国产羟苯磺酸钙的药效研究

实验证实羟苯磺酸钙能显著性降低兔血小板聚集比率、血小板粘附性、血浆与血清粘度。能增强微循环、使高分子右旋糖酐造成兔眼结膜微循环障碍的血液流态得到充分的改善。     

反义LRP寡核苷酸对卵巢癌多药耐药细胞系OVCAR-3顺铂耐药性的影响

目的:探讨针对肺耐药基因(LRP gene)设计的反义寡核苷酸(AsODN)对人卵巢癌多药耐药细胞系OVCAR-3顺铂(DDP)耐药性的逆转作用.方法:采用罗丹明B(SRB)显色法检测LRP AsODN和DDP细胞毒性作用;采用脂质体(1iplfectamine 2000)介导LRP AsODN转染人卵巢癌多药耐药细胞系OVCAR-3;采用逆转录酶链式反应(RT-PCR)和Westem blot法检测LRP AsODN转染前后OVCAR-3细胞中LRP的表达:采用流式细胞仪测定OVCAR-3细胞在顺铂作用后的凋亡率.结果:LRP AsODN浓度低于800nmol/L时,对OVCAR-3细胞无明显细胞毒作用;LRP AsODN能明显减少OVCAR-3细胞中LRP mRNA和蛋白的表达,增加其顺铂敏感性,且与剂量呈正相关;转染LRP AsODN前后的OVCAR-3细胞在DDP作用后,凋亡率分别为(15.43±1.14)%和(27.43±2.05)%,两者间差异有显著性意义(p=0.001).结论:LRP AsODN能有效阻断OVCAR-3细胞内LRP的表达,恢复细胞对DDP的敏感性.     

Inhibitory Effects of Anti-sense PTTG on Malignant Phenotype of Human Ovarian Carcinoma Cell Line SK-OV-3

To construct eukaryotic expression vector expressing full length anti-sense pituitary tumor transforming gene (PTTG) mRNA and observe its blocking effect on the potential invasion of human ovarian carcinoma cell line SK-OV-3. PCR primers containing designed enzyme cut sites were used for cloning full-length PTTG gene fragment, and the resulting PCR product was inserted into the eukaryotic vector pcDNA3. 1 in the antisense direction. The recombinant vector was then transfected into SK-OV-3 by Lipofectamine. The positive cell clone was screened by G418, PTTG and bFGF at protein level expression were detected by Western blot. The biological behavior change of transfection positive cells was observed by colony formation in soft agar assay. Our results showed that SK-OV-3 clones stably expressing full-length recombinant pcDNA3. 1-PTTGas were obtained. The expressions of PTTG and bFGF protein in transfected cells were decreased by 61.5% and 52.3%, respectively as compared with non-transfected ones. The number of colony formation was reduced significantly in transfected cells as compared with empty vector transfected and non-transfected cells. It is concluded that the recombinant vector pcDNA3. 1-PTTGas is a novel tool and provides an alternative anti-sense gene therapy targeted at PTTG in human carcinoma.     

含HPV16型反义E7基因的腺相关病毒骨架质粒pUF1-E7AS的构建及鉴定

目的:构建含HPV16型反义E7基因的腺相关病毒骨架质粒pUF1- E7AS并鉴定,探讨腺相关病毒介导的反义E7基因技术用于治疗早期宫颈癌的可能性。方法:使用RT -PCR法扩增全长HPV16型E7基因,利用基因重组法将目的片段反向插入腺相关病毒骨架质粒pUF1并酶切鉴定。结果:RT PCR法扩增全长315bp的HPV16型E7基因,装入pGEM -Teasy载体进行测序,经NCBI数据库blast检索为100%的符合,经基因重组获得含HPV16型反义E7基因的腺相关病毒骨架质粒pUF1 E7AS,AccⅠ和KpnⅠ双酶切鉴定pUF1 E7AS。结论:含HPV16型反义E7基因的腺相关病毒骨架质粒pUF1 E7AS可成功构建。     

卵巢癌细胞畸胎瘤源性生长因子的表达与其恶性行为的关系

卵巢肿瘤是女性常见恶性肿瘤之一，其发病隐匿，病情进展迅速。生长因子及其受体基因的扩增作用和(或)其蛋白产物的超表达与肿瘤的发生、演进密切相关。畸胎瘤源性生长因子(PCDGF)是一种自分泌生长因子，与多种肿瘤的发生、侵袭及细胞存活密切相关。本工作通过比较不同卵巢癌细胞株的体外增殖和侵袭能力，研究PCDGF的表达与卵巢癌恶性行为的关系，为进一步探讨卵巢癌治疗的新靶点提供实验依据。     

两种引物PCR法检测宫颈刮片中HPV DNA的对比及意义

目的探讨聚合酶链式反应检测宫颈刮片中人乳头瘤病毒的意义及可行性.方法共检测131例宫颈刮片,分为门诊组和宫颈癌组.每例分别使用通用型引物和16型E7引物进行PCR,比较两组间及两对引物检测的阳性率.结果普查组和宫颈癌组阳性率分别为32.99%和73.53%,两组阳性率比较,差异有极其显著性(P＜0.001).普查组中,通用引物和HPV16 E7引物扩增阳性率分别为27.84%和16.49%,差异无显著性(P＞0.05).宫颈癌组中,通用引物和HPV16 E7引物扩增阳性率分别为38.24%和67.65%,差异有显著性(P＜0.05).结论PCR法检测宫颈刮片中的人乳头瘤病毒为一种可行的方法.通用型引物在普通人群中检测的敏感性好,可以作为一种筛查的方法,对高危人群检测高危型HPV DNA更有意义.     

紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡及对survivin基因表达的影响

目的 :观察紫杉醇对人卵巢癌细胞系A2 780凋亡的作用 ,探讨其对卵巢癌细胞survivin基因表达的影响。方法 :应用MTT、流式细胞仪等方法研究紫杉醇对卵巢癌细胞系A2 780凋亡的诱导作用 ,运用RT- PCR分析紫杉醇对卵巢癌细胞survivin表达的影响。结果 :紫杉醇可诱导卵巢癌细胞系A2 780凋亡 ,不同浓度的紫杉醇引起的凋亡率不同 ,在紫杉醇浓度≥ 10 - 7mol.L- 1时 ,凋亡率显著升高。经紫杉醇作用后的卵巢癌细胞表达sur vivin较用药前明显下降。结论 :紫杉醇可能通过抑制survivin的表达 ,促进肿瘤细胞凋亡。     

拓扑替康诱导卵巢癌COC1/ DDP 细胞凋亡的分子机制初步探讨

  目的 探讨拓扑替康(TPT)对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1／DDP的杀伤和诱导凋亡活性及其作用机制。方法 MTT比色法与软琼脂克隆形成测定TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1／DDP的杀伤效应；TUNEL法和流式细胞仪研究TPT对靶细胞的凋亡诱导作用；Western blot检测TPT对COC1／DDP细胞内bcl-2、bax和caspase-3基因表达的影响以及caspase-3活性的改变。结果 TPT对COC1／DDP细胞有明显细胞毒性作用，不仅有剂量依赖性，也存在明显的时间依赖性；COC1／DDP细胞在TPT作用后出现特征性凋亡形态特征，且凋亡率由8．54％上升为23．16％(P<0．05)。TPT不影响COC1／DDP细胞内bcl-2蛋白表达，却明显增加19ax蛋白和caspase-3蛋白表达，并提高caspase-3活性。结论 TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1／DDP有明显的杀伤和促凋亡作用，其机制可能依赖于细胞内bax蛋白表达增高和caspase-3的活化。     

便乃通对大白鼠的长期毒性试验研究

目的：观察连续给予便乃通后对大鼠机体产生的毒性反应及其程度。方法：按传统的长期毒性试验方法。结果：高、中、低剂量组大鼠体重增长明显低于阴性对照组，谷丙转氨酶（GPT）明显高于阴性对照组。均有非常显著性差异。结论：该品有滋阴润肠通便的作用。     

泌尿宁颗粒药效学实验研究

目的：观察泌尿宁颗粒的药理作用。方法：采用体外抑菌方法，观察其抑制作用；通过对死大肠肝菌引起兔体温升高的影响观察解热作用，通过醋酸诱发小鼠扭体反应观察镇痛作用；通过尿量变化观察利尿作用。结果：泌尿宁颗粒对大肠杆菌感染小鼠有保护作用；对死大肠杆菌引起的兔体温升高有明显降低作用；对醋酸诱发的小鼠扭体反应有明显的抑制作用；对大鼠有明显的利尿作用。结论：泌尿宁颗粒具有清热、抑菌消炎、利尿、镇痛作用。