水通道蛋白4对一氧化碳中毒后迟发性脑病大鼠神经损伤的影响

目的 探讨水通道蛋白4(Aquaporin 4,AQP4)对一氧化碳(Carbon monoxide,CO)中毒后迟发性脑病(Delayed encephalopathy,DEACMP)大鼠神经损伤的影响。方法 将210只雄性SD大鼠随机分为空白对照(Blank control,BC)组、CO中毒(CO)组、钠-钾-氯共转运体(Na⁺-K⁺-Cl^- cotransporter,NKCC)抑制剂处理(布美他尼)组、p38-丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen activated protein kinase,MAPK)抑制剂处理(MAPK)组和AQP4特异性抑制剂处理(AQP4抑制剂)组,每组各42只; 根据造模后不同时间点将每组大鼠进一步分为染毒3、6、12、24、48、72 h和7 d后共7个亚组,每亚组各6只; 取大鼠脑前额叶皮质组织,计算脑皮质含水量,采用HE法观察脑皮质形态; 采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(Streptavidin-perosidase,SP)染色法测定大鼠脑皮质AQP4,p38 MAPK,NKCC1、胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)和S100钙结合蛋白B(S100 calcium binding protein B,S100B)蛋白表达水平。结果 与BC组比较,CO组大鼠在染毒3、6、12、24、48、72 h后尾静脉COHB水平和脑皮质含水量显著升高,脑皮质AQP4,p38 MAPK,NKCC1,GFAP和S100B蛋白表达水平显著升高,染毒7 d后恢复正常(P<0.05); 与CO组比较,布美他尼组、MAPK组和AQP4抑制剂组大鼠脑皮质含水量显著降低,脑皮质AQP4,p38 MAPK,NKCC1,GFAP和S100B蛋白表达水平显著降低,且AQP4抑制剂组变化更明显(P<0.05)。结论 p38-MAPK/NKCC信号通路可能参与调控CO中毒DEACMP大鼠脑皮质AQP4表达,抑制AQP4表达可有效减轻大鼠脑水肿并改善预后,有望成为预防和治疗DEACMP的新靶点。     

脑缺血再灌注损伤大鼠尾静脉移植脐带间充质干细胞的安全性

背景：尾静脉移植干细胞穿过血脑屏障到达宿主脑损伤区域内的具体机制尚不明确。目的：观察尾静脉移植人脐带间充质干细胞治疗脑缺血再灌注损伤大鼠的效果及安全性,并探讨其作用机制。方法：通过密度梯度离心法结合贴壁筛选法获取人脐带间充质干细胞并以BrdU标记。Sprague-Dawley大鼠以改良线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,移植A组在造模后第7天、移植B组在造模后第14天通过尾静脉移植人脐带间充质干细胞,模型组不做处理。结果与结论：①移植后7,14,28,35,42,49,56d,2个移植组mNSS评分低于模型组（P〈0.05）。移植后7,14,28,35,42,49d,移植A组mNSS评分低于B组（P〈0.05）。模型组在造模后第35天、移植A组在第42天、移植B组在第49天时mNSS评分进入平台期。②2个移植组大鼠脑组织未见到CD11b、MPO单染阳性细胞,可见Brdu＋Nestin、Brdu＋MAP-2、Brdu＋GFAP、Brdu＋FⅧ,Brdu＋VEGF双染阳性细胞。结果表明人脐带间充质干细胞经尾静脉途径移植可以在宿主脑内存活,通过生成神经元样和神经胶质样细胞、促进新生血管形成并分泌神经营养因子等因素促进大鼠神经功能恢复,且未发现明显免疫排斥反应及异常分化细胞,具有较高的安全性。     

脐带间充质干细胞移植治疗大鼠脑缺血损伤

背景：对于缺血性脑卒中至今尚无确实有效的药物治疗,干细胞因其具有高度自我更新能力和多向分化潜能,使其重建中枢神经系统结构与功能成为可能。 目的：观察脐带间充质干细胞移植治疗缺血性脑卒中模型鼠的效果及安全性,并探讨其可能机制。 方法：体外分离人脐带间充质干细胞,移植前以BrdU标记。将SD雄性大鼠制作大脑中动脉闭塞模型后随机分为3组：移植组于造模后第7天,移植脐带间充质干细胞到损伤侧纹状体,PBS组给予等量PBS,模型组大鼠不做处理。 结果与结论：①人脐带间充质干细胞移植组大鼠mNSS评分恢复优于模型组(P < 0.05);模型组mNSS评分在损伤后35 d内恢复速度慢于模型组(P < 0.05),至第56天与模型组比较差异无显著性意义(P > 0.05)。②移植组大鼠损伤中心及周围均可见Brdu染色阳性细胞及与 Nestin、微管缔合蛋白2、胶原纤维酸性蛋白、Ⅷ因子、血管内皮生长因子免疫组织化学双染阳性细胞。表明脐带间充质干细胞可以在体外分离培养,移植后能在鼠宿主脑内存活、分化,促进大脑中动脉闭塞模型鼠神经功能的恢复。推测其机制可能与移植后细胞分化为神经元样和神经胶质细胞样细胞,并分泌或促进宿主分泌神经营养因子、促进新生血管形成有关。关键词：大脑中动脉闭塞;人脐带间充质干细胞;大鼠;胶原纤维酸性蛋白;血管内皮生长因子;神经功能 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.19.011     

脑缺血再灌注损伤大鼠尾静脉移植脐带间充质干细胞的安全性*

背景：尾静脉移植干细胞穿过血脑屏障到达宿主脑损伤区域内的具体机制尚不明确。 目的：观察尾静脉移植人脐带间充质干细胞治疗脑缺血再灌注损伤大鼠的效果及安全性,并探讨其作用机制。 方法：通过密度梯度离心法结合贴壁筛选法获取人脐带间充质干细胞并以BrdU标记。Sprague-Dawley大鼠以改良线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,移植A组在造模后第7天、移植B组在造模后第14天通过尾静脉移植人脐带间充质干细胞,模型组不做处理。 结果与结论：①移植后7,14,28,35,42,49,56 d,2个移植组mNSS评分低于模型组(P < 0.05)。移植后7,14,28,35,42,49 d,移植A组mNSS评分低于B组(P < 0.05)。模型组在造模后第35天、移植A组在第42天、移植B组在第49天时mNSS评分进入平台期。②2个移植组大鼠脑组织未见到CD11b、MPO单染阳性细胞,可见Brdu+Nestin、Brdu+MAP-2、Brdu +GFAP、Brdu+FⅧ,Brdu+VEGF双染阳性细胞。结果表明人脐带间充质干细胞经尾静脉途径移植可以在宿主脑内存活,通过生成神经元样和神经胶质样细胞、促进新生血管形成并分泌神经营养因子等因素促进大鼠神经功能恢复,且未发现明显免疫排斥反应及异常分化细胞,具有较高的安全性。关键词：尾静脉;细胞移植;人脐带间充质干细胞;脑缺血;大鼠 缩略语注释：hUC-MSCs：human umbilical cord  mesenchymal stem cells,人脐带组织间充质干细胞 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.14.023     

熄风通络头痛片联合布洛芬治疗偏头痛的临床研究

目的研究熄风通络头痛片联合布洛芬缓释片治疗偏头痛的临床疗效。方法选取2017年8月—2018年8月恩施土家族苗族自治州中心医院收治的100例偏头痛患者为研究对象,所有患者采用随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各50例。对照组患者口服布洛芬缓释片,1片/次,2次/d(早晚各1次)。治疗组患者在对照组基础上口服熄风通络头痛片,4片/次,3次/d。两组患者持续治疗4周。观察两组的临床疗效,比较两组的头痛发作次数、头痛持续时间和视觉模拟评分法(VAS)评分以及内皮素-1(ET-1)、5-羟色胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为78.00%、94.00%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者头痛持续时间、头痛发作次数和VAS评分均显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);并且治疗组头痛持续时间、头痛发作次数和VAS评分显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者血清ET-1、5-HT、CGRP水平均显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组血清因子水平显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论熄风通络头痛片联合布洛芬缓释片治疗偏头痛具有较好的临床疗效,能改善患者临床症状,缓解疼痛,降低血清因子水平,具有一定的临床推广应用价值。     

miR-331-5p靶向AQP4对大鼠星形胶质细胞中DEACMP标志物表达的影响

目的 探讨一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)标志物表达的潜在机制.方法 纳入2018年7月至2020年7月于我院接受治疗的DEACMP患者36例,健康体检者32例,检测其血清中DEACMP标志物髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达水平.给大鼠腹膜内注射CO以建造大鼠DECAMP模型.造模成功的为DECAMP组大鼠,相应PBS处理的为对照组大鼠.水迷宫测试两组大鼠逃脱时间.苏木精伊红染色分析两组大鼠海马结构.高通量测序检测两组大鼠星形胶质细胞中的差异miRNA.过表达差异miRNA后,检测大鼠星形胶质细胞中DEACMP标志物MBP的表达水平.通过miRDB在线分析miRNA的潜在底物并通过荧光素酶报告实验验证.结果 与健康体检者相比,DECAMP患者血清中MBP的表达水平升高(P＜0.05).DEACMP组中毒大鼠在第7天和第14天的逃脱时间比正常大鼠要长(P＜0.05).对照组海马的结构和细胞形状是正常的,而在DEACMP组中观察到神经元损伤,例如细胞萎缩,核固体收缩和结构模糊.与对照组相比,大鼠血清DEACMP标志物MBP的蛋白水平在第7天和第14天均上升(P＜0.05).过表达miR-331-5p时大鼠星形胶质细胞的MBP表达水平上升(P＜0.05).敲低miR-331-5p后,大鼠星形胶质细胞的MBP表达水平下降(P＜0.05).敲低AQP4时大鼠星形胶质细胞的MBP表达水平上升(P＜0.05).过表达AQP4后,大鼠星形胶质细胞的MBP表达水平下降(P＜0.05).过表达miR-331-5p后,AQP4的蛋白水平下降(P＜0.05).敲低miR-331-5p后,AQP4的蛋白水平上升(P＜0.05).miR-331-5p靶向AQP4的3端非编码区(P＜0.05).DEACMP模型中毒大鼠海马在AQP4上的阳性染色少于正常大鼠.结论 miR-331-5p通过靶向AQP4 mRNA的3端非编码区,减少了AQP4的蛋白表达水平,最终增加了大鼠星形胶质细胞中DEACMP标志物MBP的表达.     

帕金森患者细胞因子、微量元素及抗氧化酶水平变化

目的观察帕金森患者细胞因子、微量元素及抗氧化酶水平的变化。方法将恩施土家族苗族自治州中心医院自2016年1月至2017年12月收治的110例帕金森患者纳入B组,随机选取同期健康体检者110例纳入A组。比较两组研究对象的细胞因子、微量元素及抗氧化酶水平。结果 B组患者的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、促黑激素释放抑制因子水平均高于A组(P<0.05)。B组患者的锌、硒含量水平均低于A组(P<0.05);B组患者的铅、铜含量水平均高于A组(P<0.05)。B组患者的谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶水平均低于A组(P<0.05);B组患者丙二醛水平高于A组(P<0.05)。结论与健康人群比较,帕金森患者的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、促黑激素释放抑制因子、铅、铜、丙二醛水平升高,锌、硒、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶水平降低。     

脐带间充质干细胞移植治疗大鼠脑缺血损伤

背景:对于缺血性脑卒中至今尚无确实有效的药物治疗,干细胞因其具有高度自我更新能力和多向分化潜能,使其重建中枢神经系统结构与功能成为可能。目的:观察脐带间充质干细胞移植治疗缺血性脑卒中模型鼠的效果及安全性,并探讨其可能机制。方法:体外分离人脐带间充质干细胞,移植前以BrdU标记。将SD雄性大鼠制作大脑中动脉闭塞模型后随机分为3组:移植组于造模后第7天,移植脐带间充质干细胞到损伤侧纹状体,PBS组给予等量PBS,模型组大鼠不做处理。结果与结论:①人脐带间充质干细胞移植组大鼠mNSS评分恢复优于模型组(P<0.05);模型组mNSS评分在损伤后35d内恢复速度慢于模型组(P<0.05),至第56天与模型组比较差异无显著性意义(P>0.05)。②移植组大鼠损伤中心及周围均可见Brdu染色阳性细胞及与Nestin、微管缔合蛋白2、胶原纤维酸性蛋白、Ⅷ因子、血管内皮生长因子免疫组织化学双染阳性细胞。表明脐带间充质干细胞可以在体外分离培养,移植后能在鼠宿主脑内存活、分化,促进大脑中动脉闭塞模型鼠神经功能的恢复。推测其机制可能与移植后细胞分化为神经元样和神经胶质细胞样细胞,并分泌或促进宿主分泌神经营养因子、促进新生血管形成有关。     

山麦冬皂苷B调节JAK2/STAT3保护脑缺血再灌注损伤

目的 研究山麦冬皂苷B通过调节非受体型酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导子和转录激活因子3(STAT3)通路对脑缺血再灌注损伤的作用.方法 构建大鼠脑缺血再灌注模型.造模前10 min和造模后2 h,尾静脉注射山麦冬皂苷B 10、20、40 mg/kg,尼莫地平1 mg/kg或AG4903 mg/kg.HE、Nis...