.8 mg×2 d(D组)],每组6例。每例患者接受2个阶段自身对照研究,依次为rhTSH阶段及停用甲状腺激素(THW)阶段。评估rhTSH的安全性、耐受性、患者生活质量[甲状腺功能减退症(简称甲减)症状体征积分、简式心境状态量表(POMS)]、药效学[促甲状腺激素(TSH)及甲状腺球蛋白(Tg)水平、诊断性全身显像(Dx-WBS)]及药代动力学(达峰时间、峰浓度)特征。采用配对t检验或Wilcoxon符号秩检验进行统计分析。结果:4个剂量组均未观察到剂量限制性毒性事件、严重不良事件或≥3级的不良事件。rhTSH阶段的生活质量相关评分明显优于THW阶段:甲减症状体征积分[-53.00(-53.00,-53.00)与-39.50(-47.00,-23.00)分;S=119.50,P<0.001];简式POMS评分[(91.92±12.06)与(99.67±19.13)分;t=0.95,P=0.025]。rhTSH末次给药后24 h血清TSH水平从基线的0.04(0.02,0.11)mU/L升至150.00(105.20,173.31)mU/L;随着rhTSH剂量增加,各组TSH呈增高趋势。在THW阶段,患者需经中位时间23 d的THW方达TSH≥30 mU/L水平,THW阶段TSH水平为73.51(57.22,106.22)mU/L;Tg在rhTSH给药后从基线[0.10(0.10,0.41)μg/L]逐渐升高,48 h达峰值[0.85(0.12,3.01)μg/L],THW阶段Tg水平为0.88(0.15,8.04)μg/L;2个阶段诊断性全身显像结果一致率为95.8%(23/24)。结论:在辅助DTC术后评估中,国产rhTSH对患者显示出较好的安全性,患者生活质量较好;其可有效升高患者TSH水平,并快速刺激Tg分泌及残余甲状腺摄碘。 相似文献