大鼠坐骨神经切断后Src抑制的蛋白激酶C的底物的表达变化

目的 探讨大鼠坐骨神经切断后,Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)在神经中的表达变化及其意义.方法 制备成年SD大鼠坐骨神经切断模型.通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经切断后SSeCKS表达的时空变化.结果 Western blotting显示,大鼠坐骨神经切断后,近端SSeCKS的表达逐步升高,伤后2d达到高峰,之后逐渐下降.远端SSeCKS表达于12h达到高峰,之后呈下降趋势.免疫组织化学方法结果表明,SSeCKS在神经断端处高表达,成簇状聚集;在远离断端处表达明显降低,分布亦较为均一.免疫荧光双标记结果显示,SSeCKS与S100、NF200及GAP43有部分共定位.结论 大鼠坐骨神经切断后,可以引起SSeCKS的表达变化,其可能参与周围神经损伤后某些伤害性刺激信号分子的转导,并与损伤后神经的再生及功能修复有关.     

p27kip1和Skp2在损伤后大鼠坐骨神经中的表达变化

为了探讨损伤后周围神经p27kip1和S期激酶相关蛋白2(Skp2)的定位表达和变化,本实验将成年SD大鼠随机分为正常对照组、夹伤组和切断组,运用Western blot结合免疫组织化学及免疫荧光双标,在大鼠坐骨神经损伤时,对p27kip1和Skp2表达的影响进行了研究。结果表明:(1)坐骨神经夹伤后,p27kip1蛋白表达先逐渐下降,后又逐渐上升;坐骨神经切断后,远侧段p27kip1蛋白表达持续下降,而近侧段p27kip1蛋白表达在切断后6h明显下降,后又逐渐升高至正常水平,而Skp2表达变化与之相反;(2)免疫组织化学染色结果显示,坐骨神经切断后1w,远侧段从断端到末端,p27kip1阳性信号逐渐增加,而Skp2阳性信号逐渐减弱;(3)免疫荧光双标显示,正常和损伤坐骨神经的雪旺氏细胞中都有p27kip1和Skp2表达。以上结果提示:周围神经损伤后影响雪旺氏细胞中p27kip1和Skp2的表达变化,为进一步研究它们在周围神经损伤和修复中的作用机制奠定基础。     

突触后密度蛋白-95在大鼠坐骨神经损伤后的表达

为了探讨突触后密度蛋白-95(PSD-95)在周围神经损伤过程中的表达变化,本实验建立大鼠坐骨神经夹伤模型,采用荧光定量PCR(real-timePCR)和Western blotting对PSD-95 mRNA及其蛋白水平进行定量检测,应用免疫荧光双标技术观察PSD-95与神经型一氧化氮合酶(nNOS)的共定位情况。结果显示,PSD-95 mRNA及其蛋白在正常坐骨神经中度表达,损伤后迅速下降;PSD-95 mRNA从损伤后2d开始表达上调;而其蛋白水平于损伤后1周明显升高。免疫荧光双标染色证实在坐骨神经损伤后1周PSD-95与nNOS共定位于Schwann细胞上,而与神经丝蛋白NF-200共定位不明显。本研究结果提示PSD-95通过nNOS参与了周围神经损伤修复过程。     

p27kip1和Skp2在大鼠坐骨神经夹伤后脊髓中的表达变化

目的:研究p27~(kip1)和Skp2在正常和坐骨神经夹伤后大鼠脊髓中的表达变化。方法:Westem印迹法,免疫组织化学,免疫荧光双标。结果:Western印迹结果显示坐骨神经夹伤后,脊髓中p27~(kip1)表达下降后又有所恢复,并且p27~(kip1)和Skp2在脊髓中的表达变化呈负相关。免疫组织化学及免疫荧光双标显示,p27~(kip1)和Skp2在正常和损伤后的脊髓神经元和胶质细胞中都有表达。坐骨神经夹伤后p27~(kip1)和Skp2在脊髓腹角阳性细胞数目变化呈负相关。结论:坐骨神经损伤后p27~(kip1)。和Skp2在脊髓腹角神经元及其周围的胶质细胞表达变化相关,对研究脊髓损伤和修复的分子机制有重要意义。     

小议中医骨伤发展中的继承与创新

21世纪中医药学的发展问题,是关系我国医疗卫生事业发展的重大问题,而新世纪中医骨伤学科发展的状况,则是关系该学科兴衰与存亡的重要问题。面对现代科技浪潮的冲击,中医骨伤学科的发展面临继承和创新两大基本问题。1 继承:一切学科的进展都是以先前的知识为基础,没有继承就没有发展。对于中医药各学科来说,继承尤显重要与突     

刺血法治疗急性嗜盐菌食物中毒752例

<正> 急性嗜盐菌食物中毒是沿海地区夏秋季多发病之一.我们自1970年8月至1982年9月用刺血法治疗752例,疗效显著.现总结如下:临床资料1.一般资料:本组752例均在夏秋季设门诊观察床治疗.男393例,女359例.年龄3～15岁223例,16～50岁375例,51岁以上154例,以20～45岁之间为最多.发病前食海蛤子738例,食生腌蟹子14例.病程均在食海产品后24小时内发病,其中4～10小时内发病者居多.临床主要症状:呕吐者727例,泄泻者752例(其中稀水样便477例,洗肉水样便26例,粘液脓血便11例),腹痛612例,发热207例     

NIDD基因TaqMan探针的制备及其在实时荧光定量PCR方法中的应用

目的：制备NIDD基因TaqMan探针建立检测NIDD基因荧光定量PCR（FQ-PCR）,以进一步研究NIDD的表达情况。方法：采用RT-PCR法,从出生后一天的SD大鼠脑组织mRNA中扩增NIDD基因的部分编码序列区（CDS）片段,克隆入pGEM-T载体,筛选阳性克隆、酶切鉴定及序列测定。采用TaqMan探针,以重组质粒为模板绘制标准曲线。结果：RT—PCR法扩增出一特异产物与预期长度112bp相符,DNA序列测序的结果与C,eneBank提供的已知序列（AB098078）比较,所克隆的NIDD基因片段与其中的112bp完全相同,与NIDD基因100％同源。以重组质粒为模板绘制标准曲线,相关系数r大于0．99,反应效率显示为1,各点变异系数小于10％。结论：采用RT．PCR和T载体技术成功制备出可应用于FQ-PCR的NIDD基因TaqMan探针。     

儿童哮喘与食物不耐受相关性研究

目的：探讨儿童哮喘与食物不耐受的关系,为临床诊治相关疾病提供依据。方法：酶联免疫吸附法（ELISA）检测54例哮喘患儿及60例健康对照者14种日常食物过敏原特异性IgG抗体水平。结果：54例哮喘患儿食物特异性IgG抗体阳性率100%,较对照组明显增高。不耐受食物IgG抗体阳性率由高到低依次为：鸡蛋,牛奶,虾,蟹,鸡肉,牛肉,大豆,玉米,鱼,小麦,大米,西红柿,猪肉,蘑菇。饮食对小儿患者治疗有效率为75%,大多数患者病情好转。结论：儿童哮喘与食物不耐受密切相关,不耐受食物种类和程度上分别存在性别和年龄差异,在临床此类病人诊治中有重要意义。     

大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS的表达变化

为了探讨大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS(Src抑制的蛋白激酶C底物)在神经中的表达变化及其意义,本研究制备了成年SD大鼠坐骨神经夹伤模型,通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经夹伤后SSeCKS表达的时空变化。Western blotting结果显示:大鼠坐骨神经夹伤后,SSeCKS的表达迅速升高,伤后6h即达到高峰,之后逐渐下降。免疫组织化学染色结果表明SSeCKS在神经夹伤两端高表达,以近端明显,呈簇状聚集。夹伤远端表达较近端稍低。远离夹伤处及相应对侧,SSeCKS的表达水平有所下降且分布较为均一。免疫荧光组织化学双标记结果显示:夹伤两端SSeCKS与S100和NF200的共存不明显,但可见部分SSeCKS与GAP43双标纤维。本研究提示大鼠坐骨神经夹伤可引起SSeCKS的表达变化,该变化可能参与周围神经损伤后某些伤害性刺激信号分子的转导并与损伤后神经的再生及功能修复有关。     

食物不耐受与男性过敏性紫癜患儿血清IgG的相关性研究

目的：探讨14种食物不耐受特异性IgG抗体与男性患儿过敏性紫癜的关系,为临床诊治相关疾病提供依据。方法：酶联免疫吸附法（ELISA）检测100例过敏性紫癜男性患儿及78例健康对照者14种日常食物过敏原特异性IgG抗体水平。结果：分析显示各年龄组的的主要致病原以鸡蛋、牛奶为主,对猪肉、玉米不耐受者较少,且IgG抗体阳性率在不同年龄组间比较,差异具有统计学意义的有4种：鸡蛋、蟹、小麦、鱼。结论：男性患儿过敏性紫癜疾病与食物不耐受密切相关,部分食物过敏存在年龄差异,在此类病人临床诊治中有重要意义。