114 趋化性细胞因子与淋巴细胞

淋巴细胞的生成、游走、归巢、分化和淋巴组织的发育过程是一个十分复杂的过程，近年来的研究表明趋化因于及其受体的相互作用对其发挥着重要的作用。本文主要综述了趋化因于及其受体的分类和对淋巴细胞的调节作用。     

高脂饮食对小鼠内脏脂肪组织T细胞亚群的影响

目的:探讨高脂饮食诱导的营养性肥胖小鼠脂肪组织内CD4+T淋巴细胞的变化。方法:将6周龄的C57BL/6雄性小鼠随机分成2组,即正常对照组和高脂饮食组,分别饲养16周后眼底取血分离血清检测血糖、CHOL、TG、HDL和LDL水平,ELISA检测血清中TNF-α水平;游离附睾垫脂肪组织分离细胞,流式检测CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞的数量及亚群的比例。结果:与对照组比较,高脂饮食组体重、增加体重、附睾垫脂肪重量、肾周脂肪重量、血脂、血糖和TNF-α水平均有显著增加,但胸腺指数和脾脏指数两组间没有显著差别。脂肪组织内CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞数均较对照组有所增高,其中CD8+T淋巴细胞增多最显著。在CD4+T淋巴细胞中,Th1和Th17细胞显著增多,而Th2细胞未见显著变化。结论:高脂饮食可诱导脂肪组织内T淋巴细胞的增多,并向Th1和Th17方向极化。     

IL-33对人永生化角质形成细胞系和模型小鼠银屑病样皮损的影响

目的观察白细胞介素-33(IL-33)对人永生化角质形成细胞系(HaCAT)和咪喹莫特(IMQ)诱导的小鼠银屑病样皮损的影响,并对其可能的机制进行探讨。方法不同浓度IL-33刺激HaCAT细胞;CCK8法检测细胞增殖;Western blot检测细胞中LC3、Beclin1和p-STAT3的表达。将BALB/c雌性小鼠随机分为:正常对照组、IMQ组(背部外涂5%咪喹莫特乳膏,建立银屑病样皮损模型)和IL-33处理组(腹腔注射IL-33)。Western blot检测皮损组织中自噬相关蛋白的表达。结果与对照组相比,25 ng/mL的IL-33处理组促进HaCAT细胞的增殖作用最明显(P<0.05),同时,IL-33可促进LC3、Beclin1和p-STAT3蛋白的表达(P<0.05)。在小鼠银屑病样模型中,与正常对照组相比,IMQ组小鼠背部出现鳞屑和红斑伴有表皮增厚,而IL-33处理组与IMQ组相比小鼠背部皮损鳞屑、红斑及增厚更明显(P<0.01)。IL-33处理组皮损中自噬相关蛋白的表达水平低于IMQ组(P<0.05),p-STAT3蛋白的表达水平均高于正常对照组和IMQ组(P<0.05)。结论IL-33促进HaCAT细胞的增殖,诱导细胞自噬,加重咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的发生和发展,其机制可能是通过引起STAT3信号通路的活化而实现的。     

兔抗人重组生长激素rhGH多克隆抗体的制备、纯化及鉴定

目的制备抗人生长激素(growth hormone,GH)的多克隆抗体并鉴定其性能。方法真核细胞表达质粒pcDNA3.0-GHcDNA免疫家兔,制备rhGH多克隆抗体;ELISA法检测抗体效价。亲和层析法纯化后,进行Western blot、免疫组织化学和激光共聚焦显微镜检测,鉴定抗体的特异性与适用范围。结果得到兔抗人重组人生长激素rhGH多克隆抗体,效价达1:40000。纯化后的抗体可特异识别超表达的hGH和人内源性GH,可用于免疫组织化学实验、Western blot及激光共聚焦。结论用质粒免疫家兔制备的抗GH抗体具有较高的效价以及特异性,为hGH的功能性研究提供了有力的支持。     

银屑病与高尿酸血症的Meta分析北大核心CSCD

银屑病病因及发病机制尚不明确。在我国银屑病发病率为0.3%。通常认为银屑病属于慢性炎症疾病,可累及机体多个系统。高尿酸血症是导致痛风、痛风肾及痛风性关节炎的直接原因。最近几年银屑病并发高尿酸血症在不同地区有报道,但结果不一致。国外学者认为银屑病患者并发高尿酸血症发生率较高,但国内学者发现银屑病并发高尿酸血症发生率的结果差异较大,也有学者认为两种疾病间无一定关系。     

丝瓜提取物对小鼠巨噬细胞功能的影响

目的　探讨丝瓜的果、叶、藤提取物对小鼠巨噬细胞功能的影响。方法　将 50只小鼠随机等分为正常对照组、阳性对照组、实验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。正常对照组用生理盐水灌胃 ,实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别用丝瓜的果、叶和藤提取物灌胃 ,阳性对照组用胸腺肽灌胃 ;10d后检测小鼠腹腔巨噬细胞内酸性磷酸酶活性及巨噬细胞吞噬功能的变化。结果　实验组吞噬功能强度由高到低依次为实验Ⅲ组、实验Ⅰ组和实验Ⅱ组 ,但 3组比较无统计学差异 (P >0 .0 5)。各实验组与正常对照组相比 ,小鼠腹腔巨噬细胞内酸性磷酸酶活性和巨噬细胞吞噬功能均有不同程度增强 (P <0 .0 5) ,与阳性对照组相比无显著差异 (P >0 .0 5)。结论　丝瓜不同部位提取物对小鼠巨噬细胞功能均有增强作用     

八珍神农饮对肿瘤患者LAK细胞和IL-2活性的影响

八珍神农饮具有调理气血、扶正去邪的作用。本文通过实验研究 ,观察八珍神农饮对肿瘤患者血中ＬＡＫ细胞和ＩＬ 2活性的影响 ,以探讨其抗肿瘤的作用。1　对象与方法1 1　对象①病人 :随机选择恶性肿瘤患者 78例 ,其中原发性肝癌10例 ,肺癌 12例 ,胃癌 13例 ,食管贲门癌 19例 ,何杰金淋巴瘤 6例 ,慢性粒细胞性白血病 6例 ,结肠癌 7例 ,鼻咽癌 3例 ,脑胶质细胞瘤 2例。男 40例 ,女 38例 ;年龄 18～ 72岁 ,中位年龄 5 2岁。全部病例均经细胞学和 (或 )病理学确诊为恶性肿瘤。②八珍神农饮口服液由人参、当归、白术、茯苓、红花、大黄等经过特殊…     

催乳素对葡萄球菌肠毒素A诱导T细胞凋亡的影响

目的:观察作为重要细胞因子的催乳素在T细胞活化诱导凋亡过程中的作用。方法:实验于2005-03/2006-06在校级实验室新乡医学院免疫学实验室完成。实验材料:正常人外周血由新乡医学院第一附属医院提供,葡萄球菌肠毒素A(sigma)。实验方法:①T细胞活化诱导凋亡模型的建立:取健康人外周血5mL,加入等体积淋巴细胞分离液,采用密度梯度离心法获得淋巴细胞。完全1640培养基重悬细胞,加入葡萄球菌肠毒素A(SEA),置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养,至第4天,800r/min离心10min,以新鲜完全1640培养基换液,尽可能除去SEA。培养液中加入人白细胞介素2继续培养2周待用。②催乳素干预:将获得细胞离心并弃去培养液,用新鲜完全1640培养基重悬,调整细胞密度为5×109L-1,加入24孔板中,分别加入4mg/LSEA诱导细胞凋亡,同时加入20,300,1000μg/L催乳素,以不加催乳素的为对照组。③实验评估:于培养0,16,24h时采用MTT法检测T细胞增殖情况。培养16h时用流式技术检测细胞凋亡情况,并通过琼脂糖凝胶电泳检测T细胞凋亡DNA,并采用流式细胞术检测T细胞膜表面Fas和FasL,WesternBlot法检测T细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax。结果:①MTT法检测T细胞增殖:不同质量浓度催乳素干预组在16,24h的T细胞数量较对照组明显增多[吸光度值:对照组:0.65±0.02,0.54±0.04;20μg/L催乳素组:0.81±0.04,0.71±0.11;300μg/L催乳素组:1.14±0.10,1.22±0.10;1000μg/L催乳素组:1.12±0.12,1.22±0.12,P<0.01]。0～24h内300,1000μg/L催乳素组T细胞数量呈上升趋势(P<0.01),20μg/L催乳素组T细胞数量呈下降趋势(P<0.01)。②流式细胞术检测T细胞凋亡率:培养16h时,与对照组比较,各质量浓度催乳素干预组T细胞凋亡率降低[(46.80±9.21)%,(31.40±7.03)%,(17.50±4.29)%,(10.20±3.84)%,P<0.05]。③流式细胞术检测T细胞膜表面Fas、FasL:与对照组比较,各质量浓度催乳素干预组Fas和FasL细胞阳性率均下降[Fas:(88.0±17.3)%,(43.0±13.1)%,(22.0±6.7)%,(25.0±8.2)%,P<0.01;FasL:(46.0±17.5)%,(33.0±11.4)%,(31.0±14.0)%,(28.0±13.8)%,P<0.05]。④WesternBlot检测T细胞Bcl-2、Bax:与对照组比较,20μg/L催乳素组Bax和Bcl-2表达均无明显差异(P>0.05),300μg/L,1000μg/L催乳素组Bax表达明显降低(P<0.05),Bcl-2表达明显升高(P<0.05)。结论:在葡萄球菌肠毒素A诱导的T细胞活化诱导凋亡过程中,催乳素以细胞因子的身份,可通过抑制Fas、FasL和Bax表达,提高Bcl-2表达,来抑制T细胞凋亡,维持T细胞增殖。