耐甲氧西林金黄色葡萄球菌IsdB活性片段的克隆、表达及抗原免疫保护性初步研究

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)抗原IsdB活性片段(IsdB2)免疫保护作用。方法利用生物信息学技术预测分析出IsdB活性片段(IsdB2),PCR扩增编码IsdB2的基因片段,亚克隆至GST标签融合表达的原核表达载体pGEX-6P-2中,将载体转化入大肠杆菌XL-1 blue,通过IPTG诱导表达IsdB2/GST融合蛋白,利用GST亲和层析初步纯化获取IsdB2蛋白。用IsdB2蛋白抗原辅以氢氧化铝佐剂对小鼠进行免疫实验,统计小鼠存活率对IsdB2抗原的免疫性进行初步研究。结果重组质粒经过BamHⅠ和NotⅠ双酶切鉴定、核酸序列测定和IPTG诱导表达IsdB2/GST及酶切获取IsdB2蛋白的SDS-PAGE分析表明,IsdB2蛋白相对分子质量大小约72 000,GST标签相对分子质量大小约26 000,与预期相符合。用IsdB2蛋白对小鼠进行3次疫苗免疫实验,IsdB2对小鼠的保护率分别为84.6%、50%和60%。结论成功构建重组表达载体pGEX-6P-2-IsdB2,利用大肠杆菌表达系统、GST亲和层析和酶切方法获得IsdB2蛋白抗原,通过3次动物疫苗免疫实验结果表明IsdB2具有免疫保护性,为研制新型有效的MRSA疫苗奠定实验基础。     

丙泊酚对老年患者术后认知功能及相关生物标记物的影响

目的 探讨老年患者下肢矫形手术中静脉输注丙泊酚镇静对术后认知功能以及脑脊液中相关生物标记物的影响.方法 择期行下肢矫形手术的ASAⅠ ～Ⅱ级的老年患者60例,根据镇静深度随机分为P-50组和P-80组,于手术前1日、手术后第3日及第7日采用简易精神状态检查量表(MMSE)评估认知功能;采用Luminex XMAP液相芯片技术分别检测蛛网膜下腔穿刺置管成功后(T0)、插入喉罩后即刻(T1)、手术后6h(T2)、24h(T3)和48h(T4)不同时间点脑脊液中相关生物标记物Aβ(1-42)、T-Tsu、p-Tau的浓度.结果 认知评分结果显示,手术前MMSE量表评分两组间差异无统计学意义,P-50组和P-80组术后24h、3d与术前1d比较均有统计学差异(P＜0.05),其余各时点之间比较差异无统计学意义(P＞0.05);术后24h,P-80组的得分显著高于P-50组;手术后6h(T2)、24h(T3)和48h(T4)与To比较,两组患者术后6h Aβ(1-42)蛋白水平、T-Tau、p-Tau均显著升高(P＜0.05),两组之间Aβ(1-42)蛋白水平无显著性差异(P＞0.05);木后24h Aβ(1-42)蛋白水平、T-Tau、p-Tau,P-80组明显高于P-50组(P＜0.05).结论 丙泊酚用于老年下肢矫形手术术中镇静时,不同的镇静深度对手术后认知功能的影响不同,当CSI保持在80时,术后认知功能显著优于CSI保持在50,且浅镇静可减少相关生物标记物的释放,降低神经元损害,从而减少术后认知功能障碍的发生.     

复合布比卡因缓释栓一次性根管治疗的临床研究

龋病是继肿瘤、心血管疾病之后的世界三大疾病之一 ,约占口腔门诊病例的 70 %～ 80 % ,其引起的根尖周病 ,在治疗上复诊次数多 ,等候时间长。鉴于这种情况 ,我们采用氯霉素、甲硝唑、布比卡因加基质研制成栓剂 ,一次性根管充填靶位缓释消炎止痛 ,疗效满意 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　选ASAⅠ -Ⅱ级急、慢性根尖周炎患者各 10 0例 ,均为急性根尖周炎首次发作和慢性根尖周炎急性发作 ,不伴有其他口腔疾病。牙位分类 :前牙 4 0例 ;双尖牙 2 4例 ;磨牙 136例 ,其中有瘘管 4 2例。随机分成两组 ,其中Ⅰ组 (急性 5 0例 ,慢性 5 0例 )…     

烧伤切痂植皮手术中全麻知晓的利用

全麻手术中出现知晓往往会给患者造成痛苦 ,一般须加以避免 ,但在特殊手术麻醉中知晓是否可以合理利用 ?本文在全凭静脉麻醉下的烧伤植皮术中进行了知晓的诱导和维持的实验 ,旨在观察全麻知晓的临床利用效果。随机选择烧伤切痂植皮手术患者 82例 ,男 4 7例 ,女 35例 ,年龄 1 6～5 5岁。烧伤面积 5 %～ 80 % ,术前肌肉注射阿品 0 5mg ,地西泮 1 0mg。诱导时以氯胺酮 5 0 μg/ (kg·min)和异丙酚 6 6 7μg/ (kg·min)的速度滴入。入睡后消毒 ,切痂取皮时 ,首次静注氯胺酮1mg/kg ,以后酌情间断给予 ,每次 0 3～ 0 5mg/kg。切痂取皮结束后停…     

丁丙诺啡复合芬太尼术后静脉镇痛效果观察

阿片类镇痛药芬太尼临床应用自控静脉镇痛（Patient—controlled intravenous analgesia,PCIA）广泛,但它对呼吸中枢及平滑肌有一定的抑制。丁丙诺啡是混合型阿片受体激动一拮抗剂,可以选择性地激动κ、μ受体,在硬膜外镇痛效应强、持续时间久,呼吸抑制和药物依赖发生率较低,但在静脉镇痛中报道较少。本研究应用丁丙诺啡复合芬太尼于术后自控静脉镇痛,观察镇痛效应及不良反应,了解丁丙诺啡复合芬太尼在患者自控镇痛中的作用特点。     

家庭中癌性疼痛患者的护理

癌症患者的自觉症状中，疼痛发生率可高达40％，晚期癌症患者至少80％有中度以上的疼痛，据统计资料表明：全世界每年有250万人因癌性疼痛得不到及时治疗而死亡，疼痛不仅增加患者了痛苦，而且明显地降低了患者的生存率。本人在从事家庭护理以来，体会报告如下：     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)重组亚单位疫苗FnBPA的免疫保护作用研究

目的评价耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)候选疫苗抗原FnBPA活性片段的免疫原性以及其在抵抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染中的免疫保护作用。方法构建pGEX-6p-2-FnBPA表达载体,经可溶表达及亲和纯化后的重组蛋白免疫Balb/c小鼠。末次免疫后的第7天,分离免疫小鼠的血清ELISA检测IgG及其亚型抗体水平,同时测定体外抗体介导的调理吞噬作用。末次免疫后的第14天,经尾静脉感染ATCC国际标准株MRSA-252,统计分析感染后各组的小鼠的生存率以及检测脾脏,肾脏的细菌定植量。结果成功构建、表达及纯化了FnBPA活性片段,重组蛋白纯度可达90%;免疫后诱导小鼠机体产生了高效价的IgG抗体,并在体外能发挥抗体介导的调理吞噬作用;在感染保护评价实验中,与对照组相比,实验组的生存率显著提高(P<0.01),并显著降低了脾脏与肾脏的细菌定植量(P<0.05)。结论耐甲氧西林金黄色葡萄球菌重组亚单位疫苗FnBPA具有良好的免疫原性和免疫保护作用,可以作为MRSA疫苗研究的重要候选抗原。     

恩丹西酮预防妇科手术后恶心呕吐的临床观察

妇科手术100例,分为恩丹西酮组(以下简称恩组)与对照组各50例.均为利多卡因硬膜外阻滞,于切皮前与术毕前恩组静注恩丹西酮共8mg,对照组则注生理盐水4ml.分别在给药前、给药后5、10分钟记录MAP、HR、RR和SpO2,并观察与记录恶心呕吐的程度和次数.结果:恩组恶心发生率18%,无1例呕吐;对照组分别为52%和40%,明显高于恩组(P＜0.05).两组间MAP、HR、RR和SpO2无明显改变.作者认为恩丹西酮能有效地预防妇科手术后的恶心呕吐,对呼吸循环功能无明显影响.     

氟比洛芬酯超前镇痛用于人工流产术的效果观察

目的探讨氟比洛芬酯超前镇痛复合丙泊酚静脉全麻在人工流产术中的作用。方法90例ASAⅠ级全麻下行人工流产术患者,随机均分为3组。Ⅰ组为空白对照,Ⅱ组于麻醉前10分钟静脉注射芬太尼1μg／kg,Ⅲ组于麻醉前10分钟静脉注射氟比洛芬酯50mg。各组全麻诱导均静脉注射丙泊酚2．0—2．5mg／kg,术中出现体动追加丙泊酚1mg／kg。记录全麻诱导前（T0）、扩宫口及负压吸引时（T1）、术毕（T2）、苏醒时（T3）,各时刻点平均动脉血压（MAP）、心率（HR）、呼吸频率（RR）和动脉氧饱和度（SpO2）。记录诱导时间、唤醒时间、丙泊酚用量、丙泊酚注射痛、术中患者体动呼吸抑制发生情况。术后宫缩痛VAS评分及患者满意度调查。结果呼吸抑制Ⅲ组比Ⅰ组、Ⅱ组轻;唤醒时间Ⅲ组比Ⅰ组、Ⅱ组短;丙泊酚用量、丙泊酚注射痛发生率、患者术中体动发生率Ⅲ组与Ⅱ组相当,Ⅰ组较多;视觉模拟评分Ⅲ组与Ⅱ纽相似,显著低于Ⅰ组。术后患者满意度显著Ⅲ纽优于Ⅱ组和Ⅰ组。结论氟比洛芬酯50mg超前镇痛用于人工流产术,患者循环系统平稳,与另两组相比,不仅镇痛效果确切、呼吸抑制轻微,而且苏醒迅速、并发症少。     

预置双J管预防肾结石ESWL术后并发症157例分析

体外冲击波碎石（ESWL）术是目前治疗尿路结石的首选方法，但在治疗〉2cm肾结石时，ESWL所致“石街”以及由其导致的发热、脓肾等并发症，会对患肾功能造成一定损伤，严重者可导致急性梗阻性肾损伤。近期，我们对肾结石157例预置双J管后行ESWL治疗，预防并发症效果满意。现分析报告如下。