大鼠阴道黏膜上皮细胞原代分离及培养方法的改进

目的:研究大鼠阴道黏膜上皮细胞(RVECs)体外培养的影响因素,探索建立RVECs稳定的体外分离培养方法。方法:比较大鼠动情周期、DispaseⅡ配制方法、Dis-paseⅡ浓度、胰酶消化法及培养基对RVECs体外培养的影响。结果:动情前期的大鼠阴道上皮层更厚,消化后可获得更多RVECs;上皮层用D-KSFM配制的DispaseⅡ消化后能很好的贴壁,用PBS配制的DispaseⅡ消化后细胞贴壁欠佳;1.2U/ml DispaseⅡ的分离效果优于0.6U/ml DispaseⅡ;三步胰酶消化法比一步胰酶消化法可获得更多的贴壁细胞;RVECs在含血清培养基中生长快,但易受成纤维细胞污染。结论:动情前期的大鼠阴道组织依次经D-KSFM配制的1.2U/ml DispaseⅡ及三步胰酶消化后,在不含血清的D-KS-FM中培养,可获得更多的RVECs,细胞显示上皮细胞特征。     

原位与体内构建小鼠组织工程阴道的实验研究

目的:比较原位组织构建与体内构建两种方式在小鼠体内进行阴道重建的效果.方法:切除昆明小鼠阴道后采用酶消化法获得阴道上皮细胞.A组(12只)植入猪脱细胞真皮基质(PADM)行原位组织构建;B组(12只)植入自体阴道上皮细胞与纤维蛋白-PADM移植复合物行体内构建.于移植后2周、4周、8周、12周取出重建的阴道组织进行大体观察,并分别进行伊红-美蓝染色(HE)、Van Gieso(VG)染色和广谱角蛋白AE1/AE3免疫组化染色,以动态观察重建阴道组织生长情况及PADM降解情况.重建术后12周用透射电镜观察重建阴道组织超微结构.结果:①A组在移植后2周可见2～3层细胞的上皮形成;移植后4周细胞层数增加,但细胞排列无极向;移植后8周、12周上皮层结构接近正常小鼠阴道上皮层结构.B组移植后2周上皮结构即接近正常小鼠阴道上皮结构;移植后4周、8周、12周上皮层结构基本同移植后2周,但细胞形态更加成熟,极向更为明显.移植后12周A组PADM部分区域结构不完整,B组PADM仍保持基本轮廓.②AE1/AE3免疫组化染色证实了重建阴道的上皮化.③B组透射电镜观察可见上皮细胞之间存在桥粒连接,上皮细胞与基底膜之间有半桥粒连接.上皮层下见成纤维细胞、无髓神经纤维与毛细血管.结论:利用PADM进行原位组织构建与体内构建在实验动物体内均能够完成阴道重建.在技术成熟的条件下,体内构建法比原位组织构建法更适合于进行阴道重建.     

双胞胎姐妹真两性畸形2例

例1,双胞胎之姐,社会性别女性,22岁,主因真两性畸形行一侧附件切除术后8年,要求阴道成形,于2011年12月入院.患者出生时父母即发现其外生殖器异常,12岁月经初潮,3~4d/30~50d,经量少,轻微痛经.14岁时第1次住院查体:身高150cm,双乳发育4cm×4cm.肛查:阴毛呈倒三角,阴阜下方有一长约3cm阴蒂,阴唇融合成皮肤皱褶,阴蒂下2cm处可见尿生殖窦开口,棉签向下探入5cm.     

利妥昔单抗联合化疗治疗儿童成熟B细胞淋巴瘤的有效性和安全性的Meta分析

目的 系统评价利妥昔单抗联合化疗治疗儿童成熟B细胞淋巴瘤的有效性和安全性。方法 计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网、万方等数据库,由2名研究者分别进行资料提取、质量评价,并交叉核对,检索时限为从建库至2022年7月。收集利妥昔单抗联合化疗对比单纯化疗的研究,以3年无事件生存率(EFS)、不良反应发生率作为结局指标。使用STATA11.0软件进行Meta分析、亚组分析、敏感性分析和发表偏倚分析。结果 共纳入9项研究,包含908例新诊断的儿童成熟B细胞淋巴瘤患者。Meta分析结果显示,与单纯化疗组相比,利妥昔单抗联合化疗组治疗新诊断的儿童成熟B细胞淋巴瘤的3年EFS明显增高(HR=0.37,95%CI:0.24～0.58,P<0.05)。亚组分析显示,利妥昔单抗使用≥6次时利妥昔单抗联合化疗组3年EFS高于单纯化疗组,差异有统计学意义(HR=0.32,95%CI:0.17～0.57,P<0.05);利妥昔单抗使用4次时利妥昔单抗联合化疗组3年EFS与单纯化疗组相比,差异无统计学意义(HR=0.41,95%CI:0.17～1.01,P...     

单孔腹腔镜联合阴道造穴乙状结肠代阴道成形术治疗先天性无阴道患者的可行性研究

目的:探讨单孔腹腔镜联合阴道造穴乙状结肠代阴道成形术治疗先天性无阴道(MRKH综合征)患者的临床可行性。方法:回顾性分析河北医科大学第二医院2007年1月至2017年12月接受腹腔镜下乙状结肠代阴道成形术治疗MRKH综合征患者65例,其中单孔腹腔镜联合阴道造穴乙状结肠代阴道成形术37例(单孔腹腔镜组),腹腔镜下乙状结肠代阴道成形术28例(传统腹腔镜组)。比较两组患者术中、术后情况,并采用女性性功能量表(FSFI评分)对性生活质量进行调查分析。结果:单孔腹腔镜组的手术时间低于传统腹腔镜组,差异有统计学意义(P0.05);术中出血量、术后住院时间、术后排气时间、术后并发症比较,差异无统计学意义(P0.05)。两组的FSFI评分满意率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:单孔腹腔镜联合阴道造穴乙状结肠代阴道成形术是安全可行的,手术时间较传统腹腔镜短。     

间充质干细胞在宫腔粘连治疗中的作用及机制研究进展

宫腔粘连(IUA)是严重危害女性生育功能的妇科常见疾病,并且随着宫腔手术的增加呈增长趋势,已成为女性子宫因素不孕的首要病因.间充质干细胞(MSCs)能通过其分化功能与分泌功能促进子宫内膜修复,分泌功能起主要作用.促进子宫内膜修复可能机制为:干细胞归巢后分化为新组织细胞;抑制上皮间质转化(EMT),抑制纤维化进程;调控局...     

腹腔镜保守性手术联合药物治疗中、重度子宫内膜异位症及地诺孕素治疗复发性子宫内膜异位症性盆腔痛的疗效分析

目的探讨腹腔镜保守性手术联合常用药物对中、重度子宫内膜异位症(EMS)的治疗效果,以及新型药物地诺孕素对复发性子宫内膜异位症性盆腔痛(EAPP)的有效性及安全性。方法对2007年1月—2014年1月行腹腔镜保守性手术治疗EMS的432例患者进行回顾性分析与随访,按照术后联合应用不同药物分为A组(单纯行腹腔镜保守性手术组)、B组(术后联合应用GnRH-a类药物组),C组[术后联合应用左炔诺孕酮宫内缓释系统(IUS-LNG)组],D组(术后联合应用孕三烯酮组)。14名EAPP复发患者每日口服地诺孕素2mg治疗6~13个周期。分析各组患者EAPP的缓解情况、EMS合并不孕患者的妊娠率与妊娠时间、EMS的复发率与复发时间;评估EAPP复发患者应用地诺孕素治疗的有效性及安全性。结果(1)4组EAPP患者治疗前后的中位视觉模拟评分(VAS)均得到明显改善;B组、C组患者的改善更为明显。(2)4组患者EMS术后复发率与复发时间比较无统计学差异。(3)A组、B组、D组合并不孕患者的术后妊娠率分别为40.00%、65.21%、50.00%;B组患者术后妊娠率更高。(4)应用地诺孕素治疗复发性EAPP的患者用药前后的VAS评分有统计学差异。结论(1)单纯行腹腔镜保守性手术与手术后联合应用药物均能改善EAPP,提高妊娠率。(2)联合应用GnRH-a类药物与IUS-LNG后EAPP改善更明显,联合应用GnRH-a类药物还可提高妊娠率,且不延长术后妊娠时间。(3)联合药物治疗后复发率与平均复发时间较单纯行腹腔镜保守性手术相比并未降低。(4)地诺孕素有望成为复发性EAPP理想的治疗药物。     

小鼠阴道上皮细胞与猪脱细胞真皮基质-纤维蛋白凝胶构建组织工程阴道的初步研究

目的:初步探讨利用组织工程学技术构建组织工程阴道的方法及可行性。方法:将小鼠阴道上皮细胞以1×105个/ml的密度接种到纤维蛋白凝胶内并与猪脱细胞真皮基质(PADM)复合构成移植片,体外培养48小时后,将移植片埋植到小鼠脊柱两侧皮下。移植后2周、4周、8周和12周取材,对埋植后不同时间取出的移植片行HE染色和VanGieso(VG)染色,观察和评价移植片组织的生长状况;用上皮广谱角蛋白单克隆抗体AE1/AE3进行免疫组化染色,以证实移植片是否存在上皮组织。结果:光镜下观察,皮下埋植后2周,可见少量阴道上皮细胞,4周形成上皮,仅2～3层,8～12周上皮层数增加(约4～5层)。AE1/AE3免疫组化染色结果与HE染色结果一致。VG染色显示随埋植时间推移,PADM内逐渐有细胞长入,结构逐渐降解。结论:阴道上皮细胞与PADM-纤维蛋白构建的移植物体内移植后有血管长入,形成的上皮组织表型与正常阴道上皮表型相同。     

各种阴道成形术的临床应用及其评价

目的探讨多种阴道成形术在临床应用的相关问题。方法查阅近年国内外相关文献,对目前临床应用较多的几种阴道成形术进行评述。结果对于大多数患者来说,非手术治疗是一线治疗方案。若患者不接受非手术治疗或顶压失败可选择Sheares阴道成形术或乙状结肠代阴道成形术。组织工程阴道成形术也许是未来阴道重建发展的方向。结论何种阴道成形术为最佳选择目前尚无定论,应对阴道缺如患者进行医学-心理-社会综合治疗,并对其进行长期随访和帮助。     

肝豆状核变性合并卵巢黏液性交界性肿瘤及复发性流产1例

<正>1 病例报告患者，30岁，因卵巢囊肿8年，明显增大3+月，腹胀半月，于 2021年11月8日入河北医科大学第二医院治疗。8年前患者孕前检查行超声检查发现卵巢囊肿，直径约2 cm, 未处理，间断复查未见明显增大。1年前患者在接受辅助生殖助孕监测排卵过程中发现囊肿增大至5 cm, 遂行经阴道注水腹腔镜检查，术中未见明显异常。3+月前患者孕前检查行超声检查示卵巢囊肿增大约14.5 cm, 无腹痛、腹胀，未处理。半月前患者出现腹胀，