生物化学实验教学改革的几点思考

生物化学实验课是生化教学的重要组成部份,有其自身的发生、发展和教学规律。为了提高生化实验教学的效果,改革生物化学教学方式和内容,增设综合性、设计性、开放性实验,培养高素质的医学创新人才。     

构建基础学科的探究性实验教学体系

高等教育的实验教学应注重培养学生的科学素质。探究性实验教学体系的教学研究对象、研究方案等由教师指导学生确定。在医药生物化学等基础学科的实验教学中，选用和临床或生物技术药物等有联系的对象为实验教学研究主题，用本学科常用研究策略，常见和新的技术建立研究方案构成具有探索性且开放的实验教学体系，可用于高层次医药人才的实验教学，这有利于促进培养学生的创造意识和科学素质。     

头颈肿瘤患者血清唾液酸基转移酶、唾液酸和急相蛋白含量观察

本文测定56例头颈肿瘤患者血清唾液酸基转移酶(?)、唾液酸(SA)、a_(1)—抗胰蛋白酶(a_(1)—AT)和a_(1)—酸性糖蛋白(a_(1)—AGP)含量。结果发现:ST对治疗前肿瘤有无转移的诊断具有显著意义。a_(1)—AT诊断治疗后复发的灵敏度较高,同时检测ST、SA、a_(1)—AT和a_(1)—AGP可提高诊断灵敏度。对治疗后未复发的诊断,以ST的灵敏度最高,同时检测a_(1)—AT、SA和SA、a_(1)—AT,a_(3)—AGP可达到与ST相同的灵敏度。     

OLFM4GW112/hGC-1、GRIM19及PIN1基因在12种人肿瘤细胞株中的表达分析

目的检测OLFM4^GW112/hGC-1、GRIM19及PIN1基因在12种人肿瘤细胞株中的表达,并探讨与肿瘤细胞凋亡与周期的关系。方法利用RT-PCR半定量的方法检测GW112、GRIM19与PIN1三种基因在人12种肿瘤细胞株中转录水平。结果RT-PCR结果显示：12种人肿瘤细胞株中GW112、GRIM19与PIN1三种基因均有表达,未出现转录缺失。其中胃癌细胞SGC-7901与脑胶质瘤细胞CHG-5中的GW112表达明显强于GRIM19,而在其余十种细胞株中GW112表达却明显低于GRIM19。实验组细胞中,PIN1基因只在SGC-7901株与CHG-5株中表达较弱,其余表达均较强。结论GW112、GRIM19与PIN1在这些肿瘤细胞中的表达状况很可能与它们的周期调控和细胞凋亡有关,对三种基因的表达研究可进一步对分析三种基因的功能提供依据。     

用积分法测定血清芳香酯酶活性

目的以血清芳香酯酶(ArE)为模型,用模拟和实验考察积分法测定酶活性的可靠性.方法用酚乙酸酯测定ArE反应曲线.按ArE的积分速度方程In(S0/Si) (S0-Si)/Km=(Vm/Km)×ti计算无误差反应曲线,叠加随机误差得模拟曲线.以底物浓度(S0)为参数用Equ①非线性拟合测定Vm/Km,换算得Vm.结果模拟表明积分法测定酶活性与S0无关,升高S0可提高测定上限.实验表明S0低于Km的20%时Vm/Km无变化;重复性5.8%(ν= 6);本底和反应起点延迟无干扰;升高S0可提高上限.此积分法用20% Km的S0测定86份血清,ArE活性Vm呈正态分布,与据初速度按米氏方程计算的Vm无差异.结论此积分法能可靠测定酶活性Vm/Km或Vm.     

D一氨基半乳糖肝昏迷大鼠脑中5羟色胺、5一羟吲哚乙酸及血清和脑中芳香族氨基酸,总氨基酸含量的变化(摘要)

D—氨基半乳糖给35只雄性大白鼠腹腔注射。于48小时内引起不同深度的昏迷。Ⅲ、Ⅳ级昏迷者脑中5—羟色胺(5—HT)。5—羟吲哚乙酸(5—HIAA)。色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸和总氨基酸均显著高于对照组。Ⅱ级昏迷者除脑中5—HT外,其余各项测定亦比对照组     

生物化学实验教学改革初探

对近年来国内生物化学实验教学改革的现状进行了回顾，并以此为基础，结合生物化学实验教学中存在的问题，对生物化学实验教学的内容、实验考核办法等进行了初步改革和小范围试点，取得了良好的效果，为进一步建立更为完善的面向21世纪的医学生物化学实验教学新体系奠定了良好的基础。     

用静息张力表征离体蟾蜍腓肠肌等长收缩能力

目的 考察用静息张力表征离体蟾蜍腓肠肌等长收缩能力的有效性.方法 SOD抑制剂和维生素C联合作用蟾蜍腓肠肌,记录电刺激(12V DC,2 ms波宽,2 s间隔)下等长收缩张力变化,单指数函数加权拟合90%峰张力后的松弛过程测定松弛速度和静息张力表征收缩能力.结果 收缩1.0min后对照静息张力在7.0min内单调下降而药物处理后静息张力先降后升,7.0min后处理组静息张力相对初始值的增加值显著高于对照组.同时,对照松弛速度大多单调下降.药物处理后松弛速度多数先升后降,且10.0min内其松弛速度总低于相同时刻的对照组.结论 静息张力可反映肌肉收缩能力.     

维生素C对蟾蜍腓肠肌连续等长收缩期间松弛能力的影响

目的 考察维生素C(VC)对离体蟾蜍腓肠肌连续等长收缩期间松弛能力的影响.方法 药物处理30min后,记录恒压电刺激蟾蜍腓肠肌等长收缩7.0 min内的张力变化,单指数函数加权拟合90%峰张力后的松弛过程.用对应松弛速度和静息张力表征松弛能力.结果 抑制内源性抗氧化酶或用2.0mmol/LVC单独处理对肌肉松弛能力影响很小.抑制超氧化物歧化酶(SOD)后VC可显著升高静息张力并大幅降低松弛速度,但抑制谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶后VC效应很弱.同时抑制SOD、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶后,VC的效应同只抑制SOD相当.结论 高浓度VC对富含过渡金属离子复合物而抗氧化能力低的生物体系有氧化毒性,此毒性可能涉及超氧阴离子介导的氧化损伤.     

Fast estimation of Michaelis-Menten constant of arylesterase with a pair of medi-um concentrations of substrate

Objective: To investigate the reliability for fast estimation of Michaelis-Menten constant (Km) with calibra-ted specific activity at only two medium concentrations of substrate by both simulation and experimentation with aryles-terase (ArE)as model. Methods: Initial rates were simulated by randomly inserting uniform absolute error, and the experimental initial rates of ArE were determined by measuring the increaser of product absorbance. Calibrated specific activities at two substrate concentrations were obtained by regression analysis, and Km was calculated according to Michaelis-Menten equation. Results: By simulation with calibrated specific activities at two medium substrate concen-trations, Km could be calculated according to Michaelis-Menten equation with reasonable precision and accuracy. By experimentation with substrates of 2-naphthyl acetate, phenyl acetate, and p-nitrophenyl acetate, there were no differ-ences between the mean and SD of Km of ArE for either substrate by this linear kinetic method and the Lineweaver-Burk plot. Conclusion: This linear kinetic method was reliable for fast estimation of the Km of some specified enzyme on its substrate of lower solubility or lower sensitivity for quantification by common methods.