重庆地区202例儿童慢性咳嗽的病因研究

目的 探讨儿童慢性咳嗽的病因构成。方法 对2015年5月至2017年11月于重庆医科大学附属儿童医院住院治疗的202例慢性咳嗽患儿的临床资料进行回顾性分析。结果 202例患儿的病因分布为：感染后咳嗽81例（40.1%）,咳嗽变异性哮喘71例（35.1%）,上气道咳嗽综合征43例（21.3%）,异物吸入3例（1.5%）,胃食管反流性咳嗽1例（0.5%）,多发性抽动症2例（1.0%）,先天性呼吸道疾病1例（0.5%）。119例（58.9%）慢性咳嗽是单病因所致,83例（41.1%）有多种病因。不同年龄组（< 1岁、1岁~、3岁~、6~14岁）和不同咳嗽性质组（湿咳、干咳）慢性咳嗽病因构成差异均有统计学意义（P < 0.01）。结论 儿童慢性咳嗽的前三位主要病因为：感染后咳嗽、咳嗽变异性哮喘和上气道咳嗽综合征;不同年龄阶段及不同咳嗽性质的患儿其慢性咳嗽的主要病因存在差异。     

糖皮质激素诱导人气道上皮细胞9HTE0凋亡的研究

目的探讨不同浓度及不同时间的糖皮质激素诱导人气道上皮细胞9HTE0凋亡的机制。方法采用Annexin V/PI双染法检测低浓度组(0.3μmol/L)、中浓度组(3μmol/L)、高浓度组(10μmol/L)地塞米松(dexamethasone,Dex)作用6 h、12 h、24 h对人气道上皮细胞9HTE0早期凋亡的比例变化;RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA的表达情况;细胞免疫荧光法检测Bcl-2、Bax蛋白的定位及表达情况。结果 Annexin V/PI双染法检测中、高浓度组Dex在作用12 h、24 h后,早期凋亡率较正常组有显著性差异(P<0.05);Bcl-2 mRNA于高浓度组Dex作用6 h后即出现变化,而在中、高浓度组Dex作用12 h及24 h后,Bcl-2 mRNA均显著下降(P<0.05),Bax mRNA均显著增高(P<0.05);Bcl-2、Bax蛋白定位于细胞核和细胞浆中,中、高浓度组Dex作用24 h后荧光有明显变化。结论糖皮质激素作为哮喘一线用药,诱导了人气道上皮细胞9HTE0凋亡同时使其具有浓度和时间依赖性,从而为气道上皮的损伤提供了理论依据。     

糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在人气道上皮细胞中的表达及对MAPK信号通路的影响

目的:探讨糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在人气道上皮细胞9HTE0中的表达以及对MAPK信号通路因子Raf-1、Mek1/2、Erk1/2的影响。方法:采用RT-PCR及Western blot法检测地塞米松(Dex)作用后GILZ mRNA及蛋白的表达,同时细胞免疫荧光法检测GILZ蛋白的定位;合成三条GILZ-SiRNA分别转染人气道上皮细胞9HTE0,用Q-PCR及Western blot法筛选出沉默效果最佳的一条;Western blot法检测MAPK信号通路因子Raf-1、Mek1/2、Erk1/2磷酸化蛋白及其总蛋白的表达。结果:Dex能够明显刺激人气道上皮细胞9HTE0GILZ mRNA及蛋白的表达,GILZ蛋白主要定位在细胞浆中,Dex抑制了Raf-1、Mek1/2、Erk1/2磷酸化蛋白的表达,而GILZ-SiRNA转染后,Raf-1.Mek1/2、Erk1/2磷酸化水平有所回升。结论:糖皮质激素作为支气管哮喘一线用药,虽然能够诱导GILZ表达并发挥一定的抗炎作用,但同时GILZ却抑制了在气道上皮修复中起重要作用的MAPK信号通路的激活,这为临床上研究哮喘防治新措施提供了理论依据。     

绒草清带片质量标准研究

目的:建立绒草清带片的定性定量方法。方法:采用 TLC 法对处方中秦皮、赤芍、香附进行了定性鉴别;采用 HPLC 法,色谱柱:Shim-pack(岛津)C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水(每100 mL 磷酸水中加0.1 g 十二烷基硫酸钠)(46:54)为流动相,检测波长为265 nm,流速1 mL·min~(-1),柱温25℃,进样量10μL,对方中关黄柏所含小檗碱进行含量测定。结果:绒草清带片中秦皮、赤芍、香附薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;绒草清带片中小檗碱的含量测定线性范围为0.09～0.45μg(r=0.9999),平均回收率为99.8%(RSD=0.96%,n=5)。结论:薄层色谱鉴别和含量测定方法准确可行,重复性好,可有效地控制绒草清带片的质量。     

HPLC法测定不同产地返魂草中绿原酸的含量

目的建立同时测定不同产地返魂草中绿原酸含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱为Diamonsil ODS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙晴-体积分数为0.4%的磷酸水溶液,检测波长为326 nm;流速为1 mL.min-1。结果绿原酸质量在62~301 ng内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.2%,RSD为0.91%(n=9);5个产地返魂草中绿原酸含量分别为0.95、0.720、.55、0.64、0.44 mg.g-1。结论HPLC法可用于返魂草中绿原酸的含量测定;5个产地的返魂草中绿原酸含量有明显差异,吉林通化返魂草中绿原酸含量最高。     

支气管镜在儿童迁延性细菌性支气管炎中的应用价值

目的：　探讨支气管镜在儿童迁延性细菌性支气管炎（protracted bacterial bronchitis，PBB）的应用。方法：　回顾性分析2016年9月至2020年9月重庆医科大学附属儿童医院呼吸一病房收治的均行支气管镜检查的50例诊断PBB住院患儿的临床资料。结果：　50例PBB患儿中，年龄6个月8 d至12岁8个月，平均（55.1+33.0）个月，其中<1岁4例（8.0%），1~3岁12例（24.0%），~7岁24例（48.0%），~12岁9例（18.0%），>12岁1例（2.0%）；临床表现除慢性湿性咳嗽外，伴有喘息者占50.0%；50例患儿均行支气管镜检查及支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）培养，镜下见慢性支气管内膜炎改变，24例吸出中-大量白色分泌物，22例吸出中-大量黄色分泌物，3例吸出少量白色分泌物，1例有痰栓，BALF中性粒细胞比值波动在5%~94%；BALF培养阳性及痰培养阳性者均26例，阳性率为52.0%，主要致病菌为流感嗜血杆菌及肺炎链球菌，药物治疗以阿莫西林克拉维酸钾及三代头孢为主，根据临床症状、支气管镜下表现及BALF培养结果20例患者调整了抗菌药物使用，同时有17例患儿再入院进行多次支气管镜检查灌洗，个别患儿根据情况选择完善灌洗液第二代测序（next generation sequencing，NGS）、黏膜活检、全外显基因检测明确病原病因。结论：　PBB以幼儿及学龄前期儿童多见，持续性湿性咳嗽为主要特征，易伴喘息，支气管镜下可见慢性支气管内膜炎改变及较多分泌物，BALF培养的特异度及灵敏度较高，可指导抗菌药物治疗，而针对病原不明、治疗效果差的患儿可进一步行NGS、黏膜活检及全外显基因检测协助诊治，支气管镜协同抗菌药物治疗PBB，能提高治疗效果改善预后，具有较高的临床应用价值。     

儿童慢性咳嗽主要病因研究进展

咳嗽是儿童呼吸道疾病的主要症状之一,对患儿身心健康产生极为不利的影响,也受到了广大儿科医师的高度重视。儿童慢性咳嗽的唯一或主要临床症状是咳嗽,病程在4周以上,且胸部X线片基本正常,治疗此病的前提在于明确病因。大量研究证实,儿童慢性咳嗽的三大病因为咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)、上气道咳嗽综合征(upper airway cough syndrome,UACS)以及感染后咳嗽(post-infection cough,PIC)0本文系统综述了儿童慢性咳嗽主要病因的研究现状,从理论层面来辅助临床治疗。     

儿童肺炎支原体下呼吸道感染的临床特征分析

目的:了解儿童肺炎支原体(Myecoplasma pneumoniae,MP)下呼吸道感染的临床特征.方法:回顾性分析2008年1月～2009年4月本院呼吸1病房确诊为MP下呼吸道感染的211例住院患儿临床资料,分析总结MP下呼吸道感染患儿年龄、临床症状体征、胸部X线、肺功能以及实验室检查等特征.结果:MP下呼吸道感染男女无明显差异,5岁以下儿童占71.1%,咳嗽率98.6%,发热率75.4%,喘息率51.2%.婴幼儿喘息发生率明显高于年长儿(62.4%vs 39.2%,P=0.001),呕吐腹泻率明显高于年长儿(35.8%vs 14.7%,P=0.0001),皮疹发生率明显高于年长儿(14.7%vs 5.9%,P=0.037),MP感染患儿中60.7%合并肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,CP)感染,50.0%合并细菌感染,26.9%合并病毒感染.肺功能检查提示90.3%(65/72)有不同程度的气道阻塞,70.8%(17/24)有气道高反应性.结论:小儿MP下呼吸道感染年龄呈低龄化趋势,以咳嗽、发热、喘息为主要表现,婴幼儿较年长儿更易出现喘息、呕吐腹泻及皮疹.MP感染易合并CP感染,可引起气道阻塞和气道高反应性.