NK细胞系细胞毒效应MTT比色法优化条件探讨

自然杀伤细胞 (ＮＫ)以其独特的抗病毒、抗肿瘤活性而成为机体的第一道防线。由于ＮＫ细胞数量少 ,且无特异性表面标志 ,难以获取高纯度的ＮＫ细胞 ,一度成为深入研究ＮＫ细胞的障碍。近年来ＮＫ细胞系的相继建立 ,为进一步揭示ＮＫ细胞的奥秘找到了理想模型。由于ＮＫ细胞系来     

采用IL－6cDNA控针检测人IL－6基因表达

采用缺口平移技术对ＩＬ—６ｃＤＮＡ进行了生物素和同位素标记，证明两种标记的ＩＬ－６ｃＤＮＡ（３０ｎｇ／ｍｌ）均可检出低至５ｐｇ的同源ＤＮＡ，而模拟探针（５００μｇ／ｍｌ）对高达１００ｎｇ的同源序列无此反应。应用ＩＬ－６ｃＤＮＡ对富含ＩＬ－６ｍＲＮＡ的标本进行斑点杂交或Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，证明人参三醇皂甙促进了淋巴细胞ＩＬ—６基因表达（４倍），人胎脾单个核细胞、人胎脑组织匀浆和人胎胰岛细胞内均含有高浓度ＩＬ—６ｍＲＮＡ。     

IL－6与胰岛功能及糖尿病的关系

胰岛素依赖性糖尿病是胰岛β细胞选择性破坏的一种自身免疫性疾病，病因尚不清楚。近期研究结果表明：正常和胰岛素依赖性糖尿病胰岛β细胞有ＩＬ－６基因表达，病毒和某些细胞因子可诱导或促进胰岛β细胞表达ＩＬ－６，ＩＬ－６对胰岛分泌胰岛素、胰岛ＤＮＡ和胰岛素合成、胰岛糖代谢均有影响，认为ＩＬ－６可能与胰岛素分泌及糖尿病病因有关。     

LPS和IFN－γ对人不同胎龄脾M￠分泌单核因子的影响

制备不同胎龄水囊引产胎脾Ｍ，以ＬＰＳ（１０ｍｇ／Ｌ）为诱导剂，刺激４８ｈ，ＭＴＴ法检测不同胎龄胎脾Ｍ上清中ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ的含量，并与外伤成人脾Ｍ的分泌功能进行比较，发现不同的单核细胞团子，其胚胎发育状况极不一致：胎脾ＭＩＬ－１的分泌在胚胎３２周达成人水平（Ｐ＞０．０５）并保持至出生；ＩＬ－６的分泌在胚胎２０周时已与成人无差别（Ｐ＞０．０５），至出生前，已显著超过成人水平（Ｐ＜０．０１）；而ＴＮＦ的分泌，在胚胎期一直处于较低水平（Ｐ＜０．０１）。同时观察到免疫介质（ＬＰＳ、ＩＦＮ－γ）对胎脾Ｍ分泌ＩＬ－６、ＴＮＦ有协同刺激作用。     

人肿瘤细胞中Th2类细胞因子的逆转与NK抗性变化的研究

正常状况下,机体的Th1/Th2类细胞因子处于一种平衡状态,IFN-γ、IL-2和Th2类细胞因子单克隆抗体促进向Th1型发育,IL-4和抗IFN-γ单抗促进向Th2方向分化.我们选择人肿瘤细胞株为研究对象,发现肿瘤细胞存在Th2类细胞因子表达强势状态,推测可能为肿瘤细胞免疫逃逸的机理之一,为调整肿瘤细胞所处的状态,调动细胞免疫反应,我们采用 IFN-γ、IL-12和抗 IL-10 McAb进行不同的组合,对典型的Th2型肿瘤细胞株Karpas淋巴瘤进行了促逆转的研究.     

重组人催乳素(rhPRL)在huPBL/SCID嵌合模型中对人直肠癌的治疗效应及免疫机理初探

通过体内实验进一步证实rhPRL对机体免疫功能的调节作用,以及用于过继细胞免疫治疗的可能性。我们选用CB17 SCID纯系小鼠,腹腔注入人结肠腺癌细胞(HT29),2小时后腹腔注入尼龙毛纯化的人淋巴细胞(T/NK细胞),同时开始进行rhPRL治疗,并设HBSS对照和rhIL-2治疗对照组。结果表明,rhPRL在体内外均无直接抗癌效应,反而可促进肿瘤生长。当SCID荷瘤鼠同时移植入人的T/NK细胞时出rhPRL可明显提高T/NK细胞的抗癌效果,生存期明显延长(P<0.05)。平均生存期由70.4天延至112.1天,在对照组全部死亡时(d105),rhPRL治疗组有60％存活,且在实验终止时(>160天)仍有40％存活。分析其抗癌机理发现,rhPRL体外可直接促进人T/NK细胞增殖,其分泌上清可抑制肿瘤生长,同时发现人T/NK细胞与HT29共育4小时中rhPRL亦可直接促进杀伤活性。     

RT-PCR克隆人IL-6、IL-10、IL-13和SCF等四种细胞因子膜外区cDNA

在逆转录病毒介导下将TNF基因转染入小鼠LAK细胞中．结果发现．转染TNF基因的LAK细胞比正常LAK细胞和转染对照基因的LAK细胞分泌更高水平的TNF．其体外生长能力和杀伤活性均显著升高．抗TNF单抗可显著抑制其体外杀伤活性．表明其杀伤活性升高是由基因转染后所表达的TNF介导的。将较低数量的TNF基因转染的LAK细胞与IL-2联合腹腔内注射后，对腹水型肝癌小鼠有显著的治疗效果．     

人脐血造血细胞的体外扩增

脐血作为造血于/祖细胞的来源具有诸多优点,应用前景广泛.采用多种造血生长因子组合,建立体外大量扩增脐血于/祖细胞的培养体系,已逐渐成为人们关注的热点.本研究动态观察了脐血单个核细胞(MNC)经不同造血生长因子组合刺激的增殖效应.结果显示,①脐血MNC培养至11～20d时,达到增殖高峰,21d后细胞增殖明显变缓.20d时,不同的造血生长因子组合对脐血造血于/祖细胞扩增倍数不同,结果如下,(a)rhIL-1 rhIL-3 rhIL-6 rhG-CSF rhGM-CSF rhSCF组合使有核细胞总数增殖为初始的43倍;     

吸烟和多发性硬化症

实验数据表明，多发性硬化症（MS）的发生可能与吸烟有关，但这方面的流行病学研究还很少，不具有说服力。以美国女性为研究对象的两组队列研究评价了MS发病率与吸烟的关系。在调整了年龄、地域和血统因素后，与不吸烟的女性相比，现时吸烟女性MS的相对发病率为1．6（95％可信区间：1．2，2．1），既往吸烟女性为1．2（95％可信区间：0．9，1．6）。随着累积吸烟量的增多，MS的相对发病率明显增加（P＜0．05），调整了其他潜在混杂因素后也得到了相似的结果。虽然这些预期结果还不能证实二者之间存在因果关系，但研究者认为吸烟使人们患MS的危险性增加。     

C-myc及C-Ha-ras-1癌基因在宫颈炎组织中的存在及相互关系

应用斑点分子杂交技术检测了87例慢性宫颈炎活检标本中C-myc和C-Ha-ras-l癌基因,结果发现7％的标本中C-ras-l癌基因阳性,13％的标本中C-myc癌基因阳性;并且在6例C-Ha-ras-l阳性的标本中有一半(3例)同时C-myc癌基因也阳性。结果提示,慢性宫颈炎中存在C-myc和C-Ha-ras-l癌基因的激活和扩增,C-myc和C-Ha-ras-l癌基因可能协同作用引起宫颈癌的发生。