急性白血病IgH基因重排的研究

对１０５例儿童白血病细胞作了ＩｇＨ基因重排半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）分析，结果显示重排主要见于Ｂ细胞系急性淋巴细胞白血病（阳性率７５．５％）及相关杂合性白血病（ＨＡＬ）中，说明ＩｇＨ基因重排ＰＣＲ分析结果可作为分型指标之一。１５例正常外周血淋巴细胞则无明显条带，说明可以区分克隆性和反应性增生。２２例同时与ＤＮＡ印迹比较，结果相关。５例ＰＣＲ产物序列分析表明序列同源性小，是克隆特异性的。３例动态分析示３例均在完全缓解期测得白血病克隆，说明ＩｇＨ基因重排ＰＣＲ分析可以检测白血病克隆的消长、演变，值得进一步研究。     

T 细胞受体δ、γ基因在小儿急性白血病中的变化

本文在细胞形态,表面抗原分析的基础上,对20例小儿急性白血症细胞进行TCRδ和γ基因结构的分析。11例属分化早期的白血病中有9例发生TCRδ基因的重排和缺失,其中5例也有TCRγ基因的重排。在5例属非淋巴细胞系的白血病中有3例发生TCRδ基因的重排.3例粒细胞性白血病细胞的TCR基因(δ和γ)均为胚系。有一例细胞表型仅有CD_2表达的白血病细胞,其TCR 基因(δ和γ)也为胚系。结果还显示:TCRδ基因结构发生变化的白血病细胞均有CD_(10)抗原表达。研究提示:TCRδ基因的重排不显示严格的细胞特异性,但是TCR 基因的变化与淋巴细胞系白血病细胞某些表面抗原的表达存在某种联系。     

小儿急性T淋巴细胞白血病tal－1基因缺失分析

根据ｔａｌ－１基因缺失上下游序列设计一对引物，应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术对１０株人白血病细胞株和７０例小儿急性白血病骨髓标本进行ｔａｌ－１基因缺失分析。结果ＣＥＭ、ＨＢＳ－２和ＲＰＭＩ－８４０２三株Ｔ细胞白血病（Ｔ－ＡＬＬ）细胞株以及３／１６例Ｔ－ＡＬＬ发现ｔａｌ－１基因缺失，５４例其它类型急性白血病均未见基因缺失，而且具ｔａｌ－１基因缺失的Ｔ－ＡＬＬ细胞均为胸腺发育Ｉ期，免疫表型特征为ＣＤ＿２＋、ＣＤ＿７＋、ＣＤ＿１￣－、ＣＤ＿４￣－和ＣＤ＿８￣－。ＰＣＲ方法敏感性达１０￣（－４）。说明ｔａｌ－１缺失发生于部分Ｔ－ＡＬＬ中，可用于微小残留病的检测。     

小儿急性白血病的免疫球蛋白重链基因VDJ区重组及其部分序列分析

在Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法分析的基础上用ＰＣＲ方法分析了２７例小儿急性白血病细胞的免疫球蛋白重链基因ＶＤＪ区的变化。６例未分化型白血病中５例有Ｖ＿Ｈ－Ｄ＿Ｈ－Ｊ＿Ｈ基因扩增带，提示已定向Ｂ系。１３例Ｂ系来源的白血病细胞中９例发生ＶＤＪ完全重排，４例Ｂ系来源和１例未分化型白血病ＰＣＲ无阳性扩增带而Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法有重排带。１例普通型白血病ＰＣＲ有阳性扩增带而Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法呈胚系。在１４例阳性病例中有１例出现二条扩增带呈双克隆性。１例Ｔ细胞性白血病和７例非淋系白血病均为阴性与ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法结果一致，对２例未分化型，２例普遍型白血病进行顺序分析，发现它们的重排格局各不相同。     

小儿急性白血病细胞IgH、IgK、TcR重排与免疫分型和临床关联

通过ＦＡＢ分型，ＭｃＡｂ免疫分型及分子生物学，如ＤＮＡ序列分析研究免疫球蛋白及ＴｃＲ的基因重排，研究白血病的发生发展规律更确切地进行白血病分类。结果３４例小儿急性白血病中，ＦＡＢ分型与免疫分型符合３０例，不符合４例，分子生物学均支持后者分型。临床上按形态分型设计方案，治疗效果均不良。分子生物学研究提示ＩｇＨ、ＩｇＫ基因重排具有很高的Ｂ细胞系特异桂，ＴｃＲδ基因的重排不显示严格的细胞特异性。文中对１例急性未分化白血病发病初期进行基因序列分析，治疗二年零二个月后再重复检查，结果阴性，成功地探测白血病治疗后残留白血病细胞的存在与否。这就克服了过去盲目延长缓解期化疗期限，为个体化方案的设计起重大作用。