人工椎间盘的设计、制造和临床应用进展

椎间盘切除术后由于脊柱稳定性破坏,常常出现腰背疼痛、继发性脊柱退行性变和椎管狭窄.传统的脊柱融合术虽能稳定脊柱,但常常并发融合部位邻近节段继发性退变、假关节形成、脊椎活动受限和供骨区疼痛等[1,2].     

聚乙烯醇水凝胶髓核的生物力学特性

目的 对一种新型水凝胶人工髓核的生物力学特性进行研究,为将来临床开展人工髓核置换手术提供科学依据。方法 采用7具新鲜标本的L_(4-5)脊柱功能单元进行生物力学实验,在轴向压缩、前屈后伸和左右侧弯等运动工况下,观察正常椎间盘、髓核摘除以及人工髓核植入3种状态下椎间盘高度、应变和位移的变化。结果 与正常椎间盘相比较,髓核摘除后椎间盘的高度和刚度降低,应变和位移加大(P<0.05)。而人工髓核植入后各项指标恢复正常(P>0.05)。结论 这种新型水凝胶人工髓核置换可纠正髓核摘除后的生物力学紊乱,有望进行临床应用。     

新型水凝胶人工髓核的短期生物相容性评价

目的 用一种由改良的聚乙烯醇水凝胶制成的新型人工髓核(Everge|)，对其进行短期生物相容性评价。方法 按照国家标准GB／T16886的要求，对Evergel人工髓核材料进行了包括细胞毒性试验、致敏试验、溶血试验、Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和哺乳细胞体外染色体畸变试验在内的毒理学测试。结果 Everge|人工髓核材料无细胞毒性作用，无致敏性，无明显的溶血现象。Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和哺乳细胞体外染色体畸变试验结果显示材料无致突变性。结论 Evergel人工髓核材料具有良好的生物相容性．可以进行临床应用．     

大鼠髓核细胞体外衰老模型的建立

目的：评价生长因子受体结合蛋白2(growthfactorreceptorboundprotein2,Grb2)表达水平与结直肠癌进展及预后的关系。方法：对Grb2的蛋白表达及细胞定位进行免疫组化检测。用t检验、chisquare检验等分析Grb2的表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、淋巴结转移个数、TNM分期、辅助化疗、血清癌胚抗原（CEA）和血清CA199之间的关系。用KaplanMeier法分析Grb2的表达水平对患者生存率的影响;用Cox回归分析结直肠癌预后的影响因素。结果：Grb2主要表达于结直肠癌上皮细胞的胞质。结直肠癌组织中胞质Grb2的表达显著高于腺瘤和癌旁组织（P<0.05),而结肠癌组织、腺瘤、癌旁组织中胞核Grb2中的表达水平差异无统计学意义。癌上皮细胞胞质中Grb2高表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、TNM分期、辅助化疗、血清CEA、血清CA199之间均无相关性,Grb2表达与淋巴结转移个数有相关性（P=0.001）。Cox单因素分析发现,胞质Grb2高表达能预测患者的不良预后;进一步纳入TNM等指标,Cox多因素分析发现,Grb2是结直肠癌预后的独立影响因素［无瘤生存风险比（HR）=2.664,P=0.015;总体生存风险比（HR）=2.574,P=0.019］。结论：Grb2高表达与结直肠癌进展密切相关,是结直肠癌预后的独立危险因素。     

大鼠半胱氨酸蛋白水解酶-3基因真核表达质粒和RNA干扰质粒的构建及鉴定

目的 构建SD大鼠半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3的真核表达质粒和干扰质粒,探究干扰质粒对Caspase-3表达的干预效应。方法 从SD大鼠软骨终板细胞中获得模板cDNA并扩增,约834 bp。克隆至载体pEGFP-N1,获得重组质粒pEGFP-N1-Caspase-3。针对Caspase-3设计4对RNAi靶点序列,克隆至载体pcDNA6.2。成功构建pcDNA6.2-Caspase-3-1、pcDNA6.2-Caspase-3-2、pcDNA6.2-Caspase-3-3、pcDNA6.2-Caspase-3-4,构建对照质粒pcDNA6.2-miRNA。将5个干扰质粒分别与pEGFP-N1-Caspase-3(用量比为7:1)共转染至293T细胞,qPCR检测转染48h后对Caspase-3表达的干预效应。结果 通过菌落聚合酶链反应(PCR)、酶切及测序表明pEGFP-N1-Caspase-3和干扰质粒构建成功;共转293T细胞后,qPCR示pcDNA6.2-Caspase-3-2、pcDNA6.2-Caspase-3-3干预组的Caspase-3的表达高于对照组,分别为33％和8％,而pcDNA6.2-Caspase-3-1、pcDNA6.2-Caspase-3-4干预组的Caspase-3的表达与对照组比较明显减少,抑制效率分别为24％和67％ (P ＜0.05)。结论 成功构建了Caspase-3的表达质粒和干扰质粒,并证实pcDNA6.2-Caspase-3-4对Caspase-3的表达具有明显的抑制效应。     

大鼠椎间盘髓核细胞体外凋亡模型的建立

【摘要】 目的 建立大鼠椎间盘髓核细胞体外凋亡模型。方法 为了充分模拟退变椎间盘内营养缺乏的微环境，本实验分别采用含1%，3%，5%，8%，10%胎牛血清的DMEM培养基培养椎间盘髓核细胞，筛选最佳促凋亡浓度，分别检测髓核细胞凋亡率、凋亡相关蛋白Bax、bcl-2、caspase-3酶的表达、细胞增殖曲线及免疫荧光分析。 结果 流式细胞仪测得髓核细胞凋亡率随着FBS浓度降低而升高，3% FBS为最有效诱导凋亡浓度；Western blot 示Bax、caspase-3酶表达在3% FBS组明显高于10% FBS组，同时bcl-2表达下降；CCK-8检测结果显示含3% FBS的培养基内，随着凋亡率的增长，髓核细胞增殖的速率越来越慢；免疫荧光分析3% FBS组FAS表达量明显比10% FBS组增高。结论 3% FBS能诱导髓核细胞发生凋亡，最终会导致细胞功能丧失，caspase家族参与并执行了这一过程。     

大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡体外模型的建立

[目的]建立大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡体外模型.[方法]为了模拟椎间盘内部低营养低代谢环境,采用低胎牛血清培养法培养椎间盘软骨终板细胞分别含0％,1％,3％,5％,8％,10％胎牛血清,设置不同浓度梯度筛选最佳浓度,检测凋亡率、凋亡蛋白表达及caspase酶活性.[结果]低胎牛血清培养组细胞发生形态改变,DAPI染色阳性细胞增多;流式细胞仪检测凋亡率随着FBS浓度降低而升高,1％为最有效诱导凋亡浓度;Western blot示FAS、caspase-3、PARP、细胞色素C表达在1％ FBS组明显高于10％时,同时caspase-3/8/9酶活性增高.[结论]低胎牛血清培养法能诱导体外培养的软骨终板细胞发生凋亡,最终会引起细胞功能丧失和椎间盘退变,caspase家族可能参与了这一过程.     

医教结合模式的探索与实践

学校卫生是公共卫生工作的重要内容,推行"医教结合"是有力、有序、有效地做好学校卫生工作的关键性举措。为进一步提高在校儿童和青少年学生的健康素养和健康水平,金山区卫生计生委开展了对医教结合模式的探索与实践。本文具体从组织架构设立、专业队伍组建、专项经费保障、定期培训开展、分级督导考核、规范工作开展、开展学生体检和强化娃娃教育8方面进行介绍和阐述,为医教结合模式的完善和推广提供有益借鉴。     

改性壳聚糖联合甲基泼尼松龙促进大鼠损伤坐骨神经的修复

背景：研究表明壳聚糖能够促进周围神经损伤修复,甲基泼尼松龙可改善损伤神经附近微环境,临床常用于中枢神经损伤急性期治疗。 目的：观察改性壳聚糖联合甲基泼尼松龙修复大鼠损伤坐骨神经的效果。 方法：将大鼠坐骨神经切断,立即显微吻合,分别于神经吻合周围注入改性壳聚糖,甲基泼尼松龙,改性壳聚糖+甲基泼尼松龙,生理盐水进行干预,并设假手术组进行对比。 结果与结论：在所有组中改性壳聚糖与甲基泼尼松龙联合治疗组展爪恢复时间最早(P < 0.05)。建模后4,8,12周,与改性壳聚糖组、甲基泼尼松龙组及生理盐水对照组相比,改性壳聚糖与甲基泼尼松龙联合治疗组坐骨神经传导速度较快(P < 0.05),腓肠肌湿质量残存率下降较少(P < 0.05),腓肠肌细胞直径及截面积较大 (P < 0.05)。建模后12周,改性壳聚糖与甲基泼尼松龙联合治疗组通过吻合口的神经纤维显著增多,且直径大小、排列较为一致,神经变性较轻。结果证实,改性壳聚糖联合甲基泼尼松龙治疗有利于促进大鼠坐骨神经损伤的修复与再生。